当前位置:上海谷研实业有限公司>>进口elisa试剂盒>>大鼠elisa试剂盒>> 48T/96T大鼠泛素结合酶(E2/UBCE)elisa试剂盒
公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
产品名称 | 大鼠泛素结合酶(E2/UBCE)elisa试剂盒 |
英文名称 | Rat E2/ubiquitin-conjugating enzyme,E2/UBCE ELISA Kit |
货号 | GOY-R74319 |
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
样品收集、处理及保存:
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
大鼠泛素结合酶(E2/UBCE)elisa试剂盒操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。
巨噬细胞炎性蛋白1β(MIP1β)(酶联免疫吸附试验法) 98% 酿酒酵母 5g
巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)(酶联免疫吸附试验法) 98% 尖孢镰孢 1g
巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)(酶联免疫吸附试验法) 98% 平菇 5g
巨噬细胞炎性蛋白3α(MIP3α)(酶联免疫吸附试验法) 98% 密歇根棍状杆菌标记亚种 1g
巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP3β)(酶联免疫吸附试验法) 98% 戊糖片球菌 25g
巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP3β)(酶联免疫吸附试验法) 98% Priceomyces sp. 5g
巨噬细胞炎性蛋白3β(MIP3β)(酶联免疫吸附试验法) 97% 阿姆斯特丹曲霉 1g
基质金属蛋白酶1(MMP1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 枯草芽孢杆菌枯草亚种 1g
基质金属蛋白酶1(MMP1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 大肠埃希氏菌 25g
基质金属蛋白酶1(MMP1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 黑曲霉 5g
基质金属蛋白酶10(MMP10)(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 谷氨酸棒杆菌 100g
间隙连接蛋白43(CX43)(酶联免疫吸附试验法) ≥98% *百脉根根瘤菌 25g
间隙连接蛋白43(CX43)(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 托素湖莱茵海默氏菌 5g
间隙连接蛋白43(CX43)(酶联免疫吸附试验法) 98% 黑曲霉 1g
间隙连接蛋白43(CX43)(酶联免疫吸附试验法) 98% 侧孢短芽孢杆菌 5g
间隙连接蛋白43(CX43)(酶联免疫吸附试验法) 98% 长枝木霉 5g
间隙连接蛋白43(CX43)(酶联免疫吸附试验法) 98% 棱柱散尾菌 100g
间隙连接蛋白43(CX43)(酶联免疫吸附试验法) 98% 枯草芽胞杆菌 25g
SDS蛋白酶DNA萃取 ACY1(aminoacylase-1) 100 ul
异丙醇沉淀法DNA萃取 SAT1(Diamine acetyltransferase 1) 100 ul
快速盐析法DNA萃取 SH3BP2(SH3 Domain Binding Protein 2) 100 ul
二(DPA)DNA比色法定量测定 IFNA2(Inteferon alpha 2a) 100 ul
二氨基甲酸(DABA)DNA比色法定量测定 NENF(Neudesin) 20 ul
铽盐(terbiumIII)单链DNA荧光定量测定 SCUBE2(Signal peptide, CUB and EGF-like domain-containing protein 2) 100 ul
PICO GREEN双链DNA荧光定量测定 beta 1-ARA(beta 1 adrenergic receptor autoantibody) 100 ul
λDNA (HINDIII)标准样(100至2000碱基) Wnt6(Protein Wnt-6) 100 ul
一步法胶回收 NEXN(Nexilin) 100 ul
高质纯化胶回收 ICAM 5(Intercellular Adhesion Molecule 5) 100 ul
聚酰胺凝胶粉碎法胶回收 Spexin 20 ul
高质纯化聚酰胺凝胶粉碎法胶回收 UNC5B(Netrin Receptor UNC5B) 100 ul
初级离心柱DNA回收 IRS1(Insulin Receptor SubstRate 1) 100 ul
高级离心柱DNA回收 CXCR2(C-X-C chemokine receptor type 2) 20 ul
聚二醇沉淀法DNA清洁 CEBPZ(CCAAT/enhancer binding protein zeta) 100 ul
酶解法PCR清洁 PAP(Plasmin-Antiplasmin Complex) 100 ul
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