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产品名称:鱼类促性腺激素释放激素(GnRH)elisa试剂盒
英文名称:Fish gonadotropin-releasing hormone,GnRH ELISA Kit
规格:48T/96T
保存: 2-8℃(频繁使用时);-20℃(长时间不用时)。
有效期: 6 个月(4℃);12 个月(-20℃)。
用途: 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
操作流程如下:
(1)仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
六偏酸钠SimpleChIP® Mouse MEST Intron 1 Primers1-基-金刚烷
无脂肪酸牛血清白蛋白SignalSlide® NF-κB p65 IHC Controls2,4,6-*基-2,4,6-三基环三硅氧烷
二羟基酮(>97%,BR)SignalSilence® Sharpin siRNA I4,10-二氮杂-15-冠5-
心肌黄酶(>30U/mg,BR)DyLight™ 594 Phalloidin三基烷
水溶毛地黄皂苷IRS-1 Inhibition Antibody Sampler Kit羟基-硝基吡啶
DSPPAF1 (D9G9X) Rabbit mAb2,二-5,6-*基嘧啶
二四酸二钠一镁盐Phospho-Tau (Thr181) (D9F4G) Rabbit mAb酸环己酯
谷氨酸脱氢酶Merlin (D3S3W) Rabbit mAb2-溴-氟甲
对羟基三唑hERG1a (D1Y2J) Rabbit mAb氟-羟基甲
亚氨基二酸(>98%,BR)SIX1 (D4A8K) Rabbit mAb6-溴烟酸甲酯
二氧化铅(>98%,BR)SCAI (D9A7Y) Rabbit mAb二基二酸二酯
DL-酸锂(>98%,BR)USP Antibody Sampler Kit2,二甲基咪唑
式碳酸镁五水(>98%,BC)Merlin (D6N8H) Rabbit mAb1-甲基-吲哚酸
二氧化锰(>97.5%,BC)ADAMTS1 (D5G4Z) Rabbit mAb2,二氟
1,二基脲(>98%,BR)SimpleChIP® Human HSP90β Promor Primers2-甲硫基
聚二600Dab2 (D7O9T) Rabbit mAb甲硫基-2-丁酮
普鲁士兰(>98%,BS)PathScan® Phospho-FGF Receptor 1 (panTyr) Sandwich ELISA Kit多肽试剂 U
派洛宁B(Ind)IL-6 (D5W4V) XP® Rabbit mAb (Mouse Specific)2--氨基
鱼类促性腺激素释放激素(GnRH)elisa试剂盒Guanidine sulfate,99%通用试剂 100G
3-Ami-5-cyclopropyl-1H-pyrazole,99%通用试剂 250MG
2-Nitroimidazole,98%通用试剂 1G
2-Nitroimidazole,98%通用试剂 250MG
2,1,3-Benzothiadiazole,98%通用试剂 5G
3,6-Dibromo-9-phenylcarbazole,98%通用试剂 1G
4-Bromo-1H-imidazole,97%通用试剂 1G
5-Bromothiazole,95%通用试剂 1G
2-Bromothiazole-5-carboxylic acid,97%通用试剂 1G
Ethyl 2-amithiazole-4-carboxylate,96%通用试剂 1G
4-Thiazolecarboxylic acid,97%通用试剂 1G
2-Ami-4-methylbenzothiazole,97%通用试剂 5G
2,6-Dichlorobenzothiazole,≥97%通用试剂 1G
4,5-Dimethylthiazole,≥97%通用试剂 5G
4-Bromopyrazole,99%通用试剂 1G
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