大鼠神经少突胶质细胞 返回列表页

实验操作步骤：  

a．采用认可的方案处死啮齿动物。

b．立即在无菌超净台内用70％乙醇擦洗整个动物。

c．用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。

d．用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。

e．剔除胚胎周围的包膜，将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。

产品属性：

产品介绍：

名称    大鼠神经少突胶质细胞

2.组织来源：脑组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

大鼠神经少突胶质细胞分离自脑皮层组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面，即外侧面（约占整个皮质面积的1/3）、内侧面和底面（占2/3的面积）；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。少突胶质细胞分布于中枢神经系统，在银浸染标本中，少突胶质细胞比星状胶质细胞小，其突起也较小而少，呈珠状，故被称为少突胶质细胞或寡突胶质细胞。但是用特异性免疫细胞化学染色显示的少突胶质细胞，其突起并不少，而且还有许多分支。少突胶质细胞的主要功能是在中枢神经系统中包绕轴突、形成绝缘的髓鞘结构、协助生物电信号的跳跃式高效传递并维持和保护神经元的正常功能。其异常不仅会导致中枢神经系统脱髓鞘病变，还会引起神经元损伤或精神类疾病，甚至可以引发脑肿瘤。根据少突胶质细胞的分布和位置可分为三种：①束间少突胶质细胞（interfasicular-oligodendrocyte），分布在中枢神经系统的白质的神经纤维束之间；②神经细胞周少突胶质细胞（perineuronal-oligodendrocyte），分布在中枢神经系统的灰质区，常位于神经细胞周围，与神经细胞的关系密切，故又称为神经细胞周卫星细胞（perineuronal-satellite-cell），但在神经细胞胞体与此类细胞之间亦常有星形胶质细胞的薄片状突起分隔；③血管周少突胶质细胞（pcrivascular-oligodendrocyte），主要分布在中枢神经系统内的血管周围。少突胶质细胞形成的髓鞘膜是最为特化和复杂动物细胞膜之一，其上有众多跨膜蛋白和表面蛋白用以维持髓鞘的致密稳定结构。如半乳糖脑苷脂（GC），它是髓鞘的一种主要类脂，用GC抗体鉴别成熟的少突胶质细胞是一种比较早的免疫鉴定方法。近十年来，神经发育学科进展较快，更多的少突胶质细胞分子标记物被鉴定出来，如PDGFRa、Mbp、CNP、SOX-10。

5.方法简介：

()实验室分离的大鼠神经少突胶质细胞采用消化、混合细胞营养缺失培养、摇床振荡结合差速贴壁法并通过专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的大鼠神经少突胶质细胞经GC（Galactocerebroside）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件PLL（0.1mg/ml）

培养基含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-R180

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态梭形、多角形

传代特性不增殖；不传代

消化液0.25%

处理方法：

收到细胞后，检查外包装是否完整，细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题，请即时联系。并进行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。

3. 预热培养基（含10%胎牛血清，1%双抗）。

4. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）。

5. ①若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上，进行传代。

注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，

避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗

并*清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；

适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

2 ug pGL4.30 pGL4.30 低温运输，-20℃保存

盐琼脂（USP）  250g

1瓶 HEC-1-A细胞株 HEC-1-A 低温运输和保存

盐增菌液（SC） Selenite Cystine Broth 10ml*20支/包

250U 核酸外切 T Exonulease T -20℃保存

100mL RNase-Free Potassium Acetate Solution（无RNase的乙酸钾溶液），1M，pH7.5  RNase-Free Potassium Acetate Solut얾嵌쐛L⪀

大鼠神经少突胶质细胞50uL 标记dUTP溶液（1mM） Biotin-11-dUTP -20℃保存

15次 植物线粒体纯化试剂盒 Plant  Mitochondria Purification Kit 常温保存

2 ug pBADZ-His6Cre pBADZ-His6Cre 低温运输，-20℃保存

MUG营养琼脂 MUG Nutrient Agar 100g

10g 伊红 Y, 醇溶性 Eosin Y  室温阴凉干燥保存

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH4.0  Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH4.0  常温保存

100mL 水饱和 Water-Saturated Phenol 常温避光保存

500U Tth 核酸内切 IV Tth Endonuclease IV -20℃保存

CD68  CD68抗体 规格: 0.1ml

Rabbit Anti-mouse IgG/AP  碱性磷酸（AP）标记的兔抗小鼠IgG 规格: 0.1ml

Phospho-p70 S6 Kinase Beta (Thr421/Ser424)  磷酸化核糖体S6蛋白激β2抗体 规格: 0.1ml

Kappa-casein/CSN3  κ-酪蛋白抗体 规格: 0.2mlBeta-lactoglobulin  β-球蛋白抗体 规格: 1ml