黄直丝链霉菌 返回列表页

微生物菌种的培养：

⒈ 孢子制备

⑴ 孢子的制备

一般采用琼脂斜面培养基，培养基中含有一些适合产孢子的营养成分，如麸皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些无机盐等。碳源和氮源不要太丰富(碳源约为1％，氮源不超过0.5％)，碳源丰富容易造成生理酸性的营养环境，不利于形成，氮源丰富则有利于菌丝繁殖而不利于孢子形成。一般情况下，干燥和限制营养可直接或间接诱导孢子形成。面的培养温度大多数为28 ℃，少数为37 ℃，培养时间为5～14天。

⑵ 霉菌孢子的制备　

霉菌的孢子培养，一般以大米、小米、玉米、麸皮、麦粒等天然农产品为培养基。这是由于这些农产品中的营养成分较适合霉菌的孢子繁殖，而且这类培养基的表面积较大，可获得大量的孢子。霉菌的培养一般为25～28 ℃，培养时间为4～14天。

⒉ 种子制备

⑴ 摇瓶种子制备　

摇瓶种子进罐，常采用母瓶、子瓶两级培养，有时母瓶种子也可以直接进罐。种子培养基要求比较丰富和*，并易被菌体分解利用，氮源丰富有利于菌丝生长。原则上各种营养成分不宜过浓，子瓶培养基浓度比母瓶略高，更接近种子罐的培养基配方。

⑵ 种子罐种子制备　

种子罐种子制备的工艺过程，因菌种不同而异，一般可分为一级种子、二级种子和三级种子的制备。孢子(或摇瓶菌丝)被接入到体积较小的种子罐中，经培养后形成大量的菌丝，这样的种子称为一级种子，把一级种子转入发酵罐内发酵，称为二级发酵。如果将一级种子接入体积较大的种子罐内，经过培养形成更多的菌丝，这样制备的种子称为二级种子，将二级种子转入发酵罐内发酵，称为三级发酵。同样道理，使用三级种子的发酵，称为四级发酵。

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菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备 菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

保存方法：

传代保存法：培养基的浓度不宜过高，营养成分不宜过于丰富，尤其是碳水化合物的浓度应在可能的范围内尽量降低。培养温度通常以稍低于最适生长温度为好。若为产酸菌种，则应在培养基中添加少量碳酸钙 [3] 。

液体石蜡覆盖保存法：该法较前一种方法保存菌种的时间更长，适用于霉菌、酵母菌、放线菌及需氧细菌等的保存。

悬液保存法：

① 蒸馏水保存法：适用于霉菌、酵母菌及绝大部分放线菌，将其菌体悬浮于蒸馏水中即可在室温下保存数年。本法应注意避免水分的蒸发。

② 糖液保存法：适用于酵母菌，如将其菌体悬浮于10%的蔗糖溶液中，然后于冷暗处保存，可长达10年。除此之外，也可使用缓冲液或食盐水等进行保存。

载体保存法：①土壤保存法；②砂土保存法；③硅胶保存法；④磁珠保存法；⑤麸皮保存法；⑥纸片(滤纸)保存法。

常用的冷冻保存法：

① 低温冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃)：低温冷冻保存时使用螺旋口试管较为方便，也可在棉塞试管外包裹塑料薄膜。保存时菌液加量不宜过多，有些可添加保护剂。此外，也可用φ5mm的玻璃珠来吸附菌液，然后把玻璃珠置于塑料容器内，再放入低温冰箱内进行保存的。

② 干冰保存法(-70℃左右)：即将菌种管插入干冰内，再置于冰箱内进行冷冻保存。

③ 液氮保存法(-196℃)：是适用范围*的微生物保存法。

GR，≥99.8%As,Cd,Cr（六价）：100μg/ml；Pb,Hg：200μg/ml；Anti-APEX1/Ref-1 /FITC  荧光素标记氧化还原因子1抗体IgG

 PT200μg/ml～2000μg/mlcx

 SP(Na,Mg,K,Ca,NH4+)多元素混合标准溶液400μg/ml：Na；500μg/mlAnti-API5/AAC11 /FITC  荧光素标记凋亡抑制因子5抗体IgG

