55诺如病毒5型PCR检测试剂盒厂家 返回列表页

组成及试剂配制:
1、55诺如病毒5型PCR检测试剂盒厂家酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管（含0.4ml灭菌生理盐水），用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。标本可立即用于检测，也可保存于-20℃待测。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化（取得医疗器械许可证）的RNA提取试剂盒处理标本，具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l样品置于1.5ml 离心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次； 13000rpm离心15min， 吸取上层液体，加入等体积异丙醇，颠倒混匀室温静置10min， 13000rpm离心10min，轻轻倒去上清；加入700?l 75%乙醇，颠倒洗涤，13000rpm离心5min，轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，弃尽液体或4000rpm离心5sec，将管壁上的残余液体甩到管底部，用微量加样器尽量吸干液体，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶（n为反应管数）,振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中，然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中，盖好管盖，立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上，推荐循环参数设置：
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循环45次;单点荧光检测在60℃，反应体系为25?l。
荧光通道检测选择：选用FAM通道。

CCR6 ELISA Kit胎球蛋白A趋化因子C-C-基元受体6(CCR6)ELISA试剂盒
CCR5 ELISA Kit叉头蛋白L2抗体趋化因子C-C-基元受体5(CCR5)ELISA试剂盒
CCR4 ELISA Kit叉头相关转录因子3抗体趋化因子C-C-基元受体4(CCR4)ELISA试剂盒
CCR3 ELISA Kit铁蛋白抗体趋化因子C-C-基元受体3(CCR3)ELISA试剂盒
CCR2 ELISA KitFMS样酪氨酸激酶3配体抗体趋化因子C-C-基元受体2(CCR2)ELISA试剂盒
CCR1 ELISA Kit碱性成纤维细胞生长因子9抗体趋化因子C-C-基元受体1(CCR1)ELISA试剂盒
CCL3L1 ELISA Kit原癌基因酪氨酸蛋白激酶FES抗体趋化因子C-C-基元配体3样蛋白1(CCL3L1)ELISA试剂盒
CCL14 ELISA Kit成纤维细胞生长因子16抗体趋化因子C-C-基元配体14(CCL14)ELISA试剂盒
CHEM ELISA Kit成纤维细胞激活蛋白α抗体趋化素(CHEM)ELISA试剂盒
KTN1 ELISA KitFas相关磷酸酶1抗体驱动结合蛋白1(KTN1)ELISA试剂盒
KNCN ELISA Kit叶酸受体4抗体驱动结合蛋白(KNCN)ELISA试剂盒
KIF5A ELISA KitWnt信号受体蛋白抗体驱动蛋白家族成员5A(KIF5A)ELISA试剂盒
KIF20A ELISA Kit磷酸化载脂蛋白A1抗体驱动蛋白家族成员20A(KIF20A)ELISA试剂盒
KIF1A ELISA Kit磷酸化载脂蛋白A1抗体驱动蛋白家族成员1A(KIF1A)ELISA试剂盒
KIF18A ELISA Kit磷酸化碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体驱动蛋白家族成员18A(KIF18A)ELISA试剂盒
KIF14 ELISA Kit脂肪酸酰胺水解酶1抗体驱动蛋白家族成员14(KIF14)ELISA试剂盒
KNS2 ELISA Kit细胞外基质蛋白FRAS1抗体驱动蛋白2(KNS2)ELISA试剂盒
MPST ELISA Kit富马酸水合酶抗体巯基丙酮酸硫转移酶(MPST)ELISA试剂盒
HVCN1 ELISA Kit成纤维细胞生长因子21抗体氢离子电压门控通道蛋白1(HVCN1)ELISA试剂盒
FTL ELISA Kit核仁纤维蛋白抗体轻肽铁蛋白(FTL)ELISA试剂盒
NEFL ELISA Kit铁蛋白轻链抗体轻肽神经丝蛋白(NEFL)ELISA试剂盒
AFTPH ELISA Kit肝细胞核因子3抗体亲尾蛋白(AFTPH)ELISA试剂盒
CYPD ELISA Kit果糖1，6-二磷酸酯酶抗体亲环素D(CYPD)ELISA试剂盒
CYPB ELISA Kit6磷酸果糖激酶抗体亲环素B(CYPB)ELISA试剂盒
CYPA ELISA Kit肌肉果糖二磷酸酶抗体亲环素A(CYPA)ELISA试剂盒
KPNβ ELISA Kit纤维蛋白原γ链抗体亲核素β(KPNβ)ELISA试剂盒
KPNα7 ELISA Kit纤维蛋白肽B抗体亲核素α7(KPNα7)ELISA试剂盒
KPNα6 ELISA Kit原癌基因c FGR抗体亲核素α6(KPNα6)ELISA试剂盒
KPNα5 ELISA Kit肢体畸形相关蛋白FHOD1抗体亲核素α5(KPNα5)ELISA试剂盒
KPNα4 ELISA Kit磷酸化肢体畸形相关蛋白FHOD1抗体亲核素α4(KPNα4)ELISA试剂盒
KPNα3 ELISA Kit纤连蛋白2抗体亲核素α3(KPNα3)ELISA试剂盒
KPNα2 ELISA Kit纤连蛋白7抗体亲核素α2(KPNα2)ELISA试剂盒
KPNα1 ELISA Kit弹性蛋白结合蛋白Fcn2抗体亲核素α1(KPNα1)ELISA试剂盒
PLP1 ELISA Kit范可尼综合征相关蛋白FAN1抗体鞘磷脂脂质蛋白1(PLP1)ELISA试剂盒
SMPD4 ELISA Kit范可尼贫血组蛋白A抗体鞘磷脂磷酸二酯酶4(SMPD4)ELISA试剂盒
SMPD3 ELISA Kit卷曲蛋白3抗体鞘磷脂磷酸二酯酶3(SMPD3)ELISA试剂盒
SGMS2 ELISA Kit细胞分裂周期样蛋白20抗体鞘磷脂合酶2(SGMS2)ELISA试剂盒
SGMS1 ELISA Kit铁氧化还原蛋白还原酶抗体鞘磷脂合酶1(SGMS1)ELISA试剂盒
MPZ ELISA Kit磷酸化碱性成纤维细胞生长因子受体1抗体鞘磷脂蛋白0(MPZ)ELISA试剂盒
SPH ELISA Kit甲精结合蛋白17抗体鞘磷脂(SPH)ELISA试剂盒

反应五要素:
参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。