小尾寒羊瘦素（LEP）elisa试剂盒 返回列表页

选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
产品名称：小尾寒羊瘦素(LEP)elisa试剂盒
英文名称：Small Tailed Han Sheep Leptin,LEP ELISA kit
规格：48T/96T
保存： 2-8℃（频繁使用时）；-20℃（长时间不用时）。
有效期： 6 个月(4℃)；12 个月（-20℃）。
用途： 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
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具有如下优点：
一、高效、灵敏、特异的抗体；
二、稳定的重复性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
五、性价比非常好，节省实验经费。
试剂配制：
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事项：
1加样：
①实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；
②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；
③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
2.温育：
①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”，因此尽量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；
③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；
4.显色：
ELISA试剂盒中，如以四甲基联苯胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以邻苯二胺(OPD)为底物，则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定：
读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。
N,N-二(standard for GC,≥99.5%(GC))Itk (2F12) Mouse mAb溴-甲氧基

十二烷(标准品)Phospho-IRS-1 (Ser307) Antibody氧杂环丁-

四(≥99.5% (GC))Phospho-IRS-1 (Ser307) Antibody(S)-(-)-1,2,3,四氢-异喹啉甲酸苄酯对甲磺酸盐

铋标准溶液(100mg/L,基体: 5％HNO3)IRS-1 AntibodyN-苄基-吡咯烷

铍标准溶液(10μg/ml,基体:2%HCl)IRS-1 Antibody1-苄基-吡咯烷酮

铜标准溶液(1000μg/ml,基体:1.0 mol/L HNO3)CEA/CD66e (CB30) Mouse mAb2,二甲酰

铜标准溶液(100µg/mL,基体:1%HNO3)PathScan® Phospho-Btk (Tyr223) Sandwich ELISA kit3,二甲氧基酮

钴标准溶液(1000μg/ml)BSCL2/Seipin (D3W8C) Rabbit mAb2--5-硝基三氟甲

六价铬标准溶液(1000μg/ml，溶剂：水)Phospho-IRS-1 (Ser302) Antibody溴-氟甲

铒标准溶液(1000μg/ml,基体:1.0 mol/L HNO3)Phospho-IRS-1 (Ser1101) Antibody羟基甲酸酯

氟标准溶液(1.00μg/g,基体:0.1MH3BO3,K+2.2mg/L,Na+23mg/L,Ce-37mg/L)Phospho-IRS-1 (Ser1101) Antibody间三氟甲基肉桂酸

金标准溶液(100.0μg/g,基体: 0.5mol/L的HCl溶液)Phospho-IRS-1 (Ser612) Antibody2-肼基-5-溴吡啶

铪标准溶液(1000μg/ml)p38 MAPK (D13E1) XP® Rabbit mAb (Biotinylad)磺酰

铱标准溶液(1000μg/ml,基质：2.0mol/L盐酸)PANK1 (D2W3N) Rabbit mAb4,5-二氟-2-

锰标准溶液(1000mg/L,溶剂：1%硝酸)Phospho-IRS-1 (Ser636/639) Antibody-氟三氟甲

镁标准溶液(100µg/mL,基体:5%HCl)Phospho-IRS-1 (Ser789) Antibody6-羟基-2-萘甲

汞标准溶液(100µg/mL,基体: 3%HNO3)IRS-1 (59G8) Rabbit mAb炔环己

镍标准溶液(500mg/L,溶剂：1%硝酸)Wnt3a Antibody氨基呋咱-羧酸
小尾寒羊瘦素(LEP)elisa试剂盒间乙 98%错配修复蛋白3抗体3-溴-1- 97%乙型肝炎病G型探针法荧光定量PCR试剂盒辛二酸 99%微小染色体维持缺陷蛋白7抗体3-溴甲 97%脑膜炎黄杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒2,2,6,6-四甲基哌啶-1-氧基 98%单核细胞趋化蛋白2抗体(小鼠)2-二乙氨基乙烷盐酸盐 99%肠贾第虫探针法荧光定量PCR试剂盒5-氟尿嘧啶 99%单核细胞趋化蛋白3抗体2-吡啶 99%睡眠嗜组织菌探针法荧光定量PCR试剂盒二酰胺 98%单核细胞趋化蛋白3抗体2-异酸乙酯 97%新凶手弗朗西斯菌探针法荧光定量PCR试剂盒氟硅酸铵 CP巨噬细胞炎症蛋白18抗体环烷羧酸 98%雪腐镰刀菌探针法荧光定量PCR试剂盒六氟钛酸，水溶液 50%水溶液MITF相关转录因子抗体2--4-基吡啶  97%乙型肝炎病C型探针法荧光定量PCR试剂盒2-溴间二甲 97%雷帕霉素靶蛋白抗体2--N,N-二甲基乙酰胺 97%土拉热弗朗西斯菌探针法荧光定量PCR试剂盒
操作流程如下：
（1）仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。