33诺如病毒3型PCR检测试剂盒品牌 返回列表页

组成及试剂配制:
1、33诺如病毒3型PCR检测试剂盒品牌酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管（含0.4ml灭菌生理盐水），用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。标本可立即用于检测，也可保存于-20℃待测。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化（取得医疗器械许可证）的RNA提取试剂盒处理标本，具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l样品置于1.5ml 离心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次； 13000rpm离心15min， 吸取上层液体，加入等体积异丙醇，颠倒混匀室温静置10min， 13000rpm离心10min，轻轻倒去上清；加入700?l 75%乙醇，颠倒洗涤，13000rpm离心5min，轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，弃尽液体或4000rpm离心5sec，将管壁上的残余液体甩到管底部，用微量加样器尽量吸干液体，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶（n为反应管数）,振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中，然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中，盖好管盖，立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上，推荐循环参数设置：
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循环45次;单点荧光检测在60℃，反应体系为25?l。
荧光通道检测选择：选用FAM通道。

PTGES ELISA Kit叉头蛋白P3抗体前列腺素E合酶(PTGES)ELISA试剂盒
PTGDS ELISA Kit成纤维细胞生长因子8抗体前列腺素D合酶(PTGDS)ELISA试剂盒
PGD2S ELISA Kit肌动蛋白结合蛋白Fascin抗体前列腺素D2合成酶(PGD2S)ELISA试剂盒
STEAP2 ELISA Kit线粒体裂变1蛋白抗体前列腺六跨膜表皮抗原2(STEAP2)ELISA试剂盒
PSCA ELISA Kit叉头蛋白P1抗体前列腺干细胞抗原(PSCA)ELISA试剂盒
PAR4 ELISA Kit鼠疫F1蛋白/鼠疫耶尔森氏菌荚膜抗原抗体F1单克隆抗体前列腺凋亡应答因子4(PAR4)ELISA试剂盒
LIPB ELISA Kit纤维母细胞生长因子5抗体前列腺蛋白类脂肪酶B(LIPB)ELISA试剂盒
PLOD3 ELISA Kit脆性X综合征相关蛋白AFF1抗体前胶原赖氨酸-2-酮戊二酸-5-双加氧酶1(PLOD3)ELISA试剂盒
PCPE1 ELISA Kit感觉神经蛋白1抗体前胶原C端蛋白酶增强子1(PCPE1)ELISA试剂盒
PKR2 ELISA Kit线粒体型共济失调蛋白抗体前动力蛋白受体2(PKR2)ELISA试剂盒
PKR1 ELISA KitFC段IgE受体α多肽抗体前动力蛋白受体1(PKR1)ELISA试剂盒
PK2 ELISA KitFAM81A蛋白抗体前动力蛋白2(PK2)ELISA试剂盒
PCSK9 ELISA KitFAM78B蛋白抗体前蛋白转化酶枯草溶菌素9(PCSK9)ELISA试剂盒
PCSK5 ELISA Kit9号染色体开放阅读框59抗体前蛋白转化酶枯草溶菌素5(PCSK5)ELISA试剂盒
PCSK1 ELISA KitFAM76A蛋白抗体前蛋白转化酶枯草溶菌素1(PCSK1)ELISA试剂盒
OT ELISA KitFAM76B蛋白抗体前催产素原(OT)ELISA试剂盒
VPREB3 ELISA KitFAM92A1蛋白抗体前-B-淋巴细胞基因3(VPREB3)ELISA试剂盒
VPREB1 ELISA KitFAM98A蛋白抗体前-B-淋巴细胞基因1(VPREB1)ELISA试剂盒
DYSF ELISA KitFRMD5蛋白抗体奇异不良素(DYSF)ELISA试剂盒
PHLDA2 ELISA KitFRMD6蛋白抗体普列克底物蛋白同源物样域家族A成员2(PHLDA2)ELISA试剂盒
PLEK2 ELISA KitFAM161A蛋白抗体普列克底物蛋白2(PLEK2)ELISA试剂盒
PLEK ELISA KitFAM153B蛋白抗体普列克底物蛋白(PLEK)ELISA试剂盒
GLUT9 ELISA KitFAM46C蛋白抗体葡萄糖转运蛋白9(GLUT9)ELISA试剂盒
GLUT8 ELISA Kit舌癌化疗耐药相关蛋白1葡萄糖转运蛋白8(GLUT8)ELISA试剂盒
GLUT7 ELISA KitFAM129B蛋白抗体葡萄糖转运蛋白7(GLUT7)ELISA试剂盒
GLUT6 ELISA Kit微管动力调节蛋白2抗体葡萄糖转运蛋白6(GLUT6)ELISA试剂盒
GLUT5 ELISA KitFAM50A蛋白抗体葡萄糖转运蛋白5(GLUT5)ELISA试剂盒
GLUT2 ELISA KitFAM113A蛋白抗体葡萄糖转运蛋白2(GLUT2)ELISA试剂盒
GLUT14 ELISA KitFAM150A蛋白抗体葡萄糖转运蛋白14(GLUT14)ELISA试剂盒
GLUT12 ELISA KitFRMD8蛋白抗体葡萄糖转运蛋白12(GLUT12)ELISA试剂盒
GLUT11 ELISA KitFGFR1癌基因伴侣蛋白抗体葡萄糖转运蛋白11(GLUT11)ELISA试剂盒
GLUT10 ELISA KitFAM家族蛋白40A抗体葡萄糖转运蛋白10(GLUT10)ELISA试剂盒
PGM5 ELISA KitFAM55D蛋白抗体葡萄糖磷酸变位酶5(PGM5)ELISA试剂盒
PGM3 ELISA Kit组织激活过氧化酶活化增生受体γ蛋白抗体葡萄糖磷酸变位酶3(PGM3)ELISA试剂盒
PGM2L1 ELISA KitFAM21C蛋白抗体葡萄糖磷酸变位酶2样蛋白1(PGM2L1)ELISA试剂盒
PGM1 ELISA KitFAM13C1蛋白抗体葡萄糖磷酸变位酶1(PGM1)ELISA试剂盒
PGM2 ELISA KitFAM59B蛋白抗体葡萄糖磷酸变位酶(PGM2)ELISA试剂盒
GUSβ ELISA KitFAM59A蛋白抗体葡萄糖苷酸酶β(GUSβ)ELISA试剂盒
GXYLT2 ELISA KitFAM160B1蛋白抗体葡萄糖苷木糖基转移酶2(GXYLT2)ELISA试剂盒
GXYLT1 ELISA KitFAM161B蛋白抗体葡萄糖苷木糖基转移酶1(GXYLT1)ELISA试剂盒

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。