CCK elisa试剂盒说明书 返回列表页

选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
产品名称：CCK elisa试剂盒说明书
英文名称：CCK elisa Kit
规格：48T/96T
保存： 2-8℃（频繁使用时）；-20℃（长时间不用时）。
有效期： 6 个月(4℃)；12 个月（-20℃）。
用途： 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
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具有如下优点：
一、高效、灵敏、特异的抗体；
二、稳定的重复性和可靠性；
三、吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相载体；
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型；
五、性价比非常好，节省实验经费。
试剂配制：
1、酶联板（Assay plate ）：一块（96孔或者48孔）。
2、标准品（Standard）：2瓶（冻干品）。
3、样品稀释液（Sample Diluent）：1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液（Biotin-antibody Diluent）：1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 （HRP-avidin Diluent）：1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体（Biotin-antibody）：1×120μl/瓶（1：100）
7、辣根过氧化物酶标记亲和素（HRP-avidin）：1×120μl/瓶（1：100）
8、底物溶液（TMB Substrate）：1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液（Wash Buffer）：1×20ml/瓶，使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液（Stop Solution）：1×10ml/瓶（2N H2SO4）。
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注意事项：
1加样：
①实验样本过多时，可分批次操作，以减少实验时间延长造成的误差；
②加酶试剂后，用吸水纸吸干孔外试剂；
③作定量试验时，使用加样器加注试剂，并经常校正其准确性，此外，要做到一份样本一个移液头，防止交叉污染。
2.温育：
①如有两种温度，尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件；
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察；
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”，因此尽量采用水浴；
3.洗板：
①手工洗板时，拍板时要垂直，避免交叉污染，用力不能过猛，防止抗原抗体复合物脱离；
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅，若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出；
③为了洗涤效果好，实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法，在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次，或适当增加洗板的次数；
4.显色：
ELISA试剂盒中，如以四甲基联苯胺(TMB)为底物，则提供的底物为A和B两瓶应用液；如以邻苯二胺(OPD)为底物，则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂，要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光，但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定：
读取结果要在15-30 min内完成，定性测定用肉眼判读试验结果时，反应板应水平距离白色背景10-15 cm；定量测定时用酶标仪读取结果，酶标仪不应置于阳光或强光照射下，需先预热15-30 min再进行测试。
仓鼠/小鼠杂交瘤细胞；145-2C11LAMP-3/DC-LAMP/CD208  溶酶体相关膜蛋白3抗体100 ul

小鼠T淋巴细胞；Cl.Ly1+2-/9DC-SIGN/CD209  细胞间粘附分子非整合素蛋白3抗体20 ul

小鼠肾集合管细胞(SV40转化)；M-1DC-SIGN/CD209  细胞间粘附分子非整合素蛋白3抗体100 ul

绿色荧光蛋白标记小鼠前胃癌细胞；MFC-GFPDC-SIGNR/CD299  CD299抗体20 ul

小鼠肾足细胞；Mouse podocyteDEC-205/CD205/Ly75  淋巴细胞抗原75抗体100 ul

绿色荧光蛋白标记小鼠细胞；U14-GFPDECR1  线粒体2,4-双烯酰辅酶A还原酶1抗体100 ul

小鼠浆细胞瘤；MPC-11PCDHB11  原钙粘蛋白β11抗体100 ul

转PYTL基因小鼠支持细胞；15P-1DEGS1  退行性精母细胞同源物1抗体100 ul

BALB/C小鼠肝上皮细胞；BNL 1ME A.7R.1DCP  异常凝血酶原/脱-γ-羧基凝血酶原抗体1 mg

小鼠结肠癌细胞；CT26.WT [CT26WT]PCDHB13  原钙粘蛋白13抗体100 ul

小鼠网织细胞肉瘤；M5076DHCR7  7脱氢胆固醇还原酶抗体100 ul

小鼠正常肝细胞；NCTC 1469 [NCTC1469]Doublecortin  双皮质素抗体100 ul

615小鼠T细胞性白血病瘤株；L7712Phospho-Doublecortin (Ser297)  磷酸化双皮质素抗体100 ul

615小鼠T细胞性白血病瘤株；L7912DcR1  肿瘤坏死因子配体超家族成员10C100 ul

615小鼠肺癌瘤株；HP615DcR2/CD264/TNFRSF10D  诱捕受体2抗体100 ul

615小鼠滑膜肉瘤瘤株；ZM755TNFRSF12A/TWEAKR/CD266  肿瘤坏死因子配体超家族成员12A抗体100 ul

小鼠肝癌瘤株；H22DcR3/TR6  诱捕受体3抗体20 ul

615小鼠前胃癌瘤株；FcDDAH-II  双甲基精氨酸水解酶2抗体100 ul
CCK elisa试剂盒说明书MPF成熟促进因子种属: Staphylococcus│aureus金黃色葡萄球菌

Fibroblast Activation Protein成纤维细胞活化蛋白种属: Dactylella│submersa水生隔指孢

fibroblast growth factor成纤维细胞生长因子种属: Collinsella stercoris Kageyama and Benno 2000DSM 13279

fibroblast growth factor-10成纤维细胞生长因子10种属: Paxillus│tomentosus毛柄桩菇

fibroblast growth factor-19成纤维细胞生长因子19种属: Candida│intermedia中间假丝酵母

fibroblast growth factor-21成纤维细胞生长因子21种属: Agrocybe│pediades (Fr.) Fayod平田头菇3-1

fibroblast growth factor-23成纤维细胞生长因子23种属: Botryodiplodia│sp.球色单隔孢属

programmed death-1程序性死亡分子-1种属: Streptomyces│spiroverticillatus螺旋轮生链霉菌

programmed death Ligand 1程序性死亡配体-1种属: 水质粪大肠菌群质控样品水质粪大肠菌群质控样品

Perforin 1穿孔蛋白1种属: Penicillium│italicum Wehmer柑橘青霉菌

Vanillylmandelic Acid垂草扁桃酸种属: Absidia│ramosa分枝犁头霉

Intermedin垂体中叶素种属: Agrocybe│salicacola杨柳田头菇

Estradiol雌二醇种属: Pleurotus│ostreatus (Jacq.) P. Kumm.平菇2

estrogen雌激素种属: Sclerotinia│sclerotiorum (Lib.) de Bary油菜菌核病菌

Estrogen Receptor雌激素受体种属: Bacillus│diffusus扩散芽孢杆菌
操作流程如下：
（1）仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔；设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl；另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。 
（2）酶标板置4℃，包被过夜。
（3）洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍（将洗涤液注满板孔后，即甩去），之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
（4）阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 
（5）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（6）洗板，同（4）。 
（7）每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 
（8）酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。 
（9）洗板，同（4）。 
（10）每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。 
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 
（12）分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差（W1-W2），以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
（13）数据处理：在得出标本（S）和阴性对照（N）的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。