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微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

3,4,5-氧基苯甲酸 99%分析标准品Anti-Nox3/NADPH oxidase 3  有丝分裂氧化2抗体

硫脲 ACS, ≥99.0% 99%Anti-NOX4/NADPH oxidase 4  NADPH氧化NOX家族的成员4抗体

硝酸氧锆 水合物 AR,99.5%和厚朴酚 分析标准品Anti-Nanog  胚胎干关键蛋白抗体

二氧化锆 AR,99.0%杨梅素 97%Anti-NAIF1 protein  核凋亡诱导因子蛋白1

氢氧化锆 97%杨梅素 分析标准品，≥98%Anti-Natrexone  抗纳曲酮抗体IgG

硝酸氧锆 99%厚朴酚  ≥98% (HPLC)Anti-NAP1/NAP1L1  核小体组装蛋白1抗体

氯化锆 98%杨梅苷 98%Anti-NB3/CNTN6  神经NB3特定蛋白抗体

碱式碳酸锆(IV) ≥40% ZrO2 basis 分析标准品，≥98%Anti-P95/NBS1  DNA修复蛋白NBS1抗体

纳地青霉芦荟甙 分析标准品，≥97%兔β内啡肽(β-EP)免疫试剂盒囊性纤维化跨膜转运调节因子抗体Rabbit Anti-MK IgM/Cy5.5  Cy5.5标记的兔抗猴IgM

10-脱乙酰巴卡丁 III 分析标准品，≥95%兔β淀粉样蛋白1-40(Aβ1-40)免疫试剂盒酪蛋白激2相互作用蛋白1抗体Rabbit Anti-MK IgM/Cy5  Cy5标记的兔抗猴IgM

多烯紫杉 分析标准品，≥99%兔S100-A5蛋白(S100A5)免疫试剂盒CD40L抗体Rabbit Anti-MK IgM/APC  APC标记的兔抗猴IgM

多烯紫杉 98%兔P物质受体(SP-R)免疫试剂盒α-s1酪蛋白抗体Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647标记的兔抗猴IgM

大黄素 ≥90% (HPLC)兔p物质(SP)免疫试剂盒CIDEB抗体Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 555  Alexa Fluor 555标记的兔抗猴IgM

 分析标准品，≥98%兔p53(p53)免疫试剂盒高密度脂蛋白受体/清道夫受体抗体Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 488  Alexa Fluor 488标记的兔抗猴IgM

紫杉 分析标准品，≥98% 兔N端前脑钠素(NT-proBNP)免疫试剂盒信号转导蛋白亚7A抗体Rabbit Anti-MK IgM/Alexa Fluor 350  Alexa Fluor 350标记的兔抗猴IgM

紫杉 98%兔NADPH氧化1(NOX1)免疫试剂盒凋亡抑制因子抗体Rabbit Anti-Mink IgG/RBITC  罗丹明标记的兔抗水貂IgG

白藜芦 99%兔C肽(C-Peptide)免疫试剂盒D型产气荚膜梭菌抗体Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy7  PE-Cy7标记的兔抗水貂IgG

丹参酮IIA磺钠 分析标准品，≥98%兔CD8分子(CD8)免疫试剂盒降钙素抗体Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5标记的兔抗水貂IgG

虎杖甙  分析标准品，≥98%兔CD4分子(CD4)免疫试剂盒20号染色体开放阅读框14抗体Rabbit Anti-Mink IgG/PE-CY5  PE-CY5标记的兔抗水貂IgG

伍德合金 SU兔Bcl-2相关X蛋白(BAX)免疫试剂盒结缔组织生长因子抗体Rabbit Anti-Mink IgG/PE-Cy3  PE-Cy3标记的兔抗水貂IgG

代叔丁 99%兔ADAM金属肽含血小板反应蛋白1型13(ADAMTS13)免疫试剂盒性T抗原-4抗体Rabbit Anti-Mink IgG/PE  PE标记的兔抗水貂IgG

2,4-二氧乙 97%兔8-异构前列腺素(8-epi-PGF2α)免疫试剂盒降钙素受体抗体Rabbit Anti-Mink IgG/HRP  辣根过氧化物标记的兔抗水貂IgG

乙烯利 80%兔6酮前列腺素F1a(6-keto-PGF1a)免疫试剂盒1号染色体开放阅读框38抗体Rabbit Anti-Mink IgG/Gold  胶体金标记的兔抗水貂IgG