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组成及试剂配制:
1、猫支原体PCR检测试剂盒价格酶标板:一块(96孔)
2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为200 U/L,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液:1×20ml。
4、 检测稀释液A:1×10ml。
5、 检测稀释液B:1×10ml。
产品名称 | 英文名称 | 价格 |
猫支原体PCR检测试剂盒价格 | Abalone Spherical VirusPCR | 电询 |
样本采集、存放及运输:
1、样本采集:各类型样本按照常规方法采集;
2、存放:样本在2~8℃条件下保存应不超过72h,-70℃以下可长期保存,但应避免反复冻融(多冻融3次);
3、运输:采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物,将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管(含0.4ml灭菌生理盐水),用无菌棉球将试管塞紧后,密闭送检。标本可立即用于检测,也可保存于-20℃待测。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化(取得医疗器械许可证)的RNA提取试剂盒处理标本,具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取,方法如下:取100?l样品置于1.5ml 离心管中,加入300?l裂解液(Trizol),再加入100, 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次; 13000rpm离心15min, 吸取上层液体,加入等体积异丙醇,颠倒混匀室温静置10min, 13000rpm离心10min,轻轻倒去上清;加入700?l 75%乙醇,颠倒洗涤,13000rpm离心5min,轻轻倒去上清,倒置于吸水纸上,弃尽液体或4000rpm离心5sec,将管壁上的残余液体甩到管底部,用微量加样器尽量吸干液体,加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶(n为反应管数),振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中,然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中,盖好管盖,立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上,推荐循环参数设置:
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次,再按95℃×15sec→60℃×60sec,循环45次;单点荧光检测在60℃,反应体系为25?l。
荧光通道检测选择:选用FAM通道。
OC90 ELISA Kit组织胺H4受体抗体耳椎蛋白90(OC90)ELISA试剂盒
OTOR ELISA KitmRNA cap甲基转移酶抗体耳纤维细胞源性蛋白(OTOR)ELISA试剂盒
OTOS ELISA Kit5’-三磷酸聚核苷酸抗体耳蜗蛋白(OTOS)ELISA试剂盒
OTOL1 ELISA Kit组氨酸三聚体核苷结合蛋白1抗体耳石蛋白1(OTOL1)ELISA试剂盒
OTOA ELISA Kit甲状腺促进激素alpha链耳锚蛋白(OTOA)ELISA试剂盒
OTOG ELISA KitA型流感病毒H7N9凝集素抗体耳胶蛋白(OTOG)ELISA试剂盒
OTOF ELISA Kit组蛋白去乙酰化酶3抗体耳畸蛋白(OTOF)ELISA试剂盒
OTOP3 ELISA Kit人乙肝表面抗原抗体抗体耳蝶呤3(OTOP3)ELISA试剂盒
OTOP2 ELISA Kit肾损伤分子1抗体耳蝶呤2(OTOP2)ELISA试剂盒
O* ELISA Kit组氨酸富含脯氨酸糖蛋白抗体耳蝶呤1(O*)ELISA试剂盒
COMT ELISA KitHER3受体抗体儿茶酚-O-甲基转移酶(COMT)ELISA试剂盒
ATCAY ELISA Kit磷酸化HER3受体抗体鳄失调蛋白(ATCAY)ELISA试剂盒
PLUNC ELISA Kit磷酸化HER3受体抗体腭/肺/鼻上皮癌关联蛋白(PLUNC)ELISA试剂盒
DMBT1 ELISA Kit磷酸化HER4抗体恶性脑肿瘤缺失蛋白1(DMBT1)ELISA试剂盒
MRP1 ELISA Kit糖蛋白β-1B抗体多药耐药关联蛋白1(MRP1)ELISA试剂盒
PLAGL1 ELISA Kit磷酸化热休克蛋白27抗体多型性腺瘤基因样蛋白1(PLAGL1)ELISA试剂盒
PLRG1 ELISA KitHEAT重复内含蛋白7A蛋白抗体多效调节因子1(PLRG1)ELISA试剂盒
DPAGT1 ELISA Kit人瘤病毒16型E7抗体多萜醇磷酸-N-乙酰氨基葡萄糖磷酸转移酶1(DPAGT1)ELISA试剂盒
GALNT9 ELISA KitHER2抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶9(GALNT9)ELISA试剂盒
GALNT8 ELISA Kit人胎盘泌乳素抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶8(GALNT8)ELISA试剂盒
GALNT7 ELISA Kit热休克蛋白27抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶7(GALNT7)ELISA试剂盒
GALNT6 ELISA Kit高迁移率族蛋白A1抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶6(GALNT6)ELISA试剂盒
GALNT5 ELISA Kit磷酸化HER2受体抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶5(GALNT5)ELISA试剂盒
GALNT4 ELISA Kit热休克蛋白-20抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶4(GALNT4)ELISA试剂盒
GALNT3 ELISA Kit羟乙基淀粉抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶3(GALNT3)ELISA试剂盒
GALNT2 ELISA KitA型流感病毒H1N1-M2蛋白抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶2(GALNT2)ELISA试剂盒
GALNT14 ELISA Kit亨丁顿舞蹈症相互作用蛋白12抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶14(GALNT14)ELISA试剂盒
GALNT13 ELISA Kit单纯疱疹病毒1型DNA聚合酶催化亚单位抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶13(GALNT13)ELISA试剂盒
GALNT12 ELISA Kit人乙型肝炎核心抗原抗体单克隆抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶12(GALNT12)ELISA试剂盒
GALNT11 ELISA Kit磷酸化热休克蛋白27抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶11(GALNT11)ELISA试剂盒
GALNT10 ELISA Kit聚组氨酸抗体g标签抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶10(GALNT10)ELISA试剂盒
GALNT1 ELISA Kit磷酸化组蛋白H1,4样蛋白抗体多肽-N-乙酰氨基半乳糖转移酶1(GALNT1)ELISA试剂盒
SDC4 ELISA KitHER2受体抗体多配体蛋白聚糖4(SDC4)ELISA试剂盒
SDC3 ELISA Kit环化核苷酸调控阳离子通道蛋白亚型4多配体蛋白聚糖3(SDC3)ELISA试剂盒
SDC1 ELISA KitHEAT重复内含蛋白8蛋白抗体多配体蛋白聚糖1(SDC1)ELISA试剂盒
PIGR ELISA Kit雄激素调节样蛋白抗体多聚免疫球蛋白受体(PIGR)ELISA试剂盒
MMRN2 ELISA Kit雄激素调节蛋白2抗体多聚蛋白2(MMRN2)ELISA试剂盒
反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物:引物是PCR特异性反应的关键,PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物,利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则:
①引物长度: 15-30bp,常用为20bp左右。
②引物扩增跨度: 以200-500bp为宜,特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基:G+C含量以40-60%为宜,G+C太少扩增效果不佳,G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布,避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构,避免两条引物间互补,特别是3'端的互补,否则会形成引物二聚体,产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基,特别是末及倒数第二个碱基,应严格要求配对,以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点, 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点, 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性:引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量:每条引物的浓度0.1~1umol或10~100pmol,以低引物量产生所需要的结果为好,引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增,且可增加引物之间形成二聚体的机会。
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