小鼠肺大静脉平滑肌细胞 返回列表页

实验操作步骤：  

a．采用认可的方案处死啮齿动物。

b．立即在无菌超净台内用70％乙醇擦洗整个动物。

c．用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。

d．用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。

e．剔除胚胎周围的包膜，将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。

产品属性：

产品介绍：

名称    小鼠肺大静脉平滑肌细胞

2.组织来源：肺静脉组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

小鼠肺大静脉平滑肌细胞分离自肺大静脉组织；肺大静脉在用肺呼吸的脊椎动物中，把动脉血由肺送回心脏的静脉，是一个静脉里流动脉血的血管。左右1对，共4条，两条连接右肺，两条连接左肺。肺静脉异位引流是指肺静脉未能直接与左心房连接，而与右心房或体静脉系统连接的先天性心血管异位。肺静脉淤血性肺动脉高压，是由于肺静脉内血液淤滞而引起的肺动脉高压。正常情况下，肺循环具有血压低、阻力小和顺应性大的特点，肺动脉压力高低取决于单位时间内肺动脉血流量和肺血管的阻力，要维持肺循环的低压、低阻的状态，必须保证整个肺循环系统的畅通无阻，血液顺利地由肺动脉经毛细血管进入肺静脉，再入左心室，经过左心室收缩进入体循环，才能避免肺动脉内压力升高。肺大静脉平滑肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。该细胞参与血管壁炎症反应，保持静脉管腔的通畅，还是多数动脉疾病的靶细胞。

5.方法简介：

()实验室分离的小鼠肺大静脉平滑肌细胞采用-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的小鼠肺大静脉平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-M009

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态成纤维细胞样

传代特性可传3代左右

消化液0.25%

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

处理方法：

收到细胞后，检查外包装是否完整，细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题，请即时联系。并进行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。

3. 预热培养基（含10%胎牛血清，1%双抗）。

4. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）。

5. ①若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上，进行传代。

注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，

避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗

并*清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；

适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

重组小鼠 Gremlin 1 / GREM1 蛋白 (His 标签)

重组人 EG-VEGF / prokineticin-1 蛋白 (His 标签)

重组人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 标签)

重组人 Adiponectin / Acrp30 / ADIPOQ 蛋白 (Fc 标签)

重组人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 198-462, His 标签)

重组大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (Fc 标签)

重组小鼠 Re

小鼠肺大静脉平滑肌细胞2 ug pSI pSI 低温运输，-20℃保存

250mL Human RBC Lysis Buffer（人红细胞裂解液）  Human RBC Lysis Buffer 常温保存

125mL NP40 Lysis Buffer with Glycerol,2X（含甘油型NP40裂解液，2X） NP40 Lysis Buffer with Glycerol,2X 常温保存

250次 还原剂兼容型BCA 蛋白定量试剂盒  

2 ug pRL-SV40 pRL-SV40 低温运输，-20℃保存

Phospho-PRAS40 (Thr246)  磷酸化蛋白激AKT底物1抗体 规格: 0.1ml

0.1mL×10 Rosetta (DE3) pLysS 感受态细胞 Rosetta (DE3) pLysS Competent Cell -80℃保存

BTN2A2  嗜脂蛋白亚家族2成员A2抗体 规格: 0.2ml

200 mL 人淋巴细胞分离液1.077 Cell Separation Solution -20℃保存

SMEK2/PP4R3B  /蛋酸3B抗体 规格: 0.2ml

HPV18 E6 monoclonal  人类状瘤毒18 E6单克隆抗体 规格: 0.2mlphospho-NDEL1(Thr219)  磷酸化中心粒蛋白Nudel抗体 规格: 0.1ml

GANP  生发中心相关核蛋白MCM3抗体 规格: 0.2ml