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产品名称:大鼠雌二醇(E2)抗体elisa试剂盒
英文名称:Rat EstradiolE2antibody ELISA Kit
规格:48T/96T
保存: 2-8℃(频繁使用时);-20℃(长时间不用时)。
有效期: 6 个月(4℃);12 个月(-20℃)。
用途: 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
操作流程如下:
(1)仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
碱性唾液脯氨酸丰富蛋白2(PRB2)(酶联免疫吸附试验法) 98%(GC) 希瓦氏菌属 250mg
碱性唾液脯氨酸丰富蛋白1(PRB1)(酶联免疫吸附试验法) 96% 青春双歧杆菌 1g
Dickkopf相关蛋白4(DKK4)(酶联免疫吸附试验法) 98% 乌芝 1g
Dickkopf相关蛋白4(DKK4)(酶联免疫吸附试验法) 98% 茄链格孢 5g
天冬氨酸β羟化酶(ASPH)(酶联免疫吸附试验法) 98% 哈里法克斯希瓦氏菌 1g
分泌型卷曲相关蛋白2(SFRP2)(酶联免疫吸附试验法) 98% 刚果嗜皮菌 250mg
序列相似家族3成员B(FAM3B)(酶联免疫吸附试验法) 98% 赭色掷孢酵母 25g
含胶原三螺旋重复蛋白1(CTHRC1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 黄蜜环菌 5g
AE结合蛋白1(AEBP1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 马葡萄球菌 1g
微管蛋白β1(TUBβ1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 农药速测卡 5g
酶原颗粒膜糖蛋白(GP2)(酶联免疫吸附试验法) 97% 大肠埃希氏杆菌 25g
花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)(酶联免疫吸附试验法) 97% 大肠埃希氏菌 5g
癌胚抗原相关细胞粘附分子6(CEACAM6)(酶联免疫吸附试验法) 98% 杆状毛霉 1g
线粒体解偶联蛋白1(UCP1)(酶联免疫吸附试验法) 98% 杂色曲霉 5g
F-框亮氨酸丰富重复蛋白3(FBXL3)(酶联免疫吸附试验法) 98% 马克斯克鲁维酵母 100mg
脂肪酸合酶(FASN)(酶联免疫吸附试验法) 75% 鞘氨醇盒菌属 100g
金属硫蛋白1M(MT1M)(酶联免疫吸附试验法) 75% 产气肠杆菌 25g
Vasorin蛋白(VASN)(酶联免疫吸附试验法) 75% 假单胞菌属 5g
大鼠雌二醇(E2)抗体elisa试剂盒石蜡切片组织蛋白表达NBT显色光学显微镜-LEPTIN TTF2(Transcription termination factor 2) 100 ul
细胞蛋白表达比色法定量-LEPTIN TCF7L2(Transcription factor 7-like 2) 100 ul
细胞蛋白表达荧光定量-LEPTIN KCNJ10(ATP-sensitive inward rectifier potassium channel 10) 100 ul
蛋白表达西方杂交分析-LEPTIN TBX21(T-box transcription factor TBX21) 100 ul
蛋白免疫共沉淀分析-LEPTIN DKKL1(Dickkopf-like protein 1) 100 ul
细胞/组织裂解悬液、血液、体液等蛋白表达 C1orf106(Uncharacterized protein C1orf106) 20 ul
定量-LEPTIN TRIM22(E3 ubiquitin-protein ligase TRIM22) 100 ul
FITC绿色荧光标记一抗 PRSS22(Brain-specific serine protease 4) 100 ul
TRITC红色荧光光标记一抗 B7H6(B7 homolog 6) 1 Kit
HRP标记一抗 WNT10A(Protein Wnt-10a) 100 ul
前列腺肿瘤CAG三联子定量 RGS19(Regulator of G-protein signaling 19) 150 ul
人体肿瘤β-catenin突变巢式分析 PREX2(Phosphatidylinositol 3,4,5-trisphosphate-dependent Rac exchanger 2 protein) 100 ul
人体肿瘤β-catenin突变荧光分析 PIM3(Serine/threonine-protein kinase pim-3) 20 ul
直肠肿瘤标记波形纤维蛋白粪便 ZFP36(Tristetraprolin) 100 ul
直肠肿瘤标记K-ras粪便检测突变巢式分析 PORCN(Probable protein-cysteine N-palmitoyltransferase porcupine) 1 Kit
直肠肿瘤标记K-ras粪便检测突变荧光分析 GDF1(Embryonic growth/differentiation factor 1) 5 mg
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