耳炎差异球菌 返回列表页

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

邻氯苯甲 97%三(2,4-二基)磷化氢-5,5',5''-三磺酸三钠盐 98%Anti-FN/RBITC  红色荧光素标记纤维连接蛋白抗体IgG

邻氯苯甲 99%三（4 -甲氧基- 3 ,5 -二甲苯基）膦 500mgAnti-FOS B/FITC  荧光素标记FosB抗体IgG

邻氯苯甲 Standard for GC三（3-）膦 98%Anti-FOSL1/FITC  荧光素标记兔抗FOSL1抗体IgG

 99.0%三（4-）膦 98%Anti-FOSL2/FITC  荧光素标记兔抗FOSL2抗体IgG

叔丁基锂 1.3M戊烷溶液双(2-二苯基膦乙基)苯基磷 97%Anti-FOXJ1/HFH-4/FITC  荧光素标记抗插头蛋白J1抗体IgG

氯代仲丁烷 99%反-N,N'-二甲基环己烷-1,2-二 97%Anti-FOXO1/FOXO1A/FITC  荧光素标记叉头转录因子O1抗体IgG

氯代仲丁烷 standard for GC,≥99.5% (GC) 5,10,15,20-四(4-吡基)卟啉 97%Anti-Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Thr32) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠叉头蛋白家族抗体IgG

1-金刚烷羧酸 98%双(2,2,6,6,-四甲基-3,5-庚二酮酸)铜 99%Anti-Phospho-FoxO1 (Ser319) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠叉头蛋白家族1抗体IgG

耳炎差异球菌4,4′-二壬-2,2′-联吡 98.0%Anti-CD337/NKp30/NCR3/FITC  荧光素标记性受体NK-p30抗体IgG猪非神经元性烯化(NNE)联免疫吸附测定试剂盒

10-羟并[ h] 喹啉 98%Anti-SIGLEC10/SLG2/FITC  荧光素标记唾液结合性免疫球蛋白样凝集素抗体IgG猪软骨寡聚质蛋白(COMP)联免疫吸附测定试剂盒  

5-羟喹啉 99%Anti-SIGLEC11/FITC  荧光素标记唾液结合性免疫球蛋白样凝集素11抗体IgG猪Bcl2同源拮抗剂1(BAK1)联免疫吸附测定试剂盒

2,9-二-1，10-邻菲洛啉 99.0%Anti-CD335/NKp46/NCR1/FITC  荧光素标记性受体NK-p46抗体IgG猪胎盘生长因子(PGF)联免疫吸附测定试剂盒

1,10-菲罗啉，一水 AR,98%Anti-CD336/NKp44/NCR2/FITC  荧光素标记性受体NK-p44抗体IgG猪硒蛋白P(SEPP1)联免疫吸附测定试剂盒

1,10-菲罗啉(无水) 99%Anti-Nm23/FITC  荧光素标记肿瘤转移抑制因抗体IgG猪脂筏特征蛋白2(FLOT2)联免疫吸附测定试剂盒  

(溴)三氟 98.0%Anti-Nm23-H1/FITC  荧光素标记肿瘤抑制因抗体IgG猪甘露糖苷α1A类成员1(MAN1A1)联免疫吸附测定试剂盒

2,2′:6′,2′′-三吡 98%Anti-Nm23-H2/FITC  荧光素标记肿瘤抑制因抗体IgG猪血管紧张肽A(ATA)联免疫吸附测定试剂盒  

粘 99%Anti-Nociceptin/FITC  荧光素标记孤菲肽/痛敏肽抗体IgG猪角蛋白21-1片段(CYFRA21-1)联免疫吸附测定试剂盒  

3-氨-1,2-  97%Anti-Nociceptin receptor/FITC  荧光素标记孤菲肽受体/痛敏肽受体抗体IgG猪粒趋化蛋白2(GCP-2)联免疫吸附测定试剂盒

对氨 98%Anti-NMP22/FITC  荧光素标记核质蛋白22抗体IgG猪血小板衍生生长因子(PDGF)联免疫吸附测定试剂盒

3- 98%Anti-Nogo-A/NEP /FITC  荧光素标记轴索过度生长抑制因子-A抗体IgG猪BTG3关联核蛋白(BANP)联免疫吸附测定试剂盒

2,4-二乙酮 95%Anti-Nogo-B/A /FITC  荧光素标记轴索过度生长抑制因子-B/A抗体IgG猪皮肤反应因子/炎性因子(SRF/IF)联免疫吸附测定试剂盒

间二 98%Anti-Nogo R/NGR /FITC  荧光素标记轴索过度生长抑制因子受体/Nogo受体抗体IgG猪凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(LOX-1)联免疫吸附测定试剂盒

邻二 98%Anti-Nitric oxide/NO/FITC  荧光素标记一氧化氮抗体IgG猪心肌营养素1(CT-1)联免疫吸附测定试剂盒