当前位置:上海谷研实业有限公司>>生化检测试剂盒>>氧化与抗氧化系列>> 羟自由基清除能力可见分光光度法检测试剂盒
货号 | GOY-01S6442 |
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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6442 |
商品介绍:
测定意义
羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。
测定原理:
H2O2/ Fe2+ 通过Fenton反应产生羟自由基,水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质2,3-二羟基苯甲酸,在510nm处有最大吸收峰,加入具有清除能力的物质后,有色物质便会减少,从而可以根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。
自备实验用品:
恒温水浴锅、酶标仪、96孔板和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
炔酸 98%铂炭催化剂 Pt 5%Anti-Ephrin B/FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠Ephrin B抗体IgG
玻璃胶热封配高阻隔垫片,匹配200PSS玻璃瓶瓶盖,φ41.2mm*1mm钯钡 5% Pd basisAnti-Ephrin B (phospho Tyr331) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化Ephrin B抗体IgG
玻璃胶热封配高阻隔垫片,配套60PSS玻璃瓶瓶盖,φ30*1钯钡 10% Pd basisAnti-Ephrin B (phospho Tyr298) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化Ephrin B抗体IgG
铝箔封口垫片(BP-69),匹配500P和950P塑料瓶,φ49.7*1钯碳 5%PdAnti-Ephrin B (phospho Tyr324/329) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化Ephrin B抗体IgG
铝箔封口垫片(BP-06),匹配275P塑料瓶,φ41*1钯碳 10%PdAnti-Ephrin B (phospho Tyr317) /FITC 荧光素标记兔抗人、大、小鼠化Ephrin B抗体IgG
100P玻璃胶铝箔垫片(新盖子) 玻璃胶铝箔 35mm*1mm醋酸铑(II)二聚体 RH:43.0%-46.6%Anti-Nestin/FITC 荧光素标记巢蛋白/神经上皮干蛋白抗体IgG
150P塑料瓶垫片(新盖子) 塑料瓶高阻隔垫片 35mm*1mm铑黑 99.9% metals basisAnti-Nesfatin-1/Nucb2/FITC 荧光素标记新的饱食分子蛋白抗体IgG
4-甲酰苯甲酸 98%氧化铑,无水 99.8% metals basis,Rh 81%Anti-Nestin/FITC 荧光素标记巢蛋白/神经上皮干蛋白抗体IgG
羟自由基清除能力可见分光光度法检测试剂盒甘油 ≥99%, FCCCC16(Human Clara cell protein) ELISA Kit 人克拉拉蛋白兔肌球蛋白轻链9(MYL9)联免疫吸附测定试剂盒
甘油 for HPLC, ≥99.5%HIF-1 Alpha (Human hypoxia-inducible factor 1 Alpha) ELISA Kit 人低氧诱导因子1α兔鸟氨氨酰转移(OCT)联免疫吸附测定试剂盒
甘油 for electrophoresis, ≥99%MC Ab(Human melanocyte antibody) ELISA Kit 人黑色素抗体兔蛋白S(PROS)联免疫吸附测定试剂盒
甘油 EP, BP, JP, USP级TFR/CD71(Human transferrin receptor) ELISA Kit 人转铁蛋白受体兔骨成型蛋白2 (BMP-2)联免疫吸附测定试剂盒
甘油 分析标准品P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit 人P53兔血管内皮生长因子B(VEGF-B)联免疫吸附测定试剂盒
薄层层析硅胶 G60Human Cyclin-D3 ELISA Kit 人周期素D3兔状反应因(THRSP)联免疫吸附测定试剂盒
薄层层析硅胶 H60Human Cyclin-D2 ELISA Kit 人周期素D2兔核RNA输出因子1(NXF1)联免疫吸附测定试剂盒
薄层层析硅胶 GF254 60Human Cyclin-D1 ELISA Kit 人周期素D1兔铁蛋白(FE)联免疫吸附测定试剂盒
薄层层析硅胶 HF254 60ES(Human Endostatin) ELISA Kit 人内皮抑素兔粘膜相关上皮趋化因子(MEC/CCL28)联免疫吸附测定试剂盒
聚乙二单 均分子量350 FE(Human ferritin) ELISA Kit 人铁蛋白兔八聚体转录因子2B(OTF2B)联免疫吸附测定试剂盒
偶氮二异戊 98%MTF(Human microtransferrinuria) ELISA Kit 人微量转铁蛋白兔蛋白激D2(PKD2)联免疫吸附测定试剂盒
1,1'-偶氮双(环己烷) 98%TIMP-1(Human tissue inhibitor of metal protease 1) ELISA Kit 人质金属蛋白组织抑制因子1兔不均一核糖核蛋白A2/B1 (HNRPA2B1)联免疫吸附测定试剂盒
4,4'-偶氮(4-戊) 98%MBP(Human myelin basic protein autoantibody) ELISA Kit 人髓鞘碱性蛋白抗体兔糖蛋白V(GP5)联免疫吸附测定试剂盒
氧聚乙二 M.W. 2000TPA(Human Tissue Polypeptide Antigen) ELISA Kit 人组织多肽抗原兔长效状(LATS)联免疫吸附测定试剂盒
氨聚乙二单 M.W. 5000Human lung cancer Marker ELISA Kit 人肺癌标志物兔肾小球组织糖化终末产物(GTEAGE)联免疫吸附测定试剂盒
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