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土壤硝酸还原酶(SNR)微量法检测试剂盒

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所  在  地上海市

更新时间:2022-04-27 15:21:57浏览次数:127次

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货号 GOY-01S6832
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商品属性:

产品名称

土壤硝酸还原酶(SNR)微量法检测试剂盒

规格

100管/48样

检测方法

微量法

货号

GOY-01S6832

商品介绍:

测定意义

S-NR催化土壤中硝酸盐还原为亚硝酸盐,是土壤硝态氮还原的关键酶。研究S-NR的活性对合理施肥,降低氮素的损失具有重要意义。

测定原理

S-NR催化硝酸盐还原为亚硝酸盐,NO3ˉ +NADH+H+→ NO2ˉ +NAD+ +H 2 O;产生的亚硝酸盐能够在酸性条件下,与对–氨基苯磺酸及 α - 萘胺定量生成红色偶氮化合物;生成的红色偶氮化合物在 540 nm 有最大吸收峰,可用分光光度法测定。

需自备的仪器和用品

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰和蒸馏水。

实验方法学:

一、肝素的配制:

市售肝素冻干粉140单位/mg1克瓶装,每瓶140000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50100μl湿润管壁,可抗凝人血35ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50100μl,可抗凝鼠血24ml

肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔510分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使25ml血液不凝固。

二、血液样本的收集:

全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。

1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置12小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。

2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

化内质网核信号转导蛋白a1抗体Human RHOB ELISA Kit槐米

白介素28受体抗体Human RHEB ELISA Kit宽叶缬草

KB抑制蛋白激Ζ抗体Human RGS1(Regulator of G-protein signaling 1) ELISA Kit

胰岛素基因增强结合蛋白1抗体Human RFXAP ELISA Kit硝基呋喃酰(呋喃丙杂质A)

整合素β1结合蛋白2抗体Human RGMA ELISA Kit

线粒体翻译起始因子3抗体Human RGS11 ELISA Kit小鼠骨桥素(OPN)Elisa测定试剂盒

白介素27β抗体Human RFC3 ELISA Kit小鼠催乳素(PRL)Elisa测定试剂盒

胰岛素样生长因子1受体抗体Human RGR ELISA Kit鸡B因子(BF)Elisa测定试剂盒

土壤硝酸还原酶(SNR)微量法检测试剂盒胎儿纤连蛋白(fFN)免疫试剂盒现货供应

小鼠肌醇3激(PI3K)免疫试剂盒进口、分装

柯萨奇病毒IgA(Cox V-IgA)免疫试剂盒*直销

小鼠白介素12(IL-12/P40)免疫试剂盒*直销

小鼠一氧化碳血红蛋白(HbCO)免疫试剂盒进口、组装

Ⅱ(FⅡ)免疫试剂盒进口、组装

5羟色胺/血清素/血清胺(5HT/ST)抗体(IgA)免疫试剂盒进口、组装

鱼白介素4(IL-4)免疫试剂盒*直销

大鼠可溶性CD40配体(sCD40L)免疫试剂盒*直销

大鼠胃泌素(Gastrin)免疫试剂盒进口、组装

操作步骤:

实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。

6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。

7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。

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