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总糖含量可见分光光度法检测试剂盒

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所  在  地上海市

更新时间:2022-04-27 14:28:13浏览次数:176次

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货号 GOY-01S6768
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商品属性:

产品名称

总糖含量可见分光光度法检测试剂盒

规格

50管/48样

检测方法

可见分光光度法

货号

GOY-01S6768

商品介绍:

测定意义

糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一,也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。总糖也可称为碳水化合物,包括可溶性的单糖,二糖以及不溶性的淀粉,纤维素,几丁质等。

测定原理:

总糖酸水解为还原糖,在NaOH和丙三醇存在下,DNS试剂与还原糖共热后被还原成氨基化合物,在过量的NaOH碱性溶液中呈桔红色,在540nm处有最大吸收峰,以此测定样品中的总糖含量。

需自备的仪器和用品:

可见分光光度计、沸水浴、可调式移液器、1mL石英比色皿、研钵、蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

2,4-二氯氟苯  99%甘油 for electrophoresis, ≥99%MC Ab(Human melanocyte antibody) ELISA Kit  人黑色素抗体

3,4-二甲氧基苯甲 99%甘油 EP, BP, JP, USP级TFR/CD71(Human transferrin receptor) ELISA Kit  人转铁蛋白受体

对苯 AR,98.5%  甘油 分析标准品P53(Human p53/tumor protein) ELISA kit  人P53

间甲 98%薄层层析硅胶 G60Human Cyclin-D3 ELISA Kit  人周期素D3

邻苯二甲酰氯 90%薄层层析硅胶 H60Human Cyclin-D2 ELISA Kit  人周期素D2

邻苯二甲酰氯 98%薄层层析硅胶 GF254 60Human Cyclin-D1 ELISA Kit  人周期素D1

对苯二甲酰氯 99%薄层层析硅胶 HF254 60ES(Human Endostatin) ELISA Kit  人内皮抑素

对苯二甲酰氯 97%聚乙二单甲 均分子量350 FE(Human ferritin) ELISA Kit  人铁蛋白

总糖含量可见分光光度法检测试剂盒小鼠硫氧化还原蛋白(Trx)免疫试剂盒现货供应

小鼠循环免疫复合物(CIC)免疫试剂盒*直销

CD209分子(CD209)免疫试剂盒进口、组装

锌指蛋白644(ZNF644)免疫试剂盒进口、组装

白介素28A(IL-28A/IFN-λ2)免疫试剂盒进口、组装

兔子基质金属蛋白4(MMP-4)免疫试剂盒*直销

小鼠M型肌酸激(CKM)免疫试剂盒现货供应

大鼠水通道蛋白5(AQP-5)免疫试剂盒进口、组装

牛补体片断5a(C5a)免疫试剂盒进口、组装

犬降钙素(CALCA)免疫试剂盒进口、组装

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

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