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脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)微量法

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所  在  地上海市

更新时间:2022-04-24 13:43:08浏览次数:198次

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货号 GOY-01S6397
脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)微量法公司正在出售的产品:小鼠抗受体(ATR)ELISA Kit,48T/96T
猪抗受体(ATR)ELISA Kit,48T/96T
大鼠抗受体(ATR)ELISA Kit,48T/96T
牛C反应蛋白(CRP)ELISA Kit,48T/96T
鸡C反应蛋白(CRP)ELISA Kit,48T/96T

【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)微量法

100管/96样

微量法

GOY-01S6397

商品介绍

测定意义

DHAR存在于细胞质、线粒体和叶绿体中。DHAR催化GSH还原DHA生成AsAGSSG,调控细胞AsA/DHA比值,是抗坏血酸-氧化还原循环的关键酶。提高植物体内的 DHAR 活性,可提高植物食品中AsA含量,进而提高植物食品的营养品质。

测定原理:

DHAR催化GSH还原DHA生成AsA,通过测定DHA减少速率,计算DHAR活性。

实验中所需仪器及设备:

研钵、冰、低温离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、可调式移液器和蒸馏水。

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153443.png

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;

2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般

将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。

化非受体激c-Abl抗体Human MANSC1 ELISA Kit甘草素 Liquiritigenin

β淀粉样前体蛋白结合蛋白1抗体(X11α)Human MAP4K1(MEK Kinase Kinase 1) ELISA Kit人肌腱蛋白R(TN-R)ELISA试剂盒,

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甲胎蛋白AFP抗体Human MAK ELISA Kit小鼠烟酰腺嘌呤二核苷酸(NADPH)ELISA试剂盒,

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载脂蛋白J抗体Human MAGEF1 ELISA Kit大肠素(colicin)ELISA试剂盒--动物,人

脱氢抗坏血酸还原酶(DHAR)微量法气相色谱仪检定用标准物质(-溶液)5.03mg/ml,体:泛素结合UFC1抗体

五日生化需氧量标准品1000mg/L泛素结合E2J1抗体

水质生化需氧量标样 浓度范围:61.8-148(mg/L),分析标准品辅色素C还原核心蛋白1抗体

(b)荧蒽标准溶液 10~100μg/mL,体:核蛋白95抗体

(k)荧蒽标准溶液 4.38ug/ml,体:泛素结合E2变异体1抗体

标准溶液 1.00mg/ml,体:石油泛素结合E2蛋白A抗体

标准溶液 1.00mg/mL,体:乙-水泛素结合E2O抗体

溴标准溶液 100µg/mL泛素蛋白连接J2抗体

纯度分析标准物质 99.95%泛素蛋白连接M抗体

气相色谱\质谱联用仪校准用标准物质(异辛烷中二酮溶液) 10.0泛素蛋白连接W抗体

邻二丁苄酯标准溶液 165.0μg/mL,溶剂:同源蛋白UNCX抗体

1,1,2,2-四乙烷标准溶液0.92mg/ml,溶剂:UL16结合蛋白3抗体

铜标准溶液 100ug/mL(20degree),体:1%HNO3去泛素化22抗体

胆固 分析标准品,99.0%RNA聚合I抗体

标准溶液 0.117mg/ml,体:异辛烷尿盐重吸收转运子1抗体

测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。

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