肉色诺卡菌PCR检测试剂盒品牌 返回列表页

组成及试剂配制:
1、肉色诺卡菌PCR检测试剂盒品牌酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管（含0.4ml灭菌生理盐水），用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。标本可立即用于检测，也可保存于-20℃待测。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化（取得医疗器械许可证）的RNA提取试剂盒处理标本，具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l样品置于1.5ml 离心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次； 13000rpm离心15min， 吸取上层液体，加入等体积异丙醇，颠倒混匀室温静置10min， 13000rpm离心10min，轻轻倒去上清；加入700?l 75%乙醇，颠倒洗涤，13000rpm离心5min，轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，弃尽液体或4000rpm离心5sec，将管壁上的残余液体甩到管底部，用微量加样器尽量吸干液体，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶（n为反应管数）,振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中，然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中，盖好管盖，立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上，推荐循环参数设置：
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循环45次;单点荧光检测在60℃，反应体系为25?l。
荧光通道检测选择：选用FAM通道。

PTEN ELISA KitⅢ型纤维连接蛋白域蛋白8抗体磷酸酶张力蛋白同源物(PTEN)ELISA试剂盒
PMVK ELISA KitⅢ型纤维连接蛋白域蛋白3B抗体磷酸甲羟戊酸激酶(PMVK)ELISA试剂盒
PIK3Cδ ELISA Kit粘液样脂肪肉瘤蛋白FUS1抗体磷酸肌醇-3-激酶催化亚基δ肽(PIK3Cδ)ELISA试剂盒
PIK3Cβ ELISA Kit细胞生长抑制蛋白26/前列腺特异性膜抗原抗体样蛋白抗体磷酸肌醇-3-激酶催化亚基β肽(PIK3Cβ)ELISA试剂盒
PI3K2α ELISA Kit肾母细胞瘤基因X染色体蛋白抗体磷酸肌醇-3-激酶2α肽(PI3K2α)ELISA试剂盒
PFAS ELISA Kit磷酸化Fas死亡结构域相关蛋白抗体磷酸核糖甲酰甘氨酸脒合酶(PFAS)ELISA试剂盒
GART ELISA Kit肾母细胞瘤X蛋白抗体磷酸核糖甘氨酰胺转甲酰基酶(GART)ELISA试剂盒
PAICS ELISA Kitα-L岩藻糖苷酶抗体磷酸核糖胺咪唑羧化酶(PAICS)ELISA试剂盒
PGK2 ELISA KitFbxW2蛋白抗体磷酸甘油酸酯激酶2(PGK2)ELISA试剂盒
PGK1 ELISA KitFbxw7蛋白抗体磷酸甘油酸酯激酶1(PGK1)ELISA试剂盒
PHGDH ELISA KitFBXW8蛋白抗体磷酸甘油酸脱氢酶(PHGDH)ELISA试剂盒
PGAM5 ELISA Kit人纤维蛋白原单克隆抗体磷酸甘油酸变位酶5(PGAM5)ELISA试剂盒
PGAM4 ELISA KitFANCD2抗体磷酸甘油酸变位酶4(PGAM4)ELISA试剂盒
PGAM1 ELISA Kit磷酸化FANCD2抗体磷酸甘油酸变位酶1(PGAM1)ELISA试剂盒
PMM2 ELISA Kit细胞外基质蛋白FREM2抗体磷酸甘露糖酶1(PMM2)ELISA试剂盒
PMM1 ELISA Kit面肩肱型肌营养不良症相关蛋白FRG1抗体磷酸甘露糖酶1(PMM1)ELISA试剂盒
