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硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)微量法

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所  在  地上海市

更新时间:2022-04-24 12:28:00浏览次数:186次

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货号 GOY-01S6379
硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)微量法公司正在出售的产品:人结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit,48T/96T
小鼠结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)ELISA Kit,48T/96T
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【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!

产品名称

规格

检测方法

货号

硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)微量法

100管/96样

微量法

GOY-01S6379

商品介绍

测定意义

TPX属于过氧化物酶家族,在体内主要通过还原过氧化氢和一些氢过氧化物来实现抗氧化作用,功能与GPX类似,也是氧化还原循环关键酶之一。TPX普遍存在于各种生物体内,酵母、植物、动物、原生动物、寄生虫甚至细菌和古细菌体内都含有该酶,在进化上高度保守。TPX与细胞增殖、分化、细胞凋亡及肿瘤发生调控密切相关。TPX的主要功能包括细胞脱毒、抗氧化和调节由过氧化氢介导的信号转导和免疫反应。

测定原理:

TPX催化H2O2氧化二硫苏糖醇(DTT),H2O2的吸收波长为240nm,通过测定240nm波长处吸光度的下降速率,即可计算出TPX活性。

需自备的仪器和用品:

紫外-可见分光光度计、低温离心机、水浴锅、可调节移液器、3ml石英比色皿、双蒸水

试剂的组成和配制:

提取液:液体 100mL×1 瓶,4℃保存;

试剂一:液体 5mL×1 瓶,4℃保存;

试剂二:液体 200μL×1 支,4℃保存;

试剂三:液体 4mL×1 瓶,4℃保存;

试剂四:粉剂×2 瓶,4℃保存。
QQ截图20220307153443.png

所需的仪器和用品:

可见分光光度计、1mL 玻璃比色皿(光径 1cm)、低温离心机、移液器、研钵、冰和蒸馏水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的测定:

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定,了解本批样品情况,熟悉实验流程,避免实验

样本和试剂浪费!

1、样本制备

① 组织样本:

取约 0.1g 组织(水分充足的样本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4ºC 或冰浴进行

匀浆(或使用各类常见匀浆器)。4ºC×12000rpm 离心 10min,取上清作为待测液。

【注】:若增加样本量,可按照组织质量(g):提取液体积(mL)为 1:5~10 的比例进行提取

② 细菌/细胞样本:

先收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;取约 500 万细菌或细胞加入 1mL

提取液,超声波破碎细菌或细胞(冰浴,功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);

12000rpm 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。

【注】:若增加样本量,可按照细菌/细胞数量(10

4):提取液(mL)为 500~1000:1 的比例进行提取。 ③ 液体样本:直接检测;若浑浊,离心后取上清检测。

注意事项:

1、试剂二为酶,不可冷冻,使用时在冰上放置。

2、对照管只需要做一管。

3、若对照管吸光值大于 1,建议将试剂二用蒸馏水稀释 7 倍后使用(10μL 试剂二原液+60μL蒸馏水)。

4、SOD为什么有的样本测定管大于对照管,对照管数值在什么范围?对照管的范围是 0.4-1。对照管吸光值过低可能是(1)试剂二或试剂四没有现配现用;

2)没有按顺序加试剂;(3)反应时间不够,可以延长反应时间(反应时间 30min可以延长到 40min)。对照管吸光值过高可能是试剂二未按操作说明书稀释相应倍数。

若出现测定管大于对照管,可能是样本中杂质的影响太大,为了降低杂质的影响一般

将样本提取上清液用蒸馏水或提取液稀释 10倍后再测,通常可以使测定正常。

甲基托布津 分析标准品2-(二苯基膦基)乙 95%Anti- Beta-endorphin/FITC  荧光素标记人、大、小鼠、羊、牛beta内啡肽抗体IgG

乙酯 98%2-(二-叔丁基膦)-2'-(N,N-二甲基)联苯 98%Anti-ENPP1/PC-1/FITC  荧光素标记抗核苷酸内焦/二酯1抗体IgG

甲酯 99%2-二环己基磷-2',4',6'-三异基联苯 97%Anti-EGFL7/FITC  荧光素标记抗脉管发育(组装)蛋白抗体IgG

癸二酸二甲酯 97%4,4'-二甲基-2,2'-联吡 98%Anti-Phospho-EGFR(Tyr1045) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠化因子受体抗体IgG

癸二酸二丁酯 98%2-双环己基膦-2',6'-二甲氧基联苯 95%Anti-Phospho-EGFR(Tyr1086) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠化因子受体抗体IgG

仲辛 AR,98%(1,5-环辛二烯)二氯化钯(II)  Pd 37.3%Anti-Phospho-EGFR(Tyr1148) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠化因子受体抗体IgG

烯酰氯, 96%,含~0.05% 噻吩稳定剂[1,1'-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯  Pd  14.5% Anti-Phospho-EGFR(Tyr1173) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠化因子受体抗体IgG

四烷络合物 1M solution in THF2,2'-联吡 AR,99.0%Anti-Phospho-EGFR(Tyr845) /FITC  荧光素标记兔抗人、大、小鼠化因子受体抗体IgG

硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)微量法吐温60 LR组蛋白去化JARID1B抗体eIF2 alpha  真核启动因子2α抗体(eIFα2)

环氧烷  99%硫角质素抗体EID3  E1A样分化抑制因子3抗体

2,2'-联喹啉 98%角质生长因子调节蛋白2抗体EID1  乙酰转移EID1抗体

2--1-,(正+反) 95%离子通道蛋白G蛋白4抗体EHZF/ZN521  锌指蛋白521抗体

硫代乙乙酯 98%通道多聚体结构域KCTD18抗体EHHADH  三羟酰辅A脱氢抗体

乙异酯 99%胞质接头蛋白Keap1EGR3  早期生长反应蛋白3抗体

3-氧丁乙酯 99% 舞蹈症相关蛋白KALRN抗体EGR2  早期生长反应蛋白2抗体

过硫铵 99.99% metals basis内流通道蛋白Kir4.1抗体Egr1  早期生长应答蛋白1抗体

过硫铵 AR,98.5%样蛋白3抗体EGFRvIII  因子受体III型突变体抗体

过硫铵 ACS, ≥98.0%KLF样转录因子7抗体EGFR5/CLEC14A  因子受体5抗体

过硫铵 电泳级, ≥98%Kelch样蛋白8抗体EGFR  因子受体抗体

过硫铵 分子生物学级, ≥98%离子通道蛋白家族KCNQ2抗体EGFR  因子受体抗体

过硫钠 AR,99%离子通道多聚体结构域蛋白7抗体EGFP  重组增强型绿色荧光蛋白抗体

过硫钠 99.99% metals basis通道蛋白1抗体EGFL8  因子样蛋白8抗体

(±)-2-氨-1-丁 97%电压门控通道蛋白1抗体EGFL7  类因子域7抗体

测定步骤:

1、 酶标仪预热30min以上,调节波长至450nm。

2、 试剂三的稀释:将试剂三用蒸馏水稀释50倍,用多少配多少。(试剂三和蒸馏水1:49稀释。

3、 工作液配制:在试剂一加入100μl试剂二,充分混匀。配好的试剂4℃避光可保存一周。(若一次性测定样本较少,可按照实际用量将试剂一和试剂二按照20ml:0.1ml的比例混匀配制)

4、 将一瓶试剂四用5ml蒸馏水溶解(溶解后一周内用完)。

5、 样本测定(在96孔板中依次加入下列试剂)

选择抗凝的注意点:

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。


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