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微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
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产品名称 | 用途 | 货号 |
椭圆酿酒酵母 | 仅供科研 | GOY-01J7013
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菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*的微生物保存法。
Anti-WIP1/FITC 荧光素标记原癌基因WIP1抗体IgG
Anti-WNK1/FITC 荧光素标记赖缺陷型蛋白激1抗体IgG
Anti-WNK3 protein/FITC 荧光素标记/激家族成员的基因WNK3抗体IgG
Anti-WNK4/FITC 荧光素标记一种新的/激家族成员的基因WNK4抗体IgG
Anti-Il-7R a(CD127)/RBITC 罗丹明标记白介素-7受体a抗体IgG
Anti-IL-17/RBITC(Interleukin-17) 罗丹明标记白介素17抗体IgG
Anti-HAS/RBITC 红色罗丹明标记人血清白蛋白抗体IgG
Anti-CD14/RBITC 红色罗丹明标记CD14蛋白抗体IgG
椭圆酿酒酵母硫腺嘌呤 用于植物培养,98%F XII (Human coagulation factor XII ) ELISA Kit 人Ⅻ兔胰岛素样生长因子2受体(IGF2R)联免疫吸附测定试剂盒
6-嘌呤 99%F X III (Human coagulation factor X III ) ELISA Kit 人ⅩⅢ兔中心体蛋白110(CEP110)联免疫吸附测定试剂盒
胞嘧核苷 99%F III (Human coagulation factor III 0 ELISA Kit 人Ⅲ兔二氢嘧样2(DPYSL2)联免疫吸附测定试剂盒
胞嘧核苷 用于培养,≥99.0% (HPLC)C1q(Human Complement 1q) ELISA Kit 人补体1q兔免疫球蛋白G Fc段受体II(FcγR II/CD32)联免疫吸附测定试剂盒
胞苷-5' 98%GP- IV (Human plaet membrane glycoprotein IV ) ELISA Kit 人血小板膜糖蛋白Ⅳ兔蛋白3(PR3)联免疫吸附测定试剂盒
2,2'-脱水尿苷 99%Human Thymosin Alpha1 ELISA Kit 人α1兔促状腺素(TSH)联免疫吸附测定试剂盒
5-尿嘧 98%CCP(Human complement control protein) ELISA Kit 人补体调节蛋白兔钙调(CaN)联免疫吸附测定试剂盒
2-腺嘌呤核苷 99%PBP/CXCL7(Human plaet basic protein) ELISA Kit 人血小板碱性蛋白兔纤维连接素相关抗原(FRA)联免疫吸附测定试剂盒
盐环胞苷 98%HLA-C(Human leukocyte antigen C) ELISA Kit 人类白抗原C兔前列腺素F(PGF)联免疫吸附测定试剂盒
胞嘧 98%HLA-E(Human leukocyte antigen E) ELISA Kit 人类白抗原E兔嗅素4(OLFM4)联免疫吸附测定试剂盒
阿糖胞苷 98%HLA-A(Human leukocyte antigen A) ELISA Kit 人类白抗原A兔红生成素受体(EPOR)联免疫吸附测定试剂盒
2’-脱氧尿苷 99%SAP(Human Serum amyloid P) ELISA Kit 人血清淀粉样蛋白P兔半凝集素12(GAL12)联免疫吸附测定试剂盒
2,6-氨嘌呤 98%MBLR(Human Mannma binding lectin receptor) ELISA Kit 人甘露糖凝集素受体兔Rho关联卷曲螺旋蛋白激2(Rock-2)联免疫吸附测定试剂盒
2,4-二嘧 98%PL/Fbn(Human plasmin/fibrinolysin) ELISA Kit 人纤溶/纤维蛋白溶兔C-Myc结合蛋白(MYCBP)联免疫吸附测定试剂盒
2’-脱氧胞苷,一水 99%BCR(Human B cell receptor) ELISA Kit 人B受体兔白三烯A4水解(LTA4H)联免疫吸附测定试剂盒
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