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公司采用的全是进口原材料研,发灵敏性高,高效性,*抗体,吸附均匀、吸附性好,回收利用率高、可靠性强,无效包退包换,公司提供免费代测服务,各种种属ELISA试剂盒产品齐全,质量可靠。
产品名称 | 大鼠儿茶酚抑素elisa试剂盒 |
英文名称 | Rat catestatin ELISA Kit |
货号 | GOY-R74327 |
实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备;
2. 加样(标准品及样本)100µL,37°C孵育1小时;
3. 吸弃,加检测溶液A100µL,37°C孵育1小时;
4. 洗板3次;
5. 加检测溶液B100µL,37°C孵育30分钟;
6. 洗板5次;
7. 加TMB底物90µL,37°C孵育10-20分钟;
8. 加终止液50µL,立即450nm读数。
样品收集、处理及保存:
1).细胞培养上清:适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液,以1000×g离心15分钟,收集上清。
2)细胞:用PBS反复洗涤细胞3次,调整细胞浓度达到104-106/ml 左右,通过反复冻融,使细胞破坏并放出细胞内成份,或者细胞超声粉碎,离心取上清液检测。
3)血清:在室温下,血液自然凝固,以1000×g离心15分钟,取上清待测。
4)血浆:应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合后静置10-20 分钟后,以1000×g离心15分钟,收集上清。
5)体液:包括胸腹水、脑脊液,分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集,以1000×g离心15分钟,收集上清。
6.)组织标本:切取组织标本,称取重量0.5mg,加入500ul 的PBS,用手工或匀浆器,或超声破碎仪将标本匀浆,以2000-3000 rmp离心20 分钟,收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3,因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
7)保存:如果样品不能立即检测,应将其分装,-70 ℃保存,避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀,应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒,检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37℃暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
大鼠儿茶酚抑素elisa试剂盒操作步骤:
1)运用前,将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫,防止加样时参加很多的气泡,发生加样上的差错。
2)依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定,能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1:1稀释后参加50ul于反响孔内。
3)参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板,悄悄振动混匀,37℃温育1小时。
4)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
5)每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP,悄悄振动混匀,37℃温育30分钟。
6)甩去孔内液体,每孔加满洗刷液,振动30秒,甩去洗刷液,用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷,洗刷次数添加一次。
7)每孔参加底物A、B各50ul,悄悄振动混匀,37℃温育10分钟。防止光照。
8)取出酶标板,敏捷参加50ul停止液,参加停止液后应当即测定成果。
9)在450nm波利益测定各孔的OD值。
骨成型蛋白4(BMP4)(酶联免疫吸附试验法) 98% 云芝栓孔菌(变色栓菌) 25g
S100钙结合蛋白(S100)(酶联免疫吸附试验法) 98% 贝伦格葡萄座腔菌梨生专化型 5g
S100钙结合蛋白(S100)(酶联免疫吸附试验法) ≥98% 镰孢菌 1g
S100钙结合蛋白(S100)(酶联免疫吸附试验法) ≥98% Aureimonas ureilytica 250mg
粘蛋白1(MUC1)(酶联免疫吸附试验法) AR 霉拟蜡孔菌 25g
粘蛋白1(MUC1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 薄黑孔菌 1g
粘蛋白1(MUC1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 干草鞘氨醇单胞菌 5g
睫状神经营养因子(CNTF)(酶联免疫吸附试验法) 97% 抗霉菌链霉菌 100g
睫状神经营养因子(CNTF)(酶联免疫吸附试验法) 97% 秀珍菇 25g
睫状神经营养因子(CNTF)(酶联免疫吸附试验法) 97% 尿酸氧化节杆菌 5g
上皮性钙黏附蛋白(CDHE)(酶联免疫吸附试验法) 99% 枯草芽胞杆菌 1g
上皮性钙黏附蛋白(CDHE)(酶联免疫吸附试验法) 99% 大肠埃希菌 250mg
上皮性钙黏附蛋白(CDHE)(酶联免疫吸附试验法) 97% 传染性支气管炎病毒 250ml
嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)(酶联免疫吸附试验法) 97% 亲和素链霉菌 50ml
嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)(酶联免疫吸附试验法) 98% 苹果链格孢 25g
嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)(酶联免疫吸附试验法) 98% 红细菌属 5g
嗜酸粒细胞趋化因子(ECF)(酶联免疫吸附试验法) >98.0%(GC) 赖氨酸芽胞杆菌属 1g
白介素8受体α(IL8Rα)(酶联免疫吸附试验法) >98.0%(GC) Bacillus 250mg
纯化RNA样品储存液 anti-EPO antibody(anti-Erythropoietin antibody) 20 ul
mRNA纯化树脂再生 fFN(fetal Fibronectin) 100 ul
RNA比色法定量 LIPE(Hormone-sensitive lipase) 100 ul
RNA荧光(RiboGreen)定量 2, 5-OAS(2, 5-oligoadenylate synthetase) 100 ul
两步法RT-PCR MDA(Malonyldehyde) 20 ul
一步法RT-PCR IL-12RB1(Interleukin-12 receptor subunit beta-1 78) 10 mg
直接细胞克隆两步法逆转录PCR NPTN(Neuroplastin) 100 ul
两步法RT-PCR荧光定量 AP12(Apelin 12) 100 ul
逆转录RT HGS(Hepatocyte growth factor-regulated tyrosine kinase substRate) 100 ul
体外RNA转录合成 calprotectin 1 mg
体外加帽RNA转录合成 Thrombin 100 ul
RNasin(核糖核酸酶抑制剂) LPS IgG(lipopolysaccharide IgG) 100 ul
MMLV(H点突变) SCRG1(Scrapie responsive protein 1) 20 ul
Oligo(dT)18(500纳克/微升) HGS(Hepatocyte growth factor-regulated tyrosine kinase substRate) 100 ul
Hexamer(随机引物)(200纳克/微升) AP12(Apelin 12) 20 ul
SOCS calprotectin 100 ul
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