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选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
产品名称:TM elisa试剂盒价格
英文名称:TM elisa Kit
规格:48T/96T
保存: 2-8℃(频繁使用时);-20℃(长时间不用时)。
有效期: 6 个月(4℃);12 个月(-20℃)。
用途: 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
体外非细胞系统血红素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性比色法定量 PCGF1 (Polycomb group RING finger protein 1) 100 ul
细胞血红素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性荧光定量 PRDM1 (PR domain zinc finger protein 1) 100 ul
组织血红素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性荧光定量 PAQR5 (Membrane progestin receptor gamma) 100 ul
体外非细胞系统血红素氧合酶-1(HEME OXYGENASE-1)活性荧光定量 MOCOS(Molybdenum cofactor sulfurase) 100 ul
细胞血红素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性比色法定量 DHTKD1 (Probable 2-oxoglutarate dehydrogenase E1 component DHKTD1, mitochondrial) 100 ul
组织血红素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性比色法定量 PROKR1 (Prokineticin receptor 1) 100 ul
体外非细胞系统血红素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性比色法定量 PIPOX (Peroxisomal sarcosine oxidase) 100 ul
细胞血红素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性荧光定量 ADCYAP1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide) 100 ul
组织血红素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性荧光定量 PROSER1 (Proline and serine-rich protein 1) 100 ul
体外非细胞系统血红素氧合酶-2(HEME OXYGENASE-2)活性荧光定量 PLAC1 (Placenta-specific protein 1) 100 ul
细胞硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase)活性比色法定量 PRLR(Prolactin receptor) 100 ul
组织硫氧还蛋白还原酶(thioredoxin reductase)活性比色法定量 PRLHR(Prolactin-releasing peptide receptor) 20 ul
细胞硫氧还蛋白还原酶1(cytosolic thioredoxin reductase 1)活性比色法定量 PGM5 (Phosphoglucomutase-like protein 5) 100 ul
组织硫氧还蛋白还原酶1(cytosolic thioredoxin reductase 1)活性比色法定量 PGM3 (Phosphoacetylglucosamine mutase) 20 ul
细胞硫氧还蛋白还原酶2(mito thioredoxin reductase 2)活性比色法定量 PRPS2 (Ribose-phosphate pyrophosphokinase 2) 100 ul
组织硫氧还蛋白还原酶2(mito thioredoxin reductase 2)活性比色法定量 PEAR1 (Plaet endothelial aggregation receptor 1) 100 ul
TM elisa试剂盒价格angiotension I血管紧张素Ⅰ种属: Pleurotus│columbinus哥伦比亚侧耳
angiotensionⅡ血管紧张素Ⅱ种属: Streptomyces│badius深疮痂链霉菌
angiotension Ⅱ receptor 1血管紧张素Ⅱ受体1种属: Campylobacter jejuniNCTC12662
angiotension Ⅱ receptor 1 antibody血管紧张素Ⅱ受体1抗体种属: Auricularia│polytricha (Mont.) Sacc.大平网(毛木耳)
angiotension Ⅱ receptor 2 antibody血管紧张素Ⅱ受体2抗体种属: Termitomyces│sp.蚁巢伞属
angiotensinogen血管紧张素原种属: Coprinus│comatus (O.F. Müll.) Pers.鸡腿蘑
Angiotensin converting enzyme血管紧张素转化酶种属: Dictyophora│indusiata (Vent.) Desv.长裙竹荪(白竹荪)
Angiotensin Converting Enzyme 2血管紧张素转化酶2种属: Streptomyces│sp.链霉菌 (吸水类群)
Endothelium-Derived Hyperpolarizing Factor血管内皮超极化因子种属: Diaporthe│citri F.A. Wolf柑橘拟茎点霉(无法提供)
VE-cadherin血管内皮钙粘蛋白种属: Escherichia│coli大肠埃希氏菌DH5a/phA3G-E259Q-HA
Vascular Endothelial cell Growth Factor A血管内皮生长因子A种属: Tricholomopsis│nigra (Petch) Pegler黑鳞拟口蘑
Vascular Endothelial cell Growth Factor B血管内皮生长因子B种属: Hericium│erinaceus (Bull.) Pers.猴头菌?50043
Vascular Endothelial cell Growth Factor C血管内皮生长因子C种属: Pestalotiopsis│theae (Sawada) Steyaert茶盘多毛孢
endothelial protein C receptor血管内皮细胞蛋白C受体种属: Mycosphaerella│sp.球腔菌属
Vascular Endothelial cell Growth Factor血管内皮细胞生长因子种属: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.平菇(苏引6号)
操作流程如下:
(1)仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
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