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超氧阴离子可见分光光度法检测试剂盒

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更新时间:2022-04-24 15:22:19浏览次数:141次

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货号 GOY-01S6432
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商品属性:

产品名称

超氧阴离子可见分光光度法检测试剂盒

规格

50管/48样

检测方法

可见分光光度法

货号

GOY-01S6432

商品介绍:

测定意义

生物体内超氧阴离子等活性氧具有免疫和信号传导的作用,但积累过多时会对细胞膜及生物大分子产生破坏作用,导致机体细胞和组织代谢异常,从而引起多种疾病。

测定原理:

超氧阴离子与盐酸羟胺反应生成NO2-,NO2-在对氨基苯磺酸和α-萘胺的作用下,生成红色的偶氮化合物,在530nm处有特征吸收峰,根据A530值可以计算样品中O2-含量。

自备实验用品及仪器:

天平、水浴锅、离心机、可见分光光度计/酶标仪、1 mL玻璃比色皿/96孔板、和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

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超氧阴离子可见分光光度法检测试剂盒试剂汞 ACS,99.9995% metals basis犬骨成型蛋白7(BMP7)免疫试剂盒化埃兹蛋白抗体MYOM2  肌间蛋白2抗体

化汞 AR,99.5 %(剧品)犬骨成型蛋白2(BMP-2)免疫试剂盒嗜性粒阳离子蛋白抗体MYOM1  肌间蛋白1抗体

化汞 ACS(剧品)犬钩端螺旋体IgG(Leptospira)免疫试剂盒E1A样分化抑制因子3抗体Myoglobin  肌红蛋白抗体

化汞 AR,99.5%(剧品)犬弓形虫循环抗原(TCA)免疫试剂盒骨骼肌烯化抗体MyoGEF  肌球蛋白相互作用G蛋白交换因子抗体

化汞 CP,99.0%(剧品)犬睾酮(T)免疫试剂盒真核翻译起始因子2C1抗体MYOG/Myogenin  肌红蛋白抗体(肌生成素)

硝汞 AR,98.5%(剧品)犬高迁移率族蛋白A2(HMGA-2)免疫试剂盒化eIF4E结合蛋白抗体MyoD1/Myf3  肌原调节蛋白抗体

硝汞 CP,98.0%(剧品)犬高迁移率族蛋白A1(HMGA-1)免疫试剂盒附睾蛋白抑制蛋白Myocardin  促血管平滑肌分化因子抗体

硝汞 GR,99.0%(剧品)犬高尔体膜蛋白1(GOLM1)免疫试剂盒内皮素B受体抗体MYLK3  肌球蛋白轻链激3抗体

红色 AR,99.5%(剧品)犬肝素辅因子Ⅱ(HCⅡ)免疫试剂盒大肠杆菌脂多糖抗体MYLK2  肌球蛋白轻链激2抗体

黄色 AR,99.5%(剧品)犬肝碱性(L-ALP)免疫试剂盒GLP1类似蛋白Exendin4抗体MYLIP/Idol  低密度脂蛋白受体的诱导降解蛋白抗体

乙汞 AR,98.0%(剧品)犬甘油-3-脱氢(GAPDH)免疫试剂盒化真核翻译起始因子4B抗体MYL9  肌球蛋白轻链9抗体

 AR,99.5%(剧品)犬干扰素诱导蛋白10(IP-10/CXCL10)免疫试剂盒上皮癌转化蛋白2抗体MYL7  肌球蛋白轻链7抗体

 CP,99.0%(剧品)犬泛素蛋白(Ub)免疫试剂盒化转录因子E2F-1抗体MYL6  肌球蛋白轻链6抗体

硝亚汞 CP,98% 犬儿茶酚抑素(CAT)免疫试剂盒化转录因子E2F-1抗体MYL3/Myosin light chain 3  肌球蛋白轻链3抗体

汞溴红 24~27%犬多肽YY(PYY)免疫试剂盒化因子受体抗体MYH9  肌球蛋白重链9抗体

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

 


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