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实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
产品名称 | 鱼肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒 |
英文名称 | Fish Tumor Necrosis Factor α,TNF-α ELISA KIT |
货号 | GOY-F74797 |
样品收集、处理及保存:
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
3-羟基己酸乙酯 2305-25-1地昔尼尔 标准品 号:112636-83-6 100MGα1-微球蛋白(α1M)(酶联免疫吸附试验法)>98.0%(GC)
2-氯-4-甲基-5-硝基吡啶 23056-33-9 苯甲环唑 标准品 号: 0.25g转化生长因子β2(TGFβ2)(酶联免疫吸附试验法)>98.0%(GC)
2-氯-4-甲基-5-硝基吡啶 23056-33-9 野燕枯 标准品 号:43222-48-6 1000mg转录因子20(TCF20)(酶联免疫吸附试验法)>98.0%(GC)
2-氯-4-甲基-5-硝基吡啶 23056-33-9 二氟沙星 标准品 号: 0.1g干扰素β(IFNβ)(酶联免疫吸附试验法)>98.0%(GC)
2-氯-4-硝基吡啶 23056-36-2 除虫脲 标准品 号:35367-38-5 1000mg心钠肽(ANP)(酶联免疫吸附试验法)98%
2-氯-4-硝基吡啶 23056-36-2 吡氟酰草胺 标准品 号:35367-38-5 250mg抗缪勒管激素(AMH)(酶联免疫吸附试验法)98%
2-氯-4-硝基吡啶 23056-36-2 二氟吡隆 标准品 号:109293-98-3 100mg丝氨酸蛋白酶1(PRSS1)(酶联免疫吸附试验法)98%
2-氯-5-甲基-3-硝基吡啶 23056-40-8 双氢链霉索 标准品 号: 5490-27-7 10ml着丝粒蛋白I(CENPI)(酶联免疫吸附试验法)98%
2-氯-5-甲基-3-硝基吡啶 23056-40-8 异戊乙净 标准品 号:22936-75-0 250mg免疫球蛋白G4(IgG4)(酶联免疫吸附试验法)98%
盐酸甲苯噻 23076-35-9 二甲吩草胺 标准品 号:87674-68-8 100mg补体1抑制因子(C1INH)(酶联免疫吸附试验法)98%
盐酸甲苯噻 23076-35-9 落长灵 标准品 号:55290-64-7 1000mg前列腺素F受体(FP)(酶联免疫吸附试验法)98%
5-溴-2-甲氧基苯磺酰氯 23095-05-8 标准品 号:60-51-5 100mg前列腺素E受体2(EP2)(酶联免疫吸附试验法)98%
5-溴-2-甲氧基苯磺酰氯 23095-05-8 烯酰吗啉 标准品 号:110488-70-5 100mg载脂蛋白C1(APOC1)(酶联免疫吸附试验法)98%
5-溴-2-甲氧基苯磺酰氯 23095-05-8 二硝托胺 标准品 号:148-01-6 2ml麦芽糖酶糖化酶(MGA)(酶联免疫吸附试验法)98%
3,4-二甲氧基苯磺酸氯 23095-31-0 消螨普 标准品 号:39300-45-3 250mgⅡ型前胶原羧基端原肽(PⅡCP)(酶联免疫吸附试验法)98%
小鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit,48T/96T 拉丁属名: Pseudomonas meridiana
大鼠孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit,48T/96T 拉丁属名: Bacillus pumilus
兔子孕激素/孕酮(PROG)ELISA Kit,48T/96T 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
人脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA Kit,48T/96T 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
小鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA Kit,48T/96T 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
大鼠脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA Kit,48T/96T 拉丁属名: Hansenula anomala
兔子脱氢表雄酮硫酸酯(DHEA-S)ELISA Kit,48T/96T 拉丁属名: Trametes ochracea
牛雌二(E2)ELISA Kit,48T/96T 拉丁属名: Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus
鱼肿瘤坏死因子α(TNF-α)elisa试剂盒鸡传染性法氏囊病抗体7α-Hydroxy-4,11-cadinadiene-3,8-dione中文名:别名:分子式:C15H20O3
IL-2诱导型T细胞激酶抗体Preisocalamendiol中文名:别名:1(10),4(15)-Germacradien-6-one分子式:C15H24O
异戊烯基焦磷酸异构酶2抗体Macrocarpal N中文名:大果桉醛N别名:分子式:C28H38O7
IGF2基因的互补基因1蛋白抗体Macrocarpal D中文名:大果桉醛D别名:分子式:C28H40O6
干扰素诱导蛋白44样蛋白抗体Kobusone中文名:别名:分子式:C14H22O2
操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。
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