当前位置:上海谷研实业有限公司>>生化检测试剂盒>>其它系列>> 脂质过氧化物(LPO)可见分光光度法
货号 | GOY-01S6412 |
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操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。
商品属性:
产品名称 | |
规格 | 50管/48样 |
检测方法 | 可见分光光度法 |
货号 | GOY-01S6412 |
商品介绍:
测定意义
脂质过氧化是动植物体内活性氧(ROS)氧化生物膜的过程,脂质过氧化物(LPO)是脂质过氧化过程的产物,即ROS与生物膜的磷脂、酶和膜受体相关的多不饱和脂肪酸的侧链及核酸等大分子物质起脂质过氧化反应形成LPO,使细胞膜的流动性和通透性发生改变,最终导致细胞结构和功能的改变。因此,LPO常被作为机体氧化应激的一种指标,与某些疾病的病理过程,如肿瘤、化学中毒、感染、炎 症、自身免疫疾病、动脉粥样硬化(AS)及心脑血管疾病,以及衰老等生理过程密切相关。
测定原理:
LPO在酸性条件下加热,产生小分子终产物MDA,MDA与硫代酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成红色产物,在535nm有最大吸收峰。
需自备的仪器和用品:
分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
实验方法学:
一、肝素的配制: 市售肝素冻干粉140单位/mg,1克瓶装,每瓶140,000单位,称取0.1克肝素冻干粉,加生理盐水5ml,配成2800单位/ml。取50~100μl湿润管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不会凝固。老鼠血易凝固,所以最好更浓一些。可以取0.1克肝素冻干粉,加3ml生理盐水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。 肝素抗凝管的制备:取0.1克肝素冻干粉,加2.5ml生理盐水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,湿润管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),横向转动,每隔5~10分钟转动一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。 | 二、血液样本的收集: 全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。 1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。 2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA。 |
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后
用于测定。
亮抑肽Anti-ADGRG5 Antibody杏叶防风Apricot?Leaves wind
促胃泌素释放肽(抗原)Anti-ADGRF5 Antibody蒺藜Tribulus terrestris
牛血清白蛋白(标准)Anti-ADGRG1 Antibody玳瑁Tortoise shell
髓鞘碱性蛋白(多肽)大鼠Anti-ADGRG5 AntibodyDonkFS- hide gelatin
血管活性肠肽Anti-ADGRG6 AntibodyLindera
肽Anti-ADGRL2 Antibody买麻藤(小叶买麻藤)Gnetum?(Oba
胰高血糖素样肽-2蛋白Anti-ADGRL1 Antibody固公果根Radix Rosae giganteae
活性依赖的神经保护肽(抗原)Anti-ADGRL4 Antibody荷叶Lotus leaf
脂质过氧化物(LPO)可见分光光度法二苄酮 99%人Toll样受体2(TLR2)免疫试剂盒蓬乱蛋白1抗体PAFAH1B3/PAFAHG 血小板衍化生长因子γ抗体
3,5-二苄溴 98%人Toll样受体1(TLR1)免疫试剂盒肌Dystrobrevin β蛋白抗体PAFAH1B2 血小板衍化生长因子β抗体
二乙酮 98%人TH糖蛋白(THP)免疫试剂盒异常原/脱-γ-羧原抗体PAF 血小板活化因子抗体
四庚 PIC人TGF-β诱导早期因1(TIEG1)免疫试剂盒结蛋白抗体PADI4 关节炎相关因抗体
咪唑 99%人Tau蛋白免疫试剂盒DISC1 C端抗体PACRG 麻疯病和帕金森氏病共同调节蛋白抗体
4-咪唑 98%人TAR DNA结合蛋白43(TARDBP/TDP43)免疫试剂盒DISC1 N端抗体PACAP-38 腺苷环化激活肽-38抗体
1,2-并异噻唑啉-3-酮 98%人s腺苷同型半胱氨(SAH)免疫试剂盒多能发育相关因2抗体PACAP-27/38 腺苷环化激活肽-27/38抗体
2, 2’-二硫代二 98%人Syndecan-3/(SDC3)免疫试剂盒结肠直肠癌缺失因抗体PACAP R1 腺苷环化激活肽受体1抗体
三乙酯 99%人Syndecan-1/CD138(SDC1)免疫试剂盒多巴脱羧抗体PABP (Methyl Arg455/460) 化多聚腺苷结合蛋白抗体
酯 99%人SWI/SNF相关, 质关联,肌动蛋白依赖染色质调控因子,亚家族c,成员1(SMARCC1)免疫试剂盒防御素β1/Defensin β1抗体PABP 多聚腺苷结合蛋白抗体
菲 97%人STEAP家族成员4(Steap4)免疫试剂盒抗体P95/NBS1 DNA修复蛋白NBS1抗体
L-a-氨己二 98%人STEAP家族成员1(Steap1)免疫试剂盒DLX4抗体p95 NBS1/Cell cycle regulatory protein p95 周期调节蛋白P95抗体
过氧化钠 ACS reagent, ≥93.0%人Stathmin 1(STMN1)免疫试剂盒DTX1抗体P73 protein P73肿瘤抑制因抗体
硫辛 分析标准品,≥98%人STAT3蛋白抑制分子(PIAS3)免疫试剂盒丝裂原活化蛋白激-1抗体p73 alpha p53相关蛋白P73α抗体
黄芪皂苷 III 分析标准品,≥98%人Spondin-2 免疫试剂盒丝裂原活化蛋白激-2抗体p70 S6 Kinase Beta 2/P70 Beta 2 核糖体S6蛋白激β2抗体
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