MMP-8 elisa试剂盒说明书 返回列表页

实验流程:
1. 实验前标准品、试剂及样本的准备；
2. 加样（标准品及样本）100µL，37°C孵育1小时；
3. 吸弃，加检测溶液A100µL，37°C孵育1小时；
4. 洗板3次；
5. 加检测溶液B100µL，37°C孵育30分钟；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90µL，37°C孵育10-20分钟；
8. 加终止液50µL，立即450nm读数。
公司采用的全是进口原材料研，发灵敏性高，高效性，*抗体，吸附均匀、吸附性好，回收利用率高、可靠性强，无效包退包换，公司提供免费代测服务，各种种属ELISA试剂盒产品齐全，质量可靠。

​
样品收集、处理及保存：
1）.细胞培养上清：适用于检测体外培养的细胞分泌性成份。用无菌管收集细胞上清液，以1000×g离心15分钟，收集上清。
2）细胞：用PBS反复洗涤细胞3次，调整细胞浓度达到104-106/ml 左右，通过反复冻融，使细胞破坏并放出细胞内成份，或者细胞超声粉碎，离心取上清液检测。
3）血清：在室温下，血液自然凝固，以1000×g离心15分钟，取上清待测。
4）血浆：应根据标本的要求选择EDTA 或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合后静置10-20 分钟后，以1000×g离心15分钟，收集上清。
5）体液：包括胸腹水、脑脊液，分泌物等。使用不含热原和内毒素的离心管收集，以1000×g离心15分钟，收集上清。
6.）组织标本：切取组织标本，称取重量0.5mg，加入500ul 的PBS，用手工或匀浆器，或超声破碎仪将标本匀浆，以2000-3000 rmp离心20 分钟，收集上清进行检测。
样品中不能含有NaN3，因NaN3 抑制辣根过氧化物酶的（HRP）活性。
7）保存：如果样品不能立即检测，应将其分装，-70 ℃保存，避免反复冷冻。保存过程中如出现沉淀，应再次离心。血液标本尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中含大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
​
检测程序：
1.  加样：每孔各加入标准品或待测样品100ul ，将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2.  洗板：用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次，向滤纸上印干。
3.  每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4.  洗板：同前。
5.  每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0分钟。
6.  洗板：同前。
7.  每孔加入底物工作液100ul ，置 37℃暗处反应15 分钟。
8.  每孔加入100ul 终止液混匀。
9.  30分钟内用酶标仪在450 nm处测吸光值。
组织基质金属蛋白酶（MMP-12）活性比色法定量　GDA (Guanine deaminase) 　1 Kit

体液基质金属蛋白酶（MMP-12）活性比色法定量　GP2 (Pancreatic secretory granule membrane major glycoprotein GP2) 　100 ul

细胞基质金属蛋白酶（MMP-13）活性荧光定量　GNL3 (Guanine nucleotide-binding protein-like 3) 　20 ul

组织基质金属蛋白酶（MMP-13）活性荧光定量　GPM6B (Neuronal membrane glycoprotein M6-b) 　100 ul

体液基质金属蛋白酶（MMP-13）活性荧光定量　COLGALT2 (Procollagen galactosyltransferase 2) 　100 ul

细胞基质金属蛋白酶（MMP-13）活性比色法定量　GPIHBP1 (Glycosylphosphatidylinositol-anchored high density lipoprotein-binding protein 1) 　100 ul

组织基质金属蛋白酶（MMP-13）活性比色法定量　GNL3L (Guanine nucleotide-binding protein-like 3-like protein) 　20 ul

体液基质金属蛋白酶（MMP-13）活性比色法定量　GMPR2 (GMP reductase 2) 　100 ul

细胞基质金属蛋白酶（MMP-14）活性荧光定量　PIGR(Polymeric Immunoglobulin Receptor/Membrane Secretory Component) 　100 ul

组织基质金属蛋白酶（MMP-14）活性荧光定量　TCN2(Transcobalamin-2) 　100 ul

体液基质金属蛋白酶（MMP-14）活性荧光定量　GLG1 (Golgi apparatus protein 1) 　100 ul

基质金属蛋白酶（MMP）明胶酶谱法（gelatin-zymography）电泳分析（MMP2/9）　GIN1 (Gypsy retrotransposon integrase-like protein 1) 　100 ul

基质金属蛋白酶（MMP）酪蛋白酶谱法（casein-zymography）电泳分析（MMP1/3/7/12/13）　GCA(Grancalcin) 　100 ul

基质金属蛋白酶（MMP）胶原蛋白酶谱法（collagen-zymography）电泳分析（MMP1/13）　H2AFX(Histone H2AX) 　1 Kit

基质金属蛋白酶（MMP）羧甲基转铁蛋白（CM transferrin -zymography电泳分析（MMP7）　GLCE (D-glucuronyl C5-epimerase) 　100 ul

细胞/组织蛋白（基质金属蛋白酶）样品制备　LGALSL (Galectin-related protein) 　100 ul
MMP-8 elisa试剂盒说明书Cluster of differentiation 40CD40分子种属: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.平菇(假姬菇30)

Cluster of differentiation 4CD4分子种属: Ruania│albidiflava白黄阮继生氏菌

CD68CD68分子种属: Gluconacetobacter│sp.葡糖酸醋杆菌属

Cluster of differentiation 8CD8分子种属: Agaricus│blazei Murrill#姬松茸

chemerin脂肪因子种属: Streptomyces│xiangpingensis湘坪链霉菌

c-Jun N-terminal kinasesc-Jun氨基末端激酶种属: Leucosporidium│scottii斯高特白冬孢酵母

CX3CL1;FractalkineCX3C趋化因子;fractalkine种属: Paenibacillus│cookii库氏类芽孢杆菌

CX3CR1CX3C趋化因子受体1种属: Penicillium│solitum离生青霉

CXC-chemokine ligand 1CXC趋化因子配体1种属: Virgibacillus│necropolis古墓枝芽孢杆菌

CXC-chemokine receptor 4CXC趋化因子受体4种属: Trichaptum│abietinum (Dicks.) Ryvarden冷杉多孔菌

C-Reactive ProteinC-反应蛋白种属: Thermoproteales│sp.热变形菌

C-PeptideC肽种属: Articulospora│sp.节枝孢霉

Delta-like ligand4Delta-like ligand4种属: Aeribacillus│pallidus苍白好氧小杆菌

Dickkopf 1Dickkopf 1种属: Ganoderma│sp.仙芝(灵芝属之一种)

DNA methyltransferase 1DNA甲基转移酶1种属: Desulfovibriosp.
操作步骤：
1）运用前，将所有试剂充沛混匀。不要使液体发生很多的泡沫，防止加样时参加很多的气泡，发生加样上的差错。
2）依据待测样品数量加上规范品的数量决议所需的板条数。每个规范品和空白孔主张做复孔。每个样品依据自个的数量来定，能运用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后参加50ul于反响孔内。
3）参加稀释好后的规范品50ul于反响孔、参加待测样品50ul于反响孔内。当即参加50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，悄悄振动混匀，37℃温育1小时。
4）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
5）每孔参加80ul的亲和链酶素-HRP，悄悄振动混匀，37℃温育30分钟。
6）甩去孔内液体，每孔加满洗刷液，振动30秒，甩去洗刷液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。假如用洗板机洗刷，洗刷次数添加一次。
7）每孔参加底物A、B各50ul，悄悄振动混匀，37℃温育10分钟。防止光照。
8）取出酶标板，敏捷参加50ul停止液，参加停止液后应当即测定成果。
9）在450nm波利益测定各孔的OD值。