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保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

Anti-VWCE/URG11/FITC  荧光素标记乙型肝炎病X蛋白(HBxAg)抗体IgG

Anti-VWF/FITC  荧光素标记血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗体IgG

Anti-VWF/RBITC  红色罗丹明标记血管假性血友病因子/血管性血友病因子抗体IgG

Anti-Brucella /HRP  辣根过氧化物标记兔抗羊、牛、猪、人布氏杆菌抗体IgG

Anti-WDR26 /Gold   胶体金离子标记Gβ类似蛋白WDR26抗体IgG

Anti-WDR26/FITC  荧光素标记Gβ类似蛋白WDR26抗体IgG

Anti-WEE1 protein/FITC  荧光素标记WEE1蛋白抗体IgG

Anti-Wnt1/FITC  荧光素标记信号通路Wnt1抗体IgG

RoseivivaxhaloduransT型四氟三通接头 24#人补体蛋白5(C5)免疫试剂盒DEK癌因结合蛋白PHD3  脯氨羟化抗体

塑料洗瓶 500ml人补体蛋白4(C4)免疫试剂盒PSD95结合蛋白1抗体PHD2  脯氨羟化2抗体

橡皮筋人补体蛋白3(C3)免疫试剂盒PSD95结合蛋白2抗体PHD1/prolyl hydroxylase  脯氨酰羟化抗体

干燥器  300mm人补体C1q肿瘤坏死因子相关蛋白1(C1QTNF1/CTRP1)免疫试剂盒PSD95结合蛋白4抗体PHAPI2/APRIL 性核蛋白32家族B抗体

Ph试纸 1-14人补体7(C7)免疫试剂盒双PHD-D4锌指蛋白2抗体PHAP1  蛋白2A抑制剂1抗体

大口三角烧瓶 500ml人补体3裂解产物(C3SP)免疫试剂盒双特异性22抗体PH-4/P4H-TM  脯氨水解4抗体

直三口烧瓶 500ml人补体1抑制物抗体-IgM(C1INH-IgM)免疫试剂盒Erdj5/DNAJC10蛋白抗体PGT/Slco2a1  溶质载体蛋白家族21成员2抗体

具塞三角烧瓶 500ml人补体1抑制物抗体-IgG(C1INH-IgG)免疫试剂盒肿瘤调亡素/肿瘤坏死因子受体死亡受体6抗体PGRPS  肽聚糖识别蛋白1抗体

茄型烧瓶 500ml 24口 磨口人补体1q(C1q)免疫试剂盒跨膜TMIGD1蛋白抗体PGRN/Granulin  颗粒蛋白前体抗体

茄型烧瓶 250ml 24口 磨口人玻连蛋白(VTN)免疫试剂盒轴丝中链动力蛋白抗体PGRMC  孕激素受体膜相关元件抗体

短管标准漏斗 40mm人波形蛋白(VIM)免疫试剂盒轴丝动力蛋白7抗体PGLS  葡萄糖内酯抗体

短管标准漏斗 75mm人并殖吸虫抗体(IgM)免疫试剂盒环指蛋白19抗体PGK1  激1抗体

短管标准漏斗 150mm人并殖吸虫抗体(IgG)免疫试剂盒δ-连环蛋白抗体PGGT1β  香叶烯转移1β抗体

茄形烧瓶 100ml/24#人型肝炎病(HCV)核心抗原(HCV core Ag)免疫试剂盒防御素β2抗体PGGT1B/FNTB  蛋白香叶烯转移1β（FTβ）抗体

直口三角烧瓶 1000ml人型肝炎IgM(HCV-IgM)免疫试剂盒化信号转导功能蛋白DAB2抗体PGGT1A/FNTA  蛋白香叶烯转移1α抗体