PPCDC ELISA KitCD350抗体磷酸泛酰半胱氨酸脱羧酶(PPCDC)ELISA试剂盒
PPCS ELISA KitCD344抗体磷酸泛酰半胱氨酸合成酶(PPCS)ELISA试剂盒
PDE9A ELISA Kit卷曲蛋白6抗体磷酸二酯酶9A(PDE9A)ELISA试剂盒
PDE8B ELISA Kit卷曲蛋白8抗体磷酸二酯酶8B(PDE8B)ELISA试剂盒
PDE8A ELISA KitFSD1蛋白抗体磷酸二酯酶8A(PDE8A)ELISA试剂盒
PDE7B ELISA Kit卷曲螺旋结构域蛋白10抗体磷酸二酯酶7B(PDE7B)ELISA试剂盒
PDE7A ELISA KitPrader-Willi综合征相关蛋白抗体磷酸二酯酶7A(PDE7A)ELISA试剂盒
PDE4D ELISA KitAKT相互作用蛋白蛋白抗体磷酸二酯酶4D(PDE4D)ELISA试剂盒
PDE12 ELISA KitDNA解旋酶V抗体磷酸二酯酶12(PDE12)ELISA试剂盒
PDE11A ELISA Kit远端上游元件结合蛋白3抗体磷酸二酯酶11A(PDE11A)ELISA试剂盒
PDE10A ELISA Kit岩藻糖变旋酶抗体磷酸二酯酶10A(PDE10A)ELISA试剂盒
Lptn ELISA KitX三体综合征相关蛋白FUNDC1抗体淋巴细胞趋化因子(Lptn)ELISA试剂盒
LY96 ELISA Kit弗林蛋白酶抗体淋巴细胞抗原96(LY96)ELISA试剂盒
LY9 ELISA Kit富含丝氨酸/精氨酸重复结构蛋白抗体淋巴细胞抗原9(LY9)ELISA试剂盒
LY86 ELISA Kit岩藻糖基转移酶6抗体淋巴细胞抗原86(LY86)ELISA试剂盒
LY75 ELISA Kit岩藻糖基转移酶7抗体淋巴细胞抗原75(LY75)ELISA试剂盒
LFA3 ELISA Kit眼睛和头发颜色相关蛋白FUZ抗体淋巴细胞功能关联抗原3(LFA3)ELISA试剂盒
LFA2 ELISA Kit滤泡型转运蛋白1/II型慢性淋巴性白血病抗体淋巴细胞功能关联抗原2(LFA2)ELISA试剂盒
LFA1α ELISA Kit磷酸化碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体淋巴细胞功能关联抗原1α(LFA1α)ELISA试剂盒
LCP2 ELISA KitFAM65B蛋白抗体淋巴细胞胞浆蛋白2(LCP2)ELISA试剂盒
LCP1 ELISA Kit胞外分泌型丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶FAM20C抗体淋巴细胞胞浆蛋白1(LCP1)ELISA试剂盒
LTβR ELISA Kit凝血因子8/第八凝血因子/第八因子相关抗原抗体抗体淋巴毒素β受体(LTβR)ELISA试剂盒
LTβ ELISA Kit纤维母细胞生长因子受体底物3抗体淋巴毒素β(LTβ)ELISA试剂盒
LNPEP ELISA Kit纤维连接蛋白抗体亮氨酰/半胱氨酰氨肽酶(LNPEP)ELISA试剂盒
LRRK2 ELISA KitFCHO1蛋白抗体亮氨酸丰富重复激酶2(LRRK2)ELISA试剂盒
LGI3 ELISA Kit磷酸化脂肪细胞型脂肪酸结合蛋白亮氨酸丰富重复LGI家族成员3(LGI3)ELISA试剂盒
LRRFIP1 ELISA Kit脂肪酸结合蛋白12抗体亮氨酸丰富重复FLII相互作用蛋白1(LRRFIP1)ELISA试剂盒
LRG1 ELISA Kit四连接同源蛋白FJX1抗体亮氨酸丰富α2-糖蛋白1(LRG1)ELISA试剂盒
AMPH ELISA KitG蛋白偶联受体γ3抗体两性蛋白(AMPH)ELISA试剂盒
SYCP3 ELISA KitG蛋白偶联受体γ7抗体联会复合体蛋白3(SYCP3)ELISA试剂盒
GMNN ELISA KitG蛋白结合蛋白α13/Gα13抗体联会蛋白(GMNN)ELISA试剂盒
TELE ELISA KitG蛋白结合蛋白α16/Gα16抗体连续蛋白(TELE)ELISA试剂盒

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。