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保存条件 | -20℃、避光 | 货号 | GOY-XP3247 |
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产品规格 | 100mL /500mL | 用途 | 仅供科研实验 |
产品名称 | 小鼠原代海绵体内皮细胞专用培养基 | 货号 | GOY-XP3247 |
规格 | 100mL/500mL | 用途 | 仅供科研研究实验 |
产品介绍
由团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持小鼠原代海绵体内皮细胞最佳的生长状态。
本产品中已包含小鼠原代海绵体内皮细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于小鼠原代海绵体内皮细胞的培养。
运输:放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输
保存方法:按照对应保存条件保存12个月,配置好的培养基2℃~8℃,保存2个月;
质量控制
细胞复苏:
从液氮罐中取出冻存细胞,迅速放入37℃水浴中解冻。
解冻后,将细胞转移到含有新鲜培养基的培养皿中,轻轻摇动使细胞均匀分布。
放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。
细胞换液:
吸除或倒掉培养皿内的旧培养液。
加入PBS缓冲液,轻轻漂洗细胞,以去除悬浮在细胞表面的碎片,重复几次。
加入新的培养基。
细胞传代:
当细胞长到80%~90%时,进行传代。
吸除或倒掉瓶内旧培养液,加入PBS缓冲液漂洗。
加入消化液,轻轻摇动使消化液流遍所有细胞表面。
将培养瓶放入37℃培养箱中静止几分钟,观察细胞变化。当细胞间隙增大后,加入含有血清的培养液终止消化。
吹打细胞使其成为悬液,转移到离心管中离心。
弃上清,加入适量的细胞培养液重悬细胞。
按比例分装到新的培养皿中,补加新鲜培养基。
做好标记,放入37℃、5%CO2的培养箱中培养。
细胞冻存:
选择对数生长期的细胞进行冻存。
将细胞转移到离心管中离心,弃上清。
加入适量的冻存液(如90%的培养基+10%的DMSO),轻轻吹打重悬细胞。
将细胞转移到冷冻保存管中,标记后放入程序降温盒,再放入-80℃冰箱冻存。几小时后或过夜转至液氮罐保存。
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)第二天观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
小鼠肺腺癌细胞系;LA795 | 小鼠结肠黏膜上皮细胞永生化细胞专用培养基 |
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