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选择ELISA试剂盒应从灵敏度、特异性、精密度、稳定性、简便性、安全性及经济性全面评价。
产品名称:大鼠β内啡肽受体(β-EPR)elisa试剂盒
英文名称:Rat Beta-Endorphin receptor,β-EPR ELISA Kit
规格:48T/96T
保存: 2-8℃(频繁使用时);-20℃(长时间不用时)。
有效期: 6 个月(4℃);12 个月(-20℃)。
用途: 用于体外定量分析人血清、血浆、细胞培养上清、细胞裂解液
具有如下优点:
一、高效、灵敏、特异的抗体;
二、稳定的重复性和可靠性;
三、吸附性能好,空白值低,孔底透明度高的固相载体;
四、适用血清、血浆、组织匀浆液、细胞培养上清液、尿液等等多种标本类型;
五、性价比非常好,节省实验经费。
试剂配制:
1、酶联板(Assay plate ):一块(96孔或者48孔)。
2、标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3、样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4、生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5、辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液 (HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6、生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)
7、辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)
8、底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
9、浓洗涤液(Wash Buffer):1×20ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。
10、终止液(Stop Solution):1×10ml/瓶(2N H2SO4)。
注意事项:
1加样:
①实验样本过多时,可分批次操作,以减少实验时间延长造成的误差;
②加酶试剂后,用吸水纸吸干孔外试剂;
③作定量试验时,使用加样器加注试剂,并经常校正其准确性,此外,要做到一份样本一个移液头,防止交叉污染。
2.温育:
①如有两种温度,尽量使用较低的温育温度、较长反应时间的条件;
②用1个小温度计放置在板孔反应液中测量观察;
③96孔板周围孔与中心孔在温育中的热力学梯度会造成“边缘效应”,因此尽量采用水浴;
3.洗板:
①手工洗板时,拍板时要垂直,避免交叉污染,用力不能过猛,防止抗原抗体复合物脱离;
②洗板机洗板时应经常检查冲洗头是否通畅,若被杂物堵塞时可用注射器针头挑出;
③为了洗涤效果好,实验室可采用机器与人工洗涤相结合的方法,在机器洗涤后再进行人工洗板1-2次,或适当增加洗板的次数;
4.显色:
ELISA试剂盒中,如以四甲基联苯胺(TMB)为底物,则提供的底物为A和B两瓶应用液;如以邻苯二胺(OPD)为底物,则试剂盒提供邻苯二胺片剂或粉剂。显色反应条件为37℃或室温反应15-30 min。以邻苯二胺(OPD)为底物的试剂,要临用前30 min配制且必须避光。以四甲基联苯胺(TMB)为底物的试剂则不需避光,但A、B液应尽量避免接触金属器械。
5.判定:
读取结果要在15-30 min内完成,定性测定用肉眼判读试验结果时,反应板应水平距离白色背景10-15 cm;定量测定时用酶标仪读取结果,酶标仪不应置于阳光或强光照射下,需先预热15-30 min再进行测试。
6-溴-1-己烯 2695-47-8卡洛磺钠τ-蛋白激酶1(τPK1)(酶联免疫吸附试验法)95%
6-溴-1-己烯 2695-47-8奥美拉唑强啡肽(Dyn)(酶联免疫吸附试验法)95%
6-溴-1-己烯 2695-47-8维生素B2甘露糖结合蛋白(MBL)(酶联免疫吸附试验法)95%
2-氨基-4,5-二甲氧基苯 26961-27-3泛酸钙甘露聚糖结合凝集素关联丝氨酸蛋白酶1(MASP1)(酶联免疫吸附试验法)98%
2-氨基-4,5-二甲氧基苯 26961-27-3乌苯美司甘露聚糖结合凝集素关联丝氨酸蛋白酶1(MASP1)(酶联免疫吸附试验法)98%
9,10-二(1-萘基)蒽 26979-27-1阿苯达唑上皮型脂肪酸结合蛋白(FABP5)(酶联免疫吸附试验法)98%
9,10-二(1-萘基)蒽 26979-27-1苯磺酸氨氯地平凋亡相关因子配体(FASL)(酶联免疫吸附试验法)98%
D-erythro-sphingosine-1-phosphate 26993-30-6盐酸特拉唑血红素结合蛋白(HPX)(酶联免疫吸附试验法)≥98%
5-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲 27006-76-4蛋白激酶N2(PKN2)(酶联免疫吸附试验法)95%
5-氯-1,3-二甲基-1H-吡唑-4-甲 27006-76-4氨力农蛋白激酶N2(PKN2)(酶联免疫吸附试验法)95%
5-溴-2-苯基吡啶 27012-25-5更昔洛韦蛋白激酶N2(PKN2)(酶联免疫吸附试验法)95%
3,5-二甲酸甲酯 2702-58-1肾上腺色腙CD3d分子(CD3d)(酶联免疫吸附试验法)98%
3,5-二甲酸甲酯 2702-58-1紫杉Toll样受体1(TLR1)(酶联免疫吸附试验法)98%
2-溴-5-甲氧苯(BMA) 27060-75-9大蒜素Toll样受体3(TLR3)(酶联免疫吸附试验法)98%
