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微生物菌种的培养:
⒈ 孢子制备
⑴ 孢子的制备
一般采用琼脂斜面培养基,培养基中含有一些适合产孢子的营养成分,如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1%,氮源不超过0.5%),碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境,不利于形成,氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下,干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃,少数为37 ℃,培养时间为5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制备
霉菌的孢子培养,一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖,而且这类培养基的表面积较大,可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25~28 ℃,培养时间为4~14天。
⒉ 种子制备
⑴ 摇瓶种子制备
摇瓶种子进罐,常采用母瓶、子瓶两级培养,有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*,并易被菌体分解利用,氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓,子瓶培养基浓度比母瓶略高,更接近种子罐的培养基配方。
⑵ 种子罐种子制备
种子罐种子制备的工艺过程,因菌种不同而异,一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中,经培养后形成大量的菌丝,这样的种子称为一级种子,把一级种子转入发酵罐内发酵,称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内,经过培养形成更多的菌丝,这样制备的种子称为二级种子,将二级种子转入发酵罐内发酵,称为三级发酵。同样道理,使用三级种子的发酵,称为四级发酵。
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产品名称 | 用途 | 货号 |
蒙氏肠球菌 | 仅供科研 | GOY-01J7250
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菌种的培养:
1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种(一级种)、原种(二级种)和栽培种(三级种)三级。工业发酵的有用菌种,其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。
2、挑选具有某种能力的有用菌种,也称种子制备,是指菌种在一定条件下,经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。
3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。
4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种,用无菌手续挑取少许,接入琼脂斜面培养基上,在25℃(或较高温度)下培养5~7天(或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子(对于霉菌类孢子制备,多数采用大米、小米之类的天然培养基)。
5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液,接种到扁瓶固体培养基上,于25~28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干,使水分降至10%以下,并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。
6、如果有些生产菌种不产孢子,如赤霉素产生菌或产孢子不多的,则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体,作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源(如葡萄糖)和氮源(如玉米浆),及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮,无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%~20%。
保存方法:
传代保存法:培养基的浓度不宜过高,营养成分不宜过于丰富,尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种,则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。
液体石蜡覆盖保存法:该法较前一种方法保存菌种的时间更长,适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。
悬液保存法:
① 蒸馏水保存法:适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌,将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。
② 糖液保存法:适用于酵母菌,如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗处保存,可长达10年。除此之外,也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。
载体保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅胶保存法;④磁珠保存法;⑤麸皮保存法;⑥纸片(滤纸)保存法。
常用的冷冻保存法:
① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便,也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多,有些可添加保护剂。此外,也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器内,再放入低温冰箱内进行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即将菌种管插入干冰内,再置于冰箱内进行冷冻保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是适用范围*的微生物保存法。
二乙二丁 99%氯酸 CP,99.0%(剧品)Anti-PBK/TOPK PDZ连接激/T-LAK源蛋白激抗体
二乙二丁 CP酸 GR,99.8%Anti-Phospho-PBK/TOPK (Thr9) 化PDZ连接激/T-LAK源蛋白激抗体
1,3-丁二 99%酸 99.995%Anti-Paxillin 桩蛋白Paxillin抗体
1,3-丁二 分析标准品玫瑰红酸 IndicatorAnti-Phospho-Paxillin (Tyr118) 化桩蛋白Paxillin抗体
1,3-丁二 98%过氧化钠 95%Anti-P-cadherin P-钙粘附分子抗体
基氯硅烷 Wacker quality, ≥99.0% (GC)高酸钠 ACS, 99.8-100.3% Anti-R-cadherin R-钙粘附分子抗体
二酮 ≥99.0%(GC)亚硝酸钴钠 AR,Co 13.5~14.5%Anti-LI-cadherin 肝肠钙粘连蛋白抗体
正十二硫 98%偏铝酸钠 ARAnti-PCNA 增殖核抗原抗体
蒙氏肠球菌1-代正戊烷 Standard for GC, ≥99.5% (GC)人硫脑苷酯(SFT)免疫试剂盒20号染色体开放阅读框194抗体phospho-PI3K p85/PIK3R1(Tyr368) 化脂酰肌激抗体
1-代正戊烷 99%人硫类肝素(HS/HPS)免疫试剂盒4号染色体开放阅读框32抗体phospho-PI3K p85(Tyr458)/p55(Tyr199) 化脂酰肌激抗体
环戊乙 98%人硫角质素(KS)免疫试剂盒5号染色体开放阅读框20抗体phospho-PI3 Kinase p110 beta(Ser1070) 化脂酰肌激(PI3Kβ)抗体
1,4-二丁烷 98%人硫雌酮(E1S)免疫试剂盒胱抑素D/半胱氨蛋白抑制剂D抗体phospho-PFKL (Ser775) 化6果糖激抗体
2-羟-4-氧 98%人硫嘌呤S-转换(TPMT)免疫试剂盒胱抑素8/半胱氨蛋白抑制剂8抗体Phospho-PFK2 (Ser467) 化6果糖激2抗体
2-氧 98%人流行性乙型脑炎抗体IgG(JE IgG)免疫试剂盒胱抑素9/半胱氨蛋白抑制剂9抗体Phospho-PERK(Thr980) 化蛋白激样内质网激抗体
2-烯酰氨-2--1-烷磺 98%人流行性乙型脑炎抗体(IgM)免疫试剂盒胱抑素S/半胱氨蛋白抑制剂S抗体Phospho-PEA15(Ser116) 化星形胶质PEA15抗体
肼苄酯 98%人流行性脑脊髓膜炎抗体(IgM)免疫试剂盒烟碱型乙酰受体α3抗体Phospho-PEA15 (Ser104) 化星形胶质PEA15抗体
5-茚酮 97%人流行性脑脊髓膜炎抗体(IgG)免疫试剂盒3号染色体开放阅读框33抗体Phospho-PDPK1(Tyr9) 化3肌依赖性蛋白激1抗体
4-二氨吡 99%人流感病抗体IgG(FLU IgG)免疫试剂盒3号染色体开放阅读框39抗体Phospho-PDPK1(Tyr373/376) 化3肌依赖性蛋白激1抗体
异烟 AR,99%人流感B病抗体IgG 免疫试剂盒3号染色体开放阅读框59抗体Phospho-PDPK1(Ser410) 化3肌依赖性蛋白激1抗体
异烟碱 99%人流感B病(FluB)抗体(IgM)免疫试剂盒5号染色体开放阅读框51抗体Phospho-PDPK1(Ser396) 化3肌依赖性蛋白激1抗体
肼酯 97%人流感B病(FluB)抗体(IgA)免疫试剂盒3号染色体开放阅读框70抗体Phospho-PDPK1(Ser393) 化3肌依赖性蛋白激1抗体
三 AR,99.0%(易制品)人流感A病抗体IgG 免疫试剂盒2号染色体开放阅读框68抗体Phospho-PDK1(Ser241) 化3肌依赖性蛋白激1
二 CP,99.0%人流感A病(FluA)抗体(IgM)免疫试剂盒2号染色体开放阅读框47抗体phospho-PDHA1(Ser293) 化酮脱氢α1抗体
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