嗜肺军团菌 返回列表页

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

化特异性蛋白激抗体Human PKD2L1 ELISA Kit4-乙酰酚

膜相关蛋白激Lyn抗体Human PIWIL2 ELISA Kit柴胡皂苷 d

化膜相关蛋白激Lyn抗体Human PIP5K1A ELISA Kit丹参酮 I

化膜相关蛋白激Lyn抗体Human PJA1 ELISA Kit土槿皮

脑瘤相关基因抗体Human PIP5K1B ELISA Kit白英

大脑边缘系统相关膜蛋白抗体Human PIP5K3 ELISA Kit肾茶

神经突触粘附样分子1抗体Human PIP5KL1 ELISA Kit大鼠基质金属蛋白2/明胶A(MMP-2/Gelatinase A)Elisa测定试剂盒

富含亮重复序列/Ⅲ型纤维连接蛋白4抗体Human PITPNA ELISA KitBOC-L-苯

嗜肺军团菌N-Cbz-对氨环己酮 97%Anti-Phospho-MYL2 (Ser19) /FITC  荧光素标记化肌球蛋白轻链2抗体IgG猪趋化素样因子超家族成员7(CKLFSF7)联免疫吸附测定试剂盒

1,2-环氧环戊烷 97%Anti-MYL3/Myosin light chain 3 /FITC  荧光素标记肌球蛋白轻链3抗体IgG猪血小板衍生生长因子受体β(PDGFRβ)联免疫吸附测定试剂盒

4,4-二氧-2-丁酮  95%Anti-MYL3/Myosin light chain 3/Biotin   标记 肌球蛋白轻链3抗体IgG猪葡萄糖激(GCK)联免疫吸附测定试剂盒

4,6-二-2-嘧 98%Anti-MLH1/FITC  荧光素标记错配修复蛋白1抗体IgG猪胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)联免疫吸附测定试剂盒

双羟二二乙酯 97%Anti-MMP-1/FITC   荧光素标记质金属蛋白-1抗体IgG猪蛋白激抑制剂γ(PKIγ)联免疫吸附测定试剂盒

酮二酯 95%Anti-MMP-1/FITC  荧光素标记质金属蛋白-1抗体猪信号传导转录激活因子1(STAT1)联免疫吸附测定试剂盒

3,4-环氧四 96%Anti-MMP-2/FITC   荧光素标记质金属蛋白-2抗体IgG猪胰腺再生蛋白3α(REG3α)联免疫吸附测定试剂盒

3-(2-呋喃)烯 99%Anti-MMP-3/FITC   荧光素标记质金属蛋白-3抗体IgG猪促生长激素释放激素(GHRH)联免疫吸附测定试剂盒

2-呋喃烯 99%Anti-MMP-7/PE  荧光素PE标记质金属蛋白-7抗体IgG猪乙酰酯(AChE)联免疫吸附测定试剂盒  

环氧烯缩二乙 90%Anti-MMP-8/FITC  荧光素标记质金属蛋白-8抗体IgG猪特异性巨噬武装因子(SMAF)联免疫吸附测定试剂盒

酮钠，一水 98%Anti-MMP-9/FITC  荧光素标记质金属蛋白-9蛋白抗体IgG猪免疫球蛋白G Fc片段(Fcγ)联免疫吸附测定试剂盒

三乙酰氧氢化钠 90%Anti-MMP-9/FITC  荧光素标记质金属蛋白-9抗体IgG猪神经粘附分子(NCAM/CD56)联免疫吸附测定试剂盒

2,3,5-三-O-苄-b-D-阿拉伯呋喃糖 99%Anti-MMP-10/FITC  荧光素标记质金属蛋白-10抗体IgG猪黑色素瘤关联硫软骨素蛋白聚糖(MCSP)联免疫吸附测定试剂盒  

3,3,3-三(对)  97%Anti-MMP-11/FITC  荧光素标记质金属蛋白-11抗体IgG猪δ样蛋白1同源物(DLK-1)联免疫吸附测定试剂盒

1,2,3,4-四氢-1-萘  98%Anti-MMP-12/FITC  荧光素标记质金属蛋白-12/巨噬金属弹力蛋白抗体IgG猪纤溶原激活剂(PLGA)联免疫吸附测定试剂盒