 99.99% metals basis(As,Bi,Cd,Cu,Cr,Fe,Hg,Mn,Ni,Se,Pb,Zn）多元素混合标准溶液 100Anti-APNG/MPG/FITC  荧光素标记N-甲基嘌呤DNA糖基化IgG

ACS, 99.5%(Al,Bi,Fe,Mn,Mo,Sb,Si,Ta,Ti,Zn,Zr)多元素混合标准溶液 100μg/Anti-apoA1/FITC  荧光素标记载脂蛋白A1抗体IgG

 99.999% metals basis100μg/mlAnti-ApoB/FITC  荧光素标记载脂蛋白B抗体IgG

 99.9999% metals basis100μg/mlAnti-apo-D /FITC  荧光素标记载脂蛋白D抗体IgG

偏酸钠,四水 ARBi,Se,Sn,Te,50μg/ml;As,P,Sb,100μg/ml;Fe,Ni,Pb,S,Zn,200μg/Anti-Apo-E/FITC  荧光素标记载脂蛋白E抗体IgG

黄直丝链霉菌一氧化锰 99.99%兔子免疫球蛋白G(IgG)免疫试剂盒色素c氧化1抗体RAP1A  抗Rap1A抗体

中型货架 1800外*700*2000 三层钢板 300KG/层兔子免疫球蛋白E(IgE)免疫试剂盒表面趋化因子受体4相关蛋白4抗体RANK/CD265  核转录因子NF-κB受体抗体(核因子kB受体活化因子)

重型货架 2000内*600*2000 二层钢板 承载1000KG/层兔子免疫球蛋白A(IgA)免疫试剂盒表面趋化因子受体4相关蛋白6抗体RanGAP1  RAN GTPase激活蛋白1抗体

中型货架 2000*600*2000mm 四层兔子硫氧化还原蛋白(Trx)免疫试剂盒表面趋化因子受体4相关蛋白8抗体RanBP7/Importin 7  RAN结合蛋白7抗体

中型货架 2000*600*2000 六层兔子硫软骨素(CS)免疫试剂盒硫软骨素抗体RanBP3  RAN结合蛋白3抗体

钴锂 99.8% metals basis兔子硫类肝素(HS)免疫试剂盒上皮类癌相关抗原抗体RanBP2  RAN结合蛋白2/核孔蛋白抗体

聚乙烯1788型 解度：87.0～89.0%(mol/mol)兔子硫角质素(KS)免疫试剂盒化蛋白激PKC/CPI-17抗体RanBP1  RAN结合蛋白1抗体

聚乙烯1797型 解度：96.0～98.0%(mol/mol)兔子可溶性粘附分子(Sam)免疫试剂盒着丝粒蛋白KRan/ARA24  雄激素受体相关蛋白24抗体

聚乙烯1799型 解度：99.8～100%(mol/mol)兔子可溶性血管粘附分子1(sVCAM-1)免疫试剂盒肿瘤/抗原1BRAMP1  受体活性修饰蛋白1抗体

聚乙烯1795型 解度：94.0～96.0%(mol/mol)兔子可溶性血管内皮蛋白C受体(sEPCR)免疫试剂盒转铁蛋白受体抗体RAMP/CDT2  维调节核质相关蛋白

聚乙烯1788低粘度型 解度：87.0～89.0(mol/mol)，CPS：4.6-5兔子可溶性P选择素(sP-selectin)免疫试剂盒8号染色体开放阅读框K29抗体RALDH2  视黄脱氢2型抗体

聚乙烯 28-99 Mw ~145,000兔子可溶性E选择素(sE-selectin)免疫试剂盒色素P450 3A4抗体RALB  Ras样蛋白B抗体

聚乙烯 3-96 96.8-97.6 mol% hydrolysis兔子可溶性CD40配体(sCD40L)免疫试剂盒色素CYP2D1抗体RALA+RALB  Ras样蛋白A+B抗体

聚乙烯 40-88 Mw ~205,000兔子抗中性粒颗粒抗体(ANGA)免疫试剂盒CD33抗体RALA  Ras样蛋白A抗体

聚乙烯 56-98 Mw ~195,000兔子抗Ⅲ抗体(AT-Ⅲ Ab)免疫试剂盒视网膜母瘤结合蛋白8抗体RAIDD  P2凋亡相关蛋白抗体