小鼠小梁网细胞 返回列表页

实验操作步骤：  

a．采用认可的方案处死啮齿动物。

b．立即在无菌超净台内用70％乙醇擦洗整个动物。

c．用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。

d．用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。

e．剔除胚胎周围的包膜，将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。

产品属性：

产品介绍：

名称    小鼠小梁网细胞

2.组织来源：眼球

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

小鼠小梁网细胞分离自眼球组织；小梁网由角膜基质纤维、后界膜和角膜内皮向后扩展而成，覆盖在巩膜静脉窦的内侧。小梁网细胞在眼内压调节中起着关键作用；小梁网细胞内有特定的神经递质和神经肽受体，其中包括肾上腺素、乙酰和神经肽Y。青光眼是由于眼内压力升高而造成的一种不可逆致盲眼病，小梁网细胞的体外培养是青光眼病因学研究的重要手段之一。在小梁网细胞中，一长串的血管活性多肽和生长因子能够触发细胞内信号传导机制，小梁网细胞可合成不同类型的细胞外基质蛋白以及金属。形态学观察可见，刚从组织块长出的原代细胞，形态各异，多数呈星状或不规则形。细胞有胞突，核椭圆形，胞体肥大，胞浆丰富，且可见吞噬颗粒。随着细胞的增生及相互融合为单层，细胞的形态趋于一致。胞浆的色素颗粒及胞突消失，排列紧密呈类似上皮细胞的扁椭圆形或不规则形。胞体透亮，包膜清晰。

5.方法简介：

()实验室分离的小鼠小梁网细胞采用组织贴块法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的小鼠小梁网细胞经NSE（神经元特异性烯醇化酶）免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件PLL（0.1mg/ml）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-M115

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态梭形、多角形

传代特性可传1-2代

消化液0.25%

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

处理方法：

收到细胞后，检查外包装是否完整，细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题，请即时联系。并进行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。

3. 预热培养基（含10%胎牛血清，1%双抗）。

4. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）。

5. ①若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上，进行传代。

注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，

避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗

并*清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；

适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

放线菌培养基(改良高氏1号) Actinomycetes culture medium 250g 0.78-50 ng/mL 人垂体腺苷酸环化激活肽（ PACAP）ELISA试剂盒

1瓶 NG108-12 [108CC15]细胞株 NG108-12 [108CC15] 低温运输和保存 31.2-2000 pg/mL 人血管动蛋白样1(AMOTL-1)ELISA试剂盒

大豆胰酪蛋白胨肉汤（含亚硫酸铁） Trypticase Soy Broth with Ferrous Sulfate 250g 1.56-1

小鼠小梁网细胞phospho-VEGFR2(Tyr951)  磷酸化管内皮生因子受体2抗体 规格: 0.1ml

麦康凯琼脂培养基（MacC） Maconkey Agar Medium 250g

Phospho-c-Fos (Thr325)  磷酸化c-fos抗体 规格: 0.1mlphospho-JAK2(Tyr1007+Tyr1008)  磷酸化蛋白激JAK-2抗体 规格: 0.1ml

Beta-lactoglobulin  β-球蛋白抗体 规格: 1mlPTOV1  前列瘤高表达蛋白1抗体 规格: 0.2ml

CCDC82  卷曲螺旋结构域蛋白82抗体 规格: 0.2ml

ULBP2/N2DL2  UL16结合蛋白2抗体 规格: 0.2ml

RERG  Ras相关雌激素调节生抑制蛋白 规格: 0.2ml

5次 填入法DNA末端标记试剂盒A Fill-in DNA End Labeling Kit -20℃保存

0.1mg 山羊抗兔IgG，荧光素488标记 Goat Anti-Rabbit IgG ,IF488 Conjugate  4℃保存

2 ug pMA-27s-1 pMA-27s-1 低温运输，-20℃保存

含1%棉籽糖的PY培养基  1ml*20支

10mg 中性蛋白 Neutral Protease 4℃保存