小鼠结肠黏膜上皮细胞 返回列表页

细胞培养的优点：

1.研究的对象是活细胞

在实验过程中，根据要求可始终保持细胞活力，并可长时间监控、检测甚至定量评估一部分活细胞的情况，包括活细胞的形态、结构、生命活动等。

2.研究条件可以人为控制

pH、温度、氧气、二氧化碳、张力等物理化学的条件，可以根据实际需要进行人为的控制，同时，可以施加化学、物理、生物等因素作为条件而进行实验观察，这些因素同样可以处于严格控制之下。

3.研究的样本可以达到比较均一性

通过细胞培养一定代数后，所得到的细胞系则可以达到均一性而属于同一类型的细胞，需要时，可采用克隆化等方法使细胞达到纯化。

4.研究内容便于观察、检测和记录

采用各种研究技术：如倒置生物显微镜、荧光显微镜、电子显微镜、流式细胞术、激光共焦显微镜、免疫组织化学、原位杂交、同位素标记等各种仪器设备

记录方式可采用摄影照片、缩时电影、电视等多种手段。

5.研究的范围比较广泛

应用的学科领域较为宽广，如细胞学、免疫学、肿瘤学、生物化学、遗传学、分子生物学等；

适用的对象范围广，从低等动物到高等动物，一种动物的不同年龄阶段以及不同组织，都可进行有针对性的研究。

6.研究的费用相对较经济

可提供大量、同一时期、重复性好的、生物学性状相似的实验对象。

产品属性：

产品介绍：

名称    小鼠结肠黏膜上皮细胞

2.组织来源：结肠组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

小鼠结肠黏膜上皮细胞分离自结肠组织；结肠在右髂窝内续于盲肠，在第3骶椎平面连接直肠。结肠分升结肠、横结肠、降结肠和乙状结肠4部分，大部分固定于腹后壁，结肠的排列酷似英文字母“M"，将小肠包围在内。结肠横切面由内到外依次为：黏膜（上皮层、固有层、黏膜肌层），黏膜下层（疏松结缔组织），肌层（内环形、外纵行两层平滑肌），外膜（纤维膜或浆膜）。肠黏膜上皮细胞是机体内外环境的重要屏障，持续暴露于大量抗原中，也是机体面对病原微生物的第一道防线。因此，肠黏膜上皮细胞除有吸收、分泌和转运等重要生理功能之外，在黏膜先天性和获得性免疫防御机制中也起着重要作用。肠黏膜上皮细胞作为首先接触抗原的细胞，在黏膜免疫反应的起始阶段发挥关键作用，它决定黏膜免疫反应的发生、性质和强度。探讨正常结肠黏膜上皮细胞的分离、体外培养方法，为研究肠黏膜上皮细胞以及与肠黏膜相关疾病建立合适的细胞模型。

5.方法简介：

()实验室分离的小鼠结肠黏膜上皮细胞采用先机械分离法、后胶原酶消化法并通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的小鼠结肠黏膜上皮细胞经Cytokeratin-18免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

包被条件鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-M159

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态上皮细胞样

传代特性可传1-2代

消化液0.25%

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

处理方法：

收到细胞后，检查外包装是否完整，细胞培养瓶是否完好。如有破损漏液等问题，请即时联系。并进行以下操作：

1. 75%酒精棉球擦拭T25细胞培养瓶外部。

2. 将细胞放入37度培养箱中预温3-4小时后再做处理，以稳定细胞状态。

3. 预热培养基（含10%胎牛血清，1%双抗）。

4. 显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照保存（40×,100×,200×各一张）。

5. ①若细胞密度较小，无菌操作，去掉培养基。每瓶添加第四步中准备的5-6ml培养基。放到37度培养箱培养。待细胞密度达到80%以上，进行传代。

实验操作步骤：  

a．采用认可的方案处死啮齿动物。

b．立即在无菌超净台内用70％乙醇擦洗整个动物。

c．用无菌的镊子和剪子在前腿下作一腹部水平切口，用无菌镊子将皮肤扯向后腿。

d．用另一无菌的剪刀和镊子切开腹部，取出含有胚胎的子宫，置于无菌的培养皿上。

e．剔除胚胎周围的包膜，将胚胎放于无菌的含有无菌PBS的100ml烧杯中。

f．漂洗胚胎，去掉PBS。继续用PBS漂洗胚胎直至清洗液清亮为止。

注意事项：

1. 正式实验前请选取几个样本做预实验，以优化实验条件，取得最佳实验效果。

2. 螺旋盖微量试剂管装的试剂在开盖前请短暂离心，将盖和管内壁上的液体离心至管底，

避免开盖时试剂损失。

3. 禁止与其他品牌的试剂混用，否则会影响使用效果。

4. 样品或试剂被细菌或真菌污染或试剂交叉污染可能会导致错误的结果。

5. 最好使用一次性吸头、管、瓶或玻璃器皿，可重复使用的玻璃器皿必须在使用前清洗

并*清除残留清洁剂。

6. 实验后完成后所有样品及接触过的器皿应按照规定程序处理。

50次 T3体外转录试剂盒 T3 in vitro Transcription Kit -20℃保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Lutropin subunit beta

2 ug pLVX-EF1α-AcGFP1-N1 pLVX-EF1α-AcGFP1-N1 低温运输，-20℃保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for Human Mothers against decapentaplegic homolog 3

肌醇测定培养基 Inos얾嵌쐛L⪀

小鼠结肠黏膜上皮细胞DTM添加剂2  1ml*5

2 ug pBlueScript II KS（+） pBlueScript II KS（+） 低温运输，-20℃保存

2 ug pYCPlac111 pYCPlac111 低温运输，-20℃保存

25g 原钒酸钠，十二水 Sodium Orthovanadate Dodecahydrate 室温密封保存

5g L-  L-Ornithine 室温干燥避光保存

2 ug pCaspase3-sensor pCaspase3-sensor 低温运输，-20℃保存

TXNDC5  硫氧还蛋白5抗体 规格: 0.2ml

10mL 钙蛋白抑制剂Ⅱ溶液，10mg/mL Calpain Inhibitor Ⅱ Solution -20℃保存

TAAL6/Transmembrane 4 L6 family member 1  瘤相关抗原L6抗体 规格: 0.2mlFAIM3  FAS凋亡抑制分子3抗体 规格: 0.2ml

250U 核酸外切 T Exonulease T -20℃保存

Phospho-Histone H3 (Ser28)  磷酸化组蛋白H3抗体 规格: 0.1ml

半稀释液 Cysteine Diluent 250g