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货号 | GOY-01S6441 |
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测定步骤:
1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。
2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。
3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)
4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。
5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 | 规格 | 检测方法 | 货号 |
100管/96样 | 微量法 | GOY-01S6441 |
商品介绍
测定意义 羟自由基作用于体内蛋白质、核酸、脂类等生物分子,造成细胞结构和功能受损,进而导致体内代谢紊乱引起疾病。羟自由基清除能力是样品抗氧化能力的重要指标之一,在抗氧化类保健品和药品研究中得到广泛应用。 测定原理: H2O2/ Fe2+ 通过Fenton反应产生羟自由基,水杨酸能有效捕捉产生的羟自由基并与其反应生成有色物质2,3-二羟基苯甲酸,在510nm处有最大吸收峰,加入具有清除能力的物质后,有色物质便会减少,从而可以根据吸光值的数值判断样品清除羟自由基的能力。 自备实验用品: 恒温水浴锅、酶标仪、96孔板和蒸馏水。 |
试剂的组成和配制:
提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;
试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;
试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;
试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;
试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
所需的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:
建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验
样本和试剂浪费!
1、样本制备
① 组织样本:
取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行
匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。
【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取
② 细菌/细胞样本:
先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL
提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);
12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10
4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。
注意事项:
1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。
2、对照管只需要做一管。
3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。
4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;
(2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。
若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般
将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。
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羟自由基清除能力微量法检测试剂盒4、4'-二氨酰替 98%Anti-Melamine/FITC 荧光素标记抗三聚抗体IgG猪性成纤维生长因子(AFGF/FGF1)联免疫吸附测定试剂盒
2,4-二羟 98%Anti-Melamine/FITC 荧光素标记抗三聚抗体IgG猪膜桥蛋白联免疫吸附测定试剂盒
对二氨异辛酯 98%Anti-Phospho-Met (Tyr1003) /FITC 荧光素标记化肝生长因子受体(原癌因)抗体IgG猪间变性淋巴瘤激(ALK)联免疫吸附测定试剂盒
3-三氟酚 99%Anti-Phospho-Met (Tyr1234/1235) /FITC 荧光素标记化肝生长因子受体(原癌因)抗体IgG猪胸腺依赖性抗原(TD-Ag)联免疫吸附测定试剂盒
5-羟-1-四氢萘酮 99%Anti-Phospho-Met (Tyr1349) /FITC 荧光素标记化肝生长因子受体(原癌因)抗体IgG猪酮激M2型同工(PKM2)联免疫吸附测定试剂盒
六氟二酐 98%Anti-Melan-A/MART-1 /FITC 荧光素标记黑色素瘤相关抗原/黑色素-A抗体IgG猪肿瘤坏死因子α转化(TACE)联免疫吸附测定试剂盒
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4-羟 98%Anti-Metal ion transporter/FITC 荧光素标记拟南介金属离子转运蛋白抗体IgG猪肌球蛋白轻链1(MYL1)联免疫吸附测定试剂盒
4-三氟水杨 98%Anti-Metronidazole/FITC 荧光素标记抗硝唑抗体IgG猪三叶因子1(TFF1)联免疫吸附测定试剂盒
氢化双酚A 95%Anti-Mfn1/FITC 荧光素标记线粒体融合蛋白1抗体IgG猪血小板激活因子(PAF)联免疫吸附测定试剂盒
4-叔丁-4'-氧二酰 95%Anti-MGMT /FITC 荧光素标记O6DNA转移抗体IgG猪游离血红蛋白(f-Hb)联免疫吸附测定试剂盒
2-环己 99%Anti-MGr1-Ag/37LRP /FITC 荧光素标记层粘连蛋白受体1抗体(N端)IgG猪靶向核糖核(TR)联免疫吸附测定试剂盒
1--3-吡咯烷 97%Anti-MGr1-Ag/37LRP /FITC 荧光素标记层粘连蛋白受体1抗体(C端)IgG猪血小板衍生生长因子受体α(PDGFRα)联免疫吸附测定试剂盒
无水化镁 99.99%,-10 目颗粒, 氩气封装Anti-MICA/FITC 荧光素标记一种应激分子抗体IgG猪神经钙黏蛋白(NCAD)联免疫吸附测定试剂盒
对酰 98%Anti-MIP-1 Alpha/FITC 荧光素标记巨噬炎症因子1α抗体IgG猪降钙素因相关肽(CGRP)联免疫吸附测定试剂盒
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