甲基柠檬酸合酶(MCS）可见分光光度法 返回列表页

商品属性：

商品介绍：

测定意义

MCS广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞的线粒体基质中，与柠檬酸合酶（CS）共同参与三羧酸循环的调节。

测定原理：

MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸产生甲基柠檬酰，进一步水解产生甲基柠檬酸；该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB，在 412nm处有特征吸光值。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水

实验方法学：

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

抗抗体 IgM(间接法二步法)Anti-Mevalonate Kinase Antibody人血红蛋白C（HbC）elisa定量检测试剂盒

大鼠分泌型磷脂A2Anti-MFAP5 Antibody人血管内皮生长因子受体3（VEGFR3/Flt4）elisa定量检测试剂盒

兔骨形成蛋白Anti-MIA Antibody人嗅素4（OLFM4）elisa定量检测试剂盒

人干扰素调节因子Anti-MGST3 Antibody人肥胖抑制素（OB）elisa定量检测试剂盒

鲤鱼卵黄蛋白原Anti-MGST2 Antibody人性别决定区Y框蛋白3（SOX3）elisa定量检测试剂盒

小鼠CD3分子Anti-MIA2 Antibody人蛋白3（PR3）elisa定量检测试剂盒

鱼类促性腺释放Anti-MIA Antibody人嗜酸粒趋化因子受体（ECFR）elisa定量检测试剂盒

兔骨保护素Anti-MID1 Antibody人热休克蛋白90（HSP-90）elisa定量检测试剂盒

甲基柠檬酸合酶(MCS）可见分光光度法检测试剂盒噁唑 98%跨膜蛋白TMED4抗体

2-噻吩乙酰 98%状受体相关蛋白3抗体

4-辛炔 99%味觉受体蛋白家族2亚9抗体

十八 ≥97.0% (GC)肥大类胰蛋白β2

草酰 98%化酪氨激B抗体

油 99%粘附分子1抗体

油 分析标准品，≥99.0% (GC)跨膜蛋白16A/钙激活离子通道抗体

1,7-辛二炔  98%肿瘤坏死因子-α抗体

十八烷 99%肿瘤蛋白P53诱导蛋白11抗体

十八烷 分析标准品，≥99.5% (GC)味觉2型受体蛋白家族49抗体

十八烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)早期未分化视网膜及晶状体蛋白EURL抗体

酮三化膦 99%特异激底物蛋白抗体

丁位辛内酯  98%微管相关同源蛋白TPX2抗体

4-戊烯 95%神经死亡诱导蛋白激抗体

锗试剂 97%微管蛋白β tubulin抗体 Tubulin β

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。