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公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
产品名称 | 大鼠雌酮(E1)elisa试剂盒 |
英文名称 | Rat estrone,E1 ELISA kit |
货号 | GOY-R74387 |
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
样品收集、处理及保存:
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
大鼠雌酮(E1)elisa试剂盒操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。
血管舒张剂激活磷蛋白(VASP)(酶联免疫吸附试验法) 98% 厚垣镰孢菌 5g
神经疾病靶标酯酶(NTE)(酶联免疫吸附试验法) 97% 灰红链霉菌 100mg
整合素αV(ITGαV)(酶联免疫吸附试验法) 98% 皮氏罗尔斯通氏菌 1g
基质重塑关联蛋白5(MXRA5)(酶联免疫吸附试验法) 98% 短小芽孢杆菌 250mg
斯钙素1(STC1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 固氮菌 1g
Klotho蛋白(KL)(酶联免疫吸附试验法) 98% 蜡状芽孢杆菌 5g
层黏连蛋白受体1(LAMR1)(酶联免疫吸附试验法) 90% 环棱褐孔菌 100g
心营养素样细胞因子1(CLCF1)(酶联免疫吸附试验法) 90% 壳菌 25g
细胞骨架活性调节蛋白(ARC)(酶联免疫吸附试验法) 90% 谷氨酸棒杆菌 5g
生长分化因子3(GDF3)(酶联免疫吸附试验法) 97% 活泼微球菌 1g
生长分化因子3(GDF3)(酶联免疫吸附试验法) 97% 翘鳞香菇 25g
多巴胺转运蛋白(DAT)(酶联免疫吸附试验法) 97% 链格孢 5g
异柠檬酸脱氢酶1(IDH1)(酶联免疫吸附试验法) 97% 白腐菌 1g
骨髓基质细胞抗原2(BST2)(酶联免疫吸附试验法) 99% 粘丝膜菌 100g
膜铁转运蛋白(FPN)(酶联免疫吸附试验法) 99% 霍氏格里蒙特氏菌 25g
Ⅳ型胶原α3(COL4α3)(酶联免疫吸附试验法) 99% 美澳型核果褐腐病菌 500g
原钙黏素15(PCDH15)(酶联免疫吸附试验法) 98% 好食脉孢菌 100g
铜伴侣超氧化物歧化酶(SOD4)(酶联免疫吸附试验法) 98% 动物双歧杆菌 25g
甲酸化学法石蜡切片抗原修复处理 IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) 100 ul
柠檬酸化学法石蜡切片抗原修复处理 IL2RG(Cytokine receptor common subunit gamma) 20 ul
物理法石蜡切片松动组织抗原修复处理 DSG3(Desmoglein-3) 100 ul
胰蛋白酶抗原修复溶液 (NADPH oxidase 1) 100 ul
抗体荧光标记制备(见蛋白/抗体标记专题) LAD1(Ladinin-1) 100 ul
HRP标记抗体稳定/稀释溶液 ITGA5(Integrin alpha-5) 100 ul
AP标记抗体稳定/稀释溶液 XBP1(X-box-binding protein 1) 20 ul
通用抗体稀释溶液 DKK2(Dickkopf-related protein 2) 100 ul
HRP生物素稳定/稀释溶液 C19orf10(UPF0556 protein C19orf10) 20 ul
AP生物素稳定/稀释溶液 CHIA(Acidic mammalian chitinase) 100 ul
荧光生物素稳定/稀释溶液 PDX1(Pancreas/duodenum homeobox protein 1) 100 ul
通用型HRP复合物稳定/稀释溶液 UBE3A(Ubiquitin-protein ligase E3A) 20 ul
酪胺信号扩增 ENTPD1(Ectonucleoside triphosphate diphosphohydrolase 1) 100 ul
生物素标记二抗DAB显色 IFITM10(Interferon-induced transmembrane protein 10) 100 ul
FITC标记二抗POD转换 DSG3(Desmoglein-3) 100 ul
超敏型HRP-TMB底物显色 PRKCE(Protein kinase C epsilon type) 100 ul
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