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组成及试剂配制:
1、组织胞浆菌通用PCR检测试剂盒哪里有卖酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
产品名称 | 英文名称 | 价格 |
组织胞浆菌通用PCR检测试剂盒哪里有卖 | Histoplasm spp.PCR | 电询 |
样本采集、存放及运输:
1、组织胞浆菌通用PCR检测试剂盒哪里有卖样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
组织胞浆菌通用PCR检测试剂盒哪里有卖人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管(含0.4ml灭菌生理盐水),用无菌棉球将试管塞紧后,密闭送检。标本可立即用于检测,也可保存于-20℃待测。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化(取得医疗器械许可证)的RNA提取试剂盒处理标本,具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l样品置于1.5ml 离心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次; 13000rpm离心15min, 吸取上层液体,加入等体积异丙醇,颠倒混匀室温静置10min, 13000rpm离心10min,轻轻倒去上清;加入700?l 75%乙醇,颠倒洗涤,13000rpm离心5min,轻轻倒去上清,倒置于吸水纸上,弃尽液体或4000rpm离心5sec,将管壁上的残余液体甩到管底部,用微量加样器尽量吸干液体,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶(n为反应管数),振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中,然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中,盖好管盖,立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上,推荐循环参数设置:
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循环45次;单点荧光检测在60℃,反应体系为25?l。
荧光通道检测选择:选用FAM通道。
羟类固醇脱酶17β抗体(17β-HSD8)
透明质酸结合蛋白4抗体
A型流感病毒H5N1凝集素抗体
A型流感病毒核衣壳蛋白抗体
A型流感病毒核衣壳蛋白抗体
A型流感病毒核衣壳蛋白抗体
B型流感病毒蛋白抗体
人类状瘤病毒16-E7抗体
跨膜蛋白酶丝氨酸1抗体
肺癌癌基因蛋白3抗体
组织胞浆菌通用PCR检测试剂盒哪里有卖分子式:C7H6O2;C6H5COOH酸标准溶液--(Benzoic acid in Petroleum ether)的详细信息物理化学性质:白色单斜片状或针状结晶,具有或的气味,易燃。。质轻。无气味或微有类似安息香或的气味。在100℃时迅速升华,能随水蒸气同时挥发。易溶于醇、、醚和酮,能溶于、二硫化碳、松节油及油类,微溶于水和石油醚。℃。酸常以游离酸、酯或其衍生物的形式广泛存在于自然界。例如,在安息香胶内以游离酸和苄酯的形式存在,在一些植物的叶和茎皮中以游离的形式存在,在香精中以酯或苄酯的形式存在,在马尿中以其衍生物马尿酸的形式存在。蒸气易挥发。密度:1.2659熔点:122.4℃
反应五要素:
组织胞浆菌通用PCR检测试剂盒哪里有卖参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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