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微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
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产品名称 | 用途 | 货号 |
痤疮丙酸杆菌 | 仅供科研 | GOY-01J6752
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菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*的微生物保存法。
化Crk p38抗体Human TMSβ10(Thymosin Beta 10) ELISA Kit人肝脂(HL)ELISA试剂盒,HL ELISA kit
核心结合因子α1抗体(成骨特异性转录因子)Cbfα1Human TMSβ4(Thymosin Beta 4) ELISA Kit人抗眼肌抗体(EMAb)ELISA试剂盒,EMAb ELISA kit
胆囊收缩素8抗体Human TCC C5b-9(Terminal Complement Complex C5b-9) ELISA Kit人骨成型蛋白7(BMP-7)ELISA试剂盒,BMP-7 ELISA
表面趋化因子受体1抗体Human TNK2(Tyrosine Kinase, Non Receptor 2) ELISA Kit人基质金属蛋白13(MMP-13)ELISA试剂盒,
表面趋化因子受体2抗体Human TNKS1(Tankyrase 1) ELISA Kit人心型脂肪酸结合蛋白(h-FABP)ELISA试剂盒,
表面趋化因子受体3抗体Human TNPO1(Transportin 1) ELISA Kit人血小板反应蛋白/敏感蛋白1(TSP-1)ELISA试剂盒,
表面趋化因子受体4抗体Human TNKS2(Tankyrase 2) ELISA Kit小鼠色素上皮衍生因子(PEDF)ELISA试剂盒,
活化半胱酸蛋白蛋白-3抗体Human TNNC2(Troponin C Type 2) ELISA Kit大鼠可溶性间粘附分子1(sICAM-1)ELISA试剂盒,
痤疮丙酸杆菌 半水 AR,99.0%纤维蛋白溶原抗体Actin α/alpha-SMA 肌动蛋白α(α-SMA)抗体
半水 CP,99.0%DNA修复蛋白NBS1抗体ACTH (7-23) 促皮质激素ACTH (7-23)抗体
钠,四水 AR,99%蛋白质精氨转移1抗体ACTH (18-39) 促皮质激素ACTH(18-39)抗体
钠,四水 CP,98.5%色素P450 1A2抗体ACTH (1-39) 促皮质激素(1-39)抗体
钠,四水 GR,99.5%化酯Cγ1抗体ACTBL1/Ovary 卵巢、胎盘、前列腺、蛋白22抗体
钠 四水合物 ACS, 99%化酯Cγ1抗体ACSM3 丁酰辅A合成3抗体
钠,四水 99.99% metals basis化酯Cγ1抗体ACSL1 长链脂肪辅A连接1/2抗体
氢钠,一水 AR,99%化丝/苏氨蛋白激Plk1抗体Acrosin 顶体前体蛋白抗体
氢钠,一水 CP,98%化多聚合苷激3化抗体ACPT 性抗体
钠 AR突触后密度蛋白93抗体ACPL2 性样蛋白2抗体
DL- AR化突触后密度蛋白93抗体ACOX2 过氧化物酰辅A氧化2抗体
DL- CP化突触后密度蛋白95抗体ACOX1 过氧化物酰辅A氧化1抗体
D(-)- GR,99.5%化肿瘤抑制因PTEN抗体ACOT8 酰辅A硫酯8
烯丁酯 GR,99%化肿瘤抑制因PTEN抗体Aconitase 2/ACO2 铁调节蛋白2抗体
烯丁酯(单体) CP,97%桩蛋白Paxillin抗体Aconitase 1/IRP-1 铁调节蛋白1抗体
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