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微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
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产品名称 | 用途 | 货号 |
假肠膜明串珠菌肠 | 仅供科研 | GOY-01J7410
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菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*的微生物保存法。
四(THF) 无水级,≥99.9%, 无稳定剂双(2-氧代-3-恶唑烷基)酰氯 97%Anti-CD5L/Api6 CD5L抗体
三乙烯四 Standard for GC(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-二吡咯基脲六氟酯 98%Anti-CD6/TP120 CD6抗体
原甲酸酯 99.8%,无水级三吡咯烷基溴化鏻六氟盐 98%Anti-CD54/ICAM-1 间粘附分子-1抗体
盐酸硫 分析标准品2-溴-1,3,5-三异基苯 96.0 %Anti-ICAM-2/CD102 间粘附分子-2抗体
2,3,5-三酚 分析标准品6-氯苯并三氮唑-1,1,3,3-四甲基脲六氟酯 98% Anti-ICAM-3/CD50 间粘附分子-3抗体
1,1,1-三(羟甲基)乙烷 97%2-氯-1,3-二甲基咪唑鎓四氟酸盐 98%Anti-CD55/DAF 衰变加速因子CD55抗体
三氟磺酰氯 99%6-氯-1-羟基苯并三氮唑 98%Anti-CD59 CD59抗体
十三 97%1-(氯-1-吡咯烷基亚甲基)吡咯烷六氟盐 98%Anti-CD56/NCAM1 CD56抗体
假肠膜明串珠菌肠亚铁化钠 CP小鼠DNA(胞嘧-5)转移1(DNMT1)免疫试剂盒转录调节蛋白BACH2抗体RPLP0 性核糖体蛋白大亚P0抗体
原酯 98%小鼠DAB2互作蛋白(DAB2IP)免疫试剂盒炭疽杆菌致死因子LF抗体RPL5 核糖体蛋白L5抗体
原三乙酯 99%小鼠C型钠尿肽(CNP)免疫试剂盒蛋白BOC抗体RPL19 核糖体蛋白L19抗体
氟化铵 AR,98%小鼠C肽(C-Peptide)免疫试剂盒氨肽A抗体RPL15 核糖体蛋白L15抗体
氟化铵 GR,98%小鼠C反应蛋白(CRP)免疫试剂盒脑钠素/利钠肽抗体RPL11/GIG34 生长抑制蛋白34
氟化氢铵 AR,98.5% 小鼠CXC趋化因子受体4(CXCR4)免疫试剂盒Bcl2 beta蛋白抗体RPH3AL Ras相关GTP结合蛋白抗体
氢氟 AR,40.0%小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)免疫试剂盒骨涎蛋白抗体RPA70 单链结合蛋白70抗体
氟 AR,40.0%小鼠CXC趋化因子配体16(CXCL16)免疫试剂盒死亡调解子抗体RPA32/RPA2 复制因子A蛋白2
氟 CP,40.0%小鼠CXC趋化因子配体1(CXCL1)免疫试剂盒Apollon凋亡抑制蛋白抗体RP1/DCDC4A 视网膜色素变性蛋白1抗体
氟 49.5-50.5%溶液小鼠CXC趋化因子13(Cxcl13/Blc/Scyb13)免疫试剂盒表面趋化因子受体6抗体ROS/c ros 活性氧簇ROS抗体
氨胍碳氢盐 98.5%小鼠Cramp 免疫试剂盒β-内啡肽/β endorphin抗体RORG/ROR gamma 维相关孤儿受体γ抗体
三氧化二锑 99.99% metals basis小鼠c-jun 免疫试剂盒骨成型蛋白受体1A抗体RORB 维相关孤儿受体β抗体
三氧化二锑 AR,99.5%小鼠c-fos 免疫试剂盒Bcl-xL蛋白抗体ROR1/ROR alpha 维相关孤儿受体α抗体
重去素 ≥98%(HPLC),USP小鼠CD8分子(CD8)免疫试剂盒化Bcl-xL(Ser62)抗体ROR Gamma/RORC/NR1F3 孤儿核受体抗体
L-去素 98%小鼠CD4分子(CD4)免疫试剂盒相关死亡促进因子Bad抗体Ron 原癌因c-Met相关酪氨激抗体
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