TRAIL-R3 elisa试剂盒说明书 返回列表页

实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
公司采用的全是进口原材料研，发灵敏性高，高效性，*抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。

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样品收集、处理及保存：
1）.细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2）细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104-106/ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3）血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4）血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。
5）体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6.）组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
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检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
真菌/酵母碱性焦磷酸酶（Alkaline Pyrophosphatase）活性比色法定量　MECOM (MDS1 and EVI1 complex locus protein EVI1) 　20 ul

植物碱性焦磷酸酶（Alkaline Pyrophosphatase）活性比色法法定量　MS4A1(B-lymphocyte antigen CD20) 　100 ul

通用型细胞对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性比色法定量　MPST (3-mercaptopyruvate sulfurtransferase) 　100 ul

通用型组织对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性比色法定量　ADAM17(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 17) 　100 ul

通用型血液对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性比色法定量　MREG (Melanoregulin) 　100 ul

通用型细胞对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性荧光定量　MADD (MAP kinase-activating death domain protein) 　100 ul

通用型组织对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性荧光定量　MAS1 (Proto-oncogene Mas) 　100 ul

通用型血液对氧磷酶1（PON1）有机磷酸酶活性荧光定量　MAMLD1 (Mastermind-like domain-containing protein 1) 　100 ul

细胞对氧磷酶1（PON1）芳香酯酶活性比色法定量　MMP15(Matrix metalloproteinase-15) 　100 ul

组织对氧磷酶1（PON1）芳香酯酶活性比色法定量　MCF2L (Guanine nucleotide exchange factor DBS) 　100 ul

血液对氧磷酶1（PON1）芳香酯酶活性比色法定量　RPIA(Ribose-5-phosphate isomerase) 　100 ul

组织对氧磷酶1（PON1）内酯酶活性比色法定量　MXI1 (Max-interacting protein 1) 　100 ul

血液对氧磷酶1（PON1）内酯酶活性比色法定量　MTCP1 (Protein p13 MTCP-1) 　100 ul

细胞对氧磷酶2（PON2）活性比色法定量　MECOM (MDS1 and EVI1 complex locus protein EVI1) 　100 ul

组织对氧磷酶2（PON2）活性比色法定量　ACADM (Medium-chain specific acyl-CoA dehydrogenase, mitochondrial) 　100µl

细胞对氧磷酶3（PON3）活性比色法定量　MKKS (McKusick-Kaufman/Bardet-Biedl syndromes putative chaperonin) 　100 ul
TRAIL-R3 elisa试剂盒说明书free fatty acids游离脂肪酸种属: Leccinum│versipelle (Fr. & Hök) Snell异色疣柄牛肝菌

inducible nitric oxide synthase诱导型NO合酶种属: Gyroporus│castaneus (Bull.) Quél.褐园孢牛肝菌

Protamine鱼精蛋白种属: Crebrothecium│ashbyii阿舒多囊酵母

Irisin鸢尾素种属: Monascus│sanguineus血红红曲

Pokemo原癌基因pokemo种属: Cordyceps│sp.虫草属

Protocadherin-18原钙粘蛋白18种属: Cantharellus│cibarius Fr.#鸡油菌

Pregnanediol孕二醇种属: Apiospora│montagnei Sacc.蒙塔涅梨孢假壳

progesterone induced blocking factor孕激素诱导阻断因子种属: Theileria│sinensis中华泰勒虫（甘肃临洮株-2）

Progesterone孕酮种属: Yersinia│intermedia中间型耶尔森菌

progesterone receptor孕酮受体种属: Monotospora│sp.单头孢霉属

apoprotein A1载脂蛋白A1种属: Agrocybe│cylindracea (DC.) Gillet茶新菇AC-5

apoprotein A2载脂蛋白A2种属: Ganodermaapplanatum(Pers.exWullr)Pat.平盖灵芝（树舌）

apoprotein A4载脂蛋白A4种属: Phyllosticta│sorghina Sacc.高粱叶点菌

apoprotein B100载脂蛋白B100种属: 2μgpBARGPE1质粒

apoprotein B48载脂蛋白B48种属: Cedecea│sp.地西菌
操作步骤：
1）运用前，将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫，防止加样时参加很多的气泡，发生加样上的差错。
2）依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定，能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后参加50ul于反响孔内。
3）参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，悄悄振动混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
5）每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP，悄悄振动混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
7）每孔参加底物A、B各50ul，悄悄振动混匀，37℃温育10分钟。防止光照。
8）取出酶标板，敏捷参加50ul停止液，参加停止液后应当即测定成果。
9）在450nm波利益测定各孔的OD值。