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血磷浓度微量法检测试剂盒

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所  在  地上海市

更新时间:2022-04-27 14:43:18浏览次数:157次

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货号 GOY-01S6794
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选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

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商品属性:

产品名称

血磷浓度微量法检测试剂盒

规格

100管/96样

检测方法

微量法

货号

GOY-01S6794

商品介绍:

测定意义

血磷主要指血中的无机磷,以无机磷盐的形式存在。血浆中钙、磷浓度关系密切,在以mg/dL表示时,二者的乘积([Ca]×[P])为30~40。当([Ca]×[P])>40,则钙和磷以骨盐形式沉积于骨组织;若([Ca]×[P])<35则妨碍骨的钙化,甚至可使骨盐溶解,影响成骨作用。血钙和血磷含量的相对稳定依赖于钙、磷的吸收与排泄和钙化及脱钙两种代谢的相对平衡。上述平衡受到3、甲状旁腺素和降钙素等激素的调节。

测定原理:

去除血清中有机磷后,无机磷盐与钼酸铵试剂生成磷钼酸,被还原后呈蓝色,在620nm有光吸收;通过测定620 nm吸光度,计算血液中磷含量。

自备仪器和用品:

离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

1-萘盐酸盐 AR磺氯吡 分析标准品Anti-p58ipk/FITC  荧光素标记p58ipk抗体IgG

1-萘盐酸盐 99%磺氯吡Anti-Phospho-p63 (Ser395) /FITC  荧光素标记化P63肿瘤抑制基因抗体IgG

核固红 AR2,3-二氟苯甲 97%Anti-p70 S6 Kinase/P70 Beta1/FITC  荧光素标记p70S6Kb抗体IgG

核固红 Biological stain2,3-二氟苯甲酸 98%Anti-P73 protein/FITC  荧光素标记P73肿瘤抑制基因抗体IgG

AR恶霉灵 分析标准品,99.8%Anti-Phospho-p73 (Tyr99) /FITC  荧光素标记化P73肿瘤抑制基因抗体IgG

酚藏花红 80%2-溴苯乙烯 97%,含0.1%对叔丁基邻苯二酚(TBC)稳定剂Anti-p70 S6 Kinase Beta2/P70 Beta2/FITC  荧光素标记核糖体S6蛋白激β2抗体IgG

蓝五号钠盐 80%5-乙酰酸盐酸盐 99%Anti-Phospho-p63 (Ser455)/FITC  荧光素标记化P63肿瘤抑制基因抗体IgG

四苯 99%土木香内酯 分析标准品,≥97%(HPLC)Anti-Phospho-p63 (Ser160/Ser162) /FITC  荧光素标记化P63肿瘤抑制基因抗体IgG

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