脱氢酶(DHA)可见分光光度法检测试剂盒 返回列表页

商品属性：

商品介绍：

测定意义

脱氢酶(dehydrogenase, DHA) 是一类催化物质氧化还原反应的酶，催化底物通过系统被氧化，释放的能量供机体使用，是生物体取得能量的一种方式。

测定原理

在细胞呼吸过程中，氢受体2, 3, 5 - 氯化三苯基四氮唑（2,3,5-Triphenyl Tetrazolium Chloride, TTC）在脱氢酶作用下接受氢以后，被还原为三苯基甲鐟（Triphenyl Formazone, TF），TF呈现红色，于485nm测定其吸光值，即得脱氢酶活性。

自备实验仪器及用品

天平、恒温培养箱或水浴锅、低温离心机、可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、冰、蒸馏水、甲醇（不允许快递，请用户自备）。

实验方法学：

选择抗凝的注意点：

①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致，同时所取的全血的量也要尽量一致;

②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒，充分抗凝，防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;

③、抗凝全血收集的血浆相对较多（1ml抗凝全血能分离出0.4～0.5ml血浆）;

④、抗凝收集的血浆冷冻保存后，解冻时可能会出现絮状浑浊，如有则需要离心去掉浑浊后

用于测定。

骨架衔接蛋白BIN3抗体Human GEF-H1 ELISA Kit小鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ（cTn-Ⅰ）ELISA试剂盒,

双向染色体分裂蛋白1抗体Human GDPD5 ELISA Kit小鼠P物质（SP）ELISA试剂盒,

转录因子Brn3蛋白抗体Brn3αHuman GFPT1 ELISA Kit小鼠25羟基3（25（OH）D3/25 HVD3）ELISA试剂盒,

骨形态发生蛋白6抗体Human GDPD2 ELISA Kit大鼠嗜酸性粒阳离子蛋白（ECP）ELISA试剂盒,

脑钠素抗体Human GEFT ELISA Kit大鼠水通道蛋白5（AQP-5）ELISA试剂盒,

骨形态发生蛋白3抗体Human GEM ELISA Kit大鼠6酮前列腺素（6-K-PG）ELISA试剂盒,

抑凋亡基因bag1抗体Human GEMIN5 ELISA Kit大鼠抗甲状腺球蛋白抗体（ATGA/TGAB）ELISA试剂盒,

蛙皮素受体3抗体Human GEMIN4 ELISA Kit大鼠Ⅲ型前胶原端肽（PⅢNT）ELISA试剂盒,

脱氢酶(DHA)可见分光光度法检测试剂盒胎儿血红蛋白(HBF)免疫试剂盒进口、分装

山羊抗利尿激素/血管加压素/精加压素(ADH/VP/AVP)免疫试剂盒现货供应

组织蛋白S(CTSS)免疫试剂盒进口、组装

小鼠白介素12(IL-12/P70)免疫试剂盒现货供应

小鼠载脂蛋白A5(apo-A5)免疫试剂盒现货供应

猪铁蛋白(FE)免疫试剂盒现货供应

鸡肺炎支原体(MP)抗体(IgG)免疫试剂盒进口、组装

小鼠胱天蛋白9(Casp-9)免疫试剂盒*直销

大鼠酰基转移(LCAT)免疫试剂盒进口、分装

大鼠新喋呤免疫试剂盒现货供应

操作步骤:

实验开始前，各试剂均应平衡至室温（试剂不能直接在37℃溶解）；试剂或样品稀释时，均需混匀，混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量，如样品浓度过高时，应对样品进行稀释，以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围，计算时再乘以相应的稀释倍数。

1.        加样：分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl，余孔分别加标准品或待测样品100μl，注意不要有气泡，加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀，酶标板加上盖或覆膜，37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性，每次实验请使用新的标准品溶液。

2.        弃去液体，甩干，不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl（在使用前一小时内配制），酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。

3.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板3次，每次浸泡1-2分钟，大约400μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

4.        每孔加检测溶液B工作液（同检测A工作液） 100μl，酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。

5.        温育60分钟后，弃去孔内液体，甩干，洗板5次，每次浸泡1-2分钟，350μl/每孔，甩干（也可轻拍将孔内液体拍干）。

6.        依序每孔加底物溶液90μl，酶标板加上覆膜37℃避光显色（30分钟内，此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色，后3-4孔梯度不明显，即可终止）。

7.       依序每孔加终止溶液50μl，终止反应，此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性，底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度（OD值）。