霍氏肠杆菌 返回列表页

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

L-焦谷 99%异戊烷 分析标准品，≥99.9% (GC)GP-BB(Human Glycogen phosphorylase BB) ELISA Kit  人糖原化同工BB

D-焦谷 98%正戊烷 CP,98%Lp- Alpha(Human lipoprotein Alpha) ELISA Kit  人脂蛋白α

DL-焦谷 98%磺酰氯 98%Cr(Human Crosslaps) ELISA Kit  人骨胶原交联

钼酸铵，四水 AR活性炭 AR，200目，粉末状，褐色C I CP(Human cross-linked C-opeptides of Type I collagen) ELISA Kit  人Ⅰ型前胶原C末端肽

钼酸铵，四水  用于和昆虫培养, 81-83% as MoO3活性炭 CP，200目，粉末状，褐色DPD(Human deoxypyridinoline) ELISA Kit  人脱氧吡酚/脱氧吡啉

碳酸钴(II) AR,Co 43.0 - 47.0 %亚二乙酯 99%PY(Human pyridinium crosslink/PyriLinks) ELISA Kit  人吡交联物

氧化亚钴 AR5-壬酮 98%OPN(Human Osteopontin) ELISA Kit  人骨桥素

氢氧化钴 99.9%,粉末2,6-二氯苄基氯 98%GABA(Human Gamma-aminobutyric acid) ELISA Kit  人γ丁酸

霍氏肠杆菌2-丁乙酯 99%小鼠胰高血糖素(GC)免疫试剂盒衔接蛋白β抗体TRIM3/RNF22  环指蛋白22抗体

酯 98%小鼠胰淀素(Amylin)免疫试剂盒衔接蛋白γ/γ-Adaptin抗体TRIM29/ATDC  共济失调毛细血管扩张症D相关蛋白抗体

聚烯 平均分子量M.W ~3,000 小鼠胰岛抗体(ICA)免疫试剂盒水通道蛋白-9抗体TRIM25  雌激素反应锌指蛋白抗体

聚烯 平均分子量M.W ~1,800 小鼠胰岛素自身抗体(IAA)免疫试剂盒膜粘连蛋白A3抗体TRIM17/RNF16  环指蛋白16抗体

聚烯 平均分子量M.W ~450,000小鼠胰岛素原(PI)免疫试剂盒膜粘连蛋白 A4抗体TRIM17/RNF16  环指蛋白16抗体

三钠 97%小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白6(IGFBP-6)免疫试剂盒自噬相关蛋白8A抗体TRIM11/RNF92  环指蛋白92抗体

三钠 HPLC，99.0% (T)小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白4(IGFBP-4)免疫试剂盒化蛋白激B抗体TRIM10/RNF9  环指蛋白9抗体

三酐 98%小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白3(IGFBP-3)免疫试剂盒化腺苷单活化蛋白激α1抗体TRIB3/p65 interacting inhibitor of NF-kappaB  神经死亡诱导蛋白激抗体

 97%小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白2(IGFBP-2)免疫试剂盒化蛋白激B抗体TRIB2  MAPK调控蛋白TRB2抗体

硫 720 I.U./mg小鼠胰岛素样生长因子结合蛋白1(IGFBP-1)免疫试剂盒脱氧胞苷脱氨蛋白抗体TRIAD3  锌指蛋白抑制NFκB蛋白抗体

椰子油 CP小鼠胰岛素样生长因子2(IGF-2)免疫试剂盒蛋白激锚定蛋白13抗体TRH  促状腺素释放激素抗体

氢氧化 AR,90%小鼠胰岛素样生长因子1受体(IGF-1R)免疫试剂盒AP-1μ2抗体TRF2  端粒结合蛋白2抗体

氢氧化 granules,AR,90%小鼠胰岛素样生长因子1(IGF-1)免疫试剂盒肥大膜抑制性受体Allergin1抗体TReP132/RAPA  癌抗雌激素抵抗蛋白2抗体

氢氧化钠 GR,97%,片状小鼠胰岛素受体β(ISR-β)免疫试剂盒脑钠通道蛋白1抗体TREML2/TLT2  髓系触发受体样转录因子2抗体

氢氧化钠 颗粒状,AR,96%小鼠胰岛素降解(IDE)免疫试剂盒肌动蛋白相关蛋白2/3复合亚单位B1抗体TREML1/TLT1  髓系触发受体样转录因子1抗体

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。