小鼠NG2细胞-上海谷研实业有限公司

货号	GOY-01X1184

细胞培养操作规程：

一．培养基及培养冻存条件准备：

1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO，货号21875-091)，90%；优质胎牛血清，10%。

2）培养条件：气相：空气，95%；二氧化碳，5%。温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。

3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。

二．细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

公司细胞现货供应，质量有保证、*、实验效果好，我司为您提供免费代测服务，同时提供最新价格、说明书、规格、用途、实验原理等相关操作说明。

产品名称	小鼠NG2细胞
规格	5×10⁵Cells/T25培养瓶
分类	原代细胞
货号	GOY-01X1184

商品介绍：

名称 小鼠NG2细胞

2.组织来源：脑组织

3.产品规格：5×105cells/T25细胞培养瓶

4.细胞简介：

小鼠NG2细胞分离自脑组织；大脑分左右两个半球，大脑皮质（灰质）覆盖着每个大脑半球的大部分，它是神经元胞体集中的地方。内部则是由神经纤维或髓鞘构成的白质。每一个半球都有三个面，即外侧面（约占整个皮质面积的1/3）、内侧面和底面（占2/3的面积）；半球表面有很多深浅不等的沟或裂，沟或裂之间的隆起叫回，它们大大增加了大脑的表面积；大脑外侧面重要的沟、裂有大脑外侧裂、顶枕裂和中央沟。由于三沟裂之界隔，使大脑皮质组分为额叶、顶叶、颞叶、枕叶四大部分。NG2细胞是在发育和成年中枢神经系统的灰质和白质束中发现的，因表达NG2蛋白多糖而得名。NG2细胞先前被假定代表少突胶质细胞前体细胞，后来使用转基因的研究表明，NG2细胞在体内不仅能够产生少突胶质细胞，还能产生原浆性星形胶质细胞以及某些情况下的神经元。NG2细胞是中枢神经系统中不同于神经元、成熟少突胶质细胞、星形胶质细胞和小胶质细胞的一类细胞亚群。此外，在发育和成年中枢神经系统的多个区域，发现NG2细胞和神经元之间存在*的突触联系，暗示NG2细胞除了可能作为分化成多种细胞的可塑性前体细胞群，还可能会和神经元联系从而形成一个*的神经胶质网络。

5.方法简介：

()实验室分离的小鼠NG2细胞采用消化、专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

6.质量检测：

()实验室分离的小鼠NG2细胞经NG2免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

7.培养信息：

培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

产品货号CM-M165

换液频率每2-3天换液一次

生长特性贴壁

细胞形态梭形、多角形

传代特性可传1-2代

消化液0.25%

培养条件气相：空气，95%；CO2，5%

使用方法：

收到细胞后，请按照以下方法进行操作。

1. 取出25cm2培养瓶，75%酒精消毒，拆下封口膜，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中静置6-8小时或者过夜，以稳定细胞状态。

2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。

3. 细胞传代

1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基，用PBS清洗细胞一次；

2) 添加0.125%消化液约1mL至培养瓶中，37℃温浴3min左右；倒置显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入*培养液终止消化；

3) 用吸管轻轻吹打混匀，按1:2或1:3等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的*培养基至5mL，放入37℃，5% CO2细胞培养箱中培养；

4) 待细胞*贴壁后，培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。

培养操作：

1）复苏细胞：将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入 4mL 培养基混合均匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入 10cm 皿中，加入约 8ml 培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达 80%-90%，即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清，用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，置于 37℃培养箱中消化 1-2 分钟，然后在显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆并脱落，迅速拿回操作台，轻敲几下培养瓶后加少量培养基终止消化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基，轻轻打匀后吸出，在 1000RPM 条件下离心 4 分钟，弃去上清液，补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类；

1. 细胞冻存时，弃去培养基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，细胞变圆脱落后，加入 1ml 含血清的培养基终止消化，可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞，根据细胞数量加入血清和 DMSO，轻轻混匀，DMSO 终浓度为 10%，细胞密度不低于1x106/ml，每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液，注意冻存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中，放入-80 度冰箱，2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
图片13.jpg

对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：

方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。

50mL Cobalt Chloride Solution（氯化钴溶液）,0.5M Cobalt Chloride Solution,0.5M 常温保存 31.2-2000 pg/mL ELISA Kit for Human Membrane metallo-endopeptidase-like 1

25uL Fluorescein -12- dUTP溶液 (1mM) Fluorescein -12- dUTP Solution -20℃避光保存 0.625-40 ng/mL ELISA Kit for 얾嵌쐛L⪀

小鼠NG2细胞1瓶 SK-BR-3细胞株 SK-BR-3 低温运输和保存

硝酸盐还原试剂盒 5ml*4

30次一步式胞浆蛋白微量制备试剂盒 One-Step Cytoplasmic Protein Miniprep Kit 4℃保存

500mL Wash Buffer,pH8.0 Wash Buffer,pH8.0 常温保存

去氧胆酸盐枸橼酸盐琼脂 Desoxycholate Citrate Agar 250g

48 T 超氧化物歧化测试盒 Oxidative Stress Detection Kit 常温保存

2 ug pSUPER-retro-EGFP pSUPER-retro-EGFP 低温运输，-20℃保存

麦康凯肉汤 MaConkey Broth 250g

Cyclin K/CCNK 周期素K抗体规格: 0.2ml

RBP/Retinol binding protein 结合蛋白抗体规格: 0.1ml

Phospho-RhoA(Ser188) 磷酸化RhoA蛋白抗体规格: 0.1ml