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NCI-H1437 细胞专用培养基

参  考  价:1 - 560 /盒
具体成交价以合同协议为准
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    上海市

更新时间:2025-05-28 16:47:28浏览次数:212次

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保存条件 -20℃、避光 货号 GOY-XP4505
产品规格 1*125ml/500ml 用途 仅供科研实验
NCI-H1437 细胞专用培养基根据NCI - H1437细胞(一种人肺癌细胞系)的特点优化,含有细胞生长所需的各种营养物质,以及可能影响细胞生长、凋亡和信号传导的因子,以支持NCI - H1437细胞在体外的稳定培养和相关生物学特性的研究。

NCI-H1437 细胞专用培养基

产品介绍:

NCI-H1437 细胞专用培养基 

由团队精心优化,经过长期测试,本产品可保持NCI-H1437 细胞最佳的生长状态。

本产品中已包含NCI-H1437 细胞生长所需的各种成分,无需添加任何成分,可直接用于NCI-H1437细胞的培养。

产品主要成分

RPMI-1640 基础培养基              435 ml

特级胎牛血清        50 ml

Sodium Pyruvate丙酮酸钠        5 ml

HEPES 1M Buffer solution        5 ml

P/S青霉su-链霉su        5m壺

规格

1*125ml/500ml

保存条件

-20℃、避光

货号

GOY-XP4505

用途

仅供科研研究实验

运输和保存:

NCI-H1437 细胞专用培养基

运输:放置于含有生物冰袋的保温箱中低温运输

保存方法:2℃~8℃,避光,保存2个月;-20℃,避光,保存6个月。

质量控制:

NCI-H1437 细胞专用培养基

实验报告:

NCI-H1437 细胞专用培养基
一、分离与培养:

1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,将组织剪成1mm3左右大小;

2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;

3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织被消化;

4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;

5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;

二、免疫荧光鉴定:

1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;

2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;

4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;

5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;

6、用PBS冲洗3次,每次10min,在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。

注意事项:

NCI-H1437 细胞专用培养基
1、收到产品请先检查包装是否完好,如有破损,漏液、浑浊等现象请及时联系我们,培养基冻融后,可能会有少量絮状物析出,不影响产品正常使用。

2、请仔细阅读产品说明书,了解产品使用方法、保存方式、有效期等信息,若因操作失误,保存不当而导致产品出现污染等问题的,责任由客户自行承担。

3、本产品仅能用于科研,培养基中的一些组分对人体有较低的危害性,如有接触立即用大量清水冲洗即可。

培养操作:

NCI-H1437 细胞专用培养基
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。第二天换液并 检查细胞密度。

2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。

1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。

4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。

3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;

1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。

2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。

3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。

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