2-溴-5-甲氧苯(BMA) 27060-75-9豆腐果苷骨形成蛋白1(BMP1)(酶联免疫吸附试验法)98%
大鼠细胞色素C(Cyt-C)ELISA Kit,48T/96T 拉丁属名: Newcastle disease virus
人血纤蛋白原(Fbg)ELISA Kit,48T/96T 用途: 固氮
小鼠血纤蛋白原(Fbg)ELISA Kit,48T/96T 拉丁属名: Escherichia coli
大鼠促性腺激素释放激素受体抗体(GNRHR-Ab)ELISA Kit,48T/96T 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
牛分泌型免疫球蛋白A(sIgA)ELISA Kit,48T/96T 拉丁属名: Saccharomyces cerevisiae
大鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA Kit,48T/96T 注意事项: 仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的,不可用于人类或动物的临床诊断或治疗,非药用,非食用
小鼠凋亡诱导因子(AIF)ELISA Kit,48T/96T 拉丁属名: Penicillium brevicompactum
大鼠血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13/vWF-cp)ELISA Kit,48T/96T用途: 分类、研究,具有处理富营养水体和养殖废水潜力。
大鼠β内啡肽受体(β-EPR)elisa试剂盒细胞SPHK2激酶活性荧光定量 FERMT1 (Fermitin family homolog 1) 100 ul
组织SPHK2激酶活性荧光定量 FLAD1 (FAD synthase) 20 ul
细胞SPHK激酶总活性荧光定量 ESPL1 (Separin) 100 ul
组织SPHK激酶总活性荧光定量 FTO(Alpha-ketoglutaRate-dependent dioxygenase FTO) 100 ul
细胞Akt1/PKBa激酶活性定量(A/B/C) FASTK (Fas-activated serine/threonine kinase) 20 ul
组织Akt1/PKBa激酶活性定量(A/B/C) EPS15 (Epidermal growth factor receptor substrate 15) 100 ul
细胞Akt2/PKBβ激酶活性定量(A/B/C) EPHB4 (Ephrin type-B receptor 4) 100 ul
组织Akt2/PKBβ激酶活性定量(A/B/C) TUFM (Elongation factor Tu, mitochondrial) 100 ul
细胞Akt3/PKBγ激酶活性定量(A/B/C) EEF2 (Elongation factor 2) 100 ul
组织Akt3/PKBγ激酶活性定量(A/B/C) EPS8L1 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 1) 500 ul
细胞Akt/PKB激酶总活性定量(A/B/C) ELSPBP1 (Epididymal sperm-binding protein 1) 100 ul
组织Akt/PKB激酶总活性定量(A/B/C) ERN2 (Serine/threonine-protein kinase/endoribonuclease IRE2) 100µl
细胞AURORA-A激酶活性定量(A/B/C) EPS8L3 (Epidermal growth factor receptor kinase substrate 8-like protein 3) 100 ul
组织AURORA-A激酶活性定量(A/B/C) EPC1 (Enhancer of polycomb homolog 1) 100 ul
细胞AURORA-B激酶活性定量(A/B/C) ERAS (GTPase ERas) 100 ul
组织AURORA-B激酶活性定量(A/B/C) ECHDC1 (Ethylmalonyl-CoA decarboxylase) 100 ul
操作流程如下:
(1)仅用于科研待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。
(2)酶标板置4℃,包被过夜。
(3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。
(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。
(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(6)洗板,同(4)。
(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。
(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。
(9)洗板,同(4)。
(10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。
(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。
(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。
(13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。
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