马流感病毒H3N8型（EIV-H3N8）核酸检测试剂盒 返回列表页

组成及试剂配制:
1、马流感病毒H3N8型(EIV-H3N8)核酸检测试剂盒说明书价格酶标板：一块（96孔）
2、 标准品（冻干品）： 2瓶，请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至0.5ml，盖好后室温静置大约10分钟，同时反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为200 U/L，然后做系列倍比稀释（注：不要直接在板中进行倍比稀释），分别配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，样品稀释液直接作为空白孔 0 U/L。如配制100 U/L标准品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述标准品加入含有0.3ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
3、 样品稀释液：1×20ml。
4、 检测稀释液A：1×10ml。
5、 检测稀释液B：1×10ml。

样本采集、存放及运输：
1、样本采集：各类型样本按照常规方法采集；
2、存放：样本在2~8℃条件下保存应不超过72h，-70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（多冻融3次）；
3、运输：采用泡沫箱加冰密封进行运输。
【标本要求】
人体鼻腔或咽部分泌物:用无菌捻拭子拭取鼻腔或咽部分泌物，将分泌物或咽拭子置入无菌玻璃管（含0.4ml灭菌生理盐水），用无菌棉球将试管塞紧后，密闭送检。标本可立即用于检测，也可保存于-20℃待测。
【检验方法】
1.标本、对照品的核酸裂解处理
用商品化（取得医疗器械许可证）的RNA提取试剂盒处理标本，具体操作参见该试剂盒说明书。
或用Trizol法提取，方法如下：取100?l样品置于1.5ml 离心管中，加入300?l裂解液（Trizol），再加入100， 混匀器上振荡混匀5sec或颠倒混匀15次； 13000rpm离心15min， 吸取上层液体，加入等体积异丙醇，颠倒混匀室温静置10min， 13000rpm离心10min，轻轻倒去上清；加入700?l 75%乙醇，颠倒洗涤，13000rpm离心5min，轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，弃尽液体或4000rpm离心5sec，将管壁上的残余液体甩到管底部，用微量加样器尽量吸干液体，加入20?l DEPC-H2O溶解RNA。
2.试剂配制
取n×19?l H7N9核酸荧光PCR检测混合液与n×1?l RT-PCR酶（n为反应管数）,振荡混匀数秒, 3000rpm离心数秒。
3.加样取上述混合液20?l置于PCR管中，然后将样品核酸提取液、DEPC-H2O、阳性对照品各5?l分别加入PCR管中，盖好管盖，立即进行PCR扩增反应。
4. PCR扩增反应管置于定量荧光PCR仪上，推荐循环参数设置：
45℃×10min; 95℃×15min;循环一次，再按95℃×15sec→60℃×60sec，循环45次;单点荧光检测在60℃，反应体系为25?l。
荧光通道检测选择：选用FAM通道。

PHSA ELISA Kit神经元电压门控钙通道γ3/L-type Ca++CP γ3抗体多聚血清蛋白(PHSA)ELISA试剂盒

PARP ELISA Kit3号染色体开放阅读框25抗体多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(PARP)ELISA试剂盒

PARP ELISA Kit转录激活因子MYB抗体多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA试剂盒

VS ELISA Kit阳离子通道相关蛋白1抗体多功能蛋白聚糖(VS)ELISA试剂盒

versican ELISA Kit1号染色体开放阅读框222抗体多功能蛋白聚糖(versican)ELISA试剂盒

DT ELISA Kit2号染色体开放阅读框15抗体多巴色素异构酶(DT)ELISA试剂盒

DDC ELISA Kit细胞骨架相关蛋白4抗体多巴胺脱羧酶(DDC)ELISA试剂盒

DBH ELISA Kit肌肽二肽酶1抗体多巴胺-β羟化酶(DBH)ELISA试剂盒

D2R ELISA Kit酸性线粒体肌酸激酶抗体多巴胺D2受体(D2R)ELISA试剂盒

D1R ELISA Kit碳酸酐酶相关蛋白8抗体多巴胺D1受体(D1R)ELISA试剂盒

DA ELISA Kit钙通道电压依赖性β1蛋白抗体多巴胺(DA)ELISA试剂盒

PON3 ELISA Kit原癌基因CD39样蛋白4抗体对氧磷酶-3(PON3)ELISA试剂盒

PON ELISA Kit胶原样蛋白抗体对氧磷酶(PON)ELISA试剂盒

SMDA ELISA Kit肿瘤易感性候选基因5抗体对称二甲基精氨酸(SMDA)ELISA试剂盒

PABA ELISA Kit钙调蛋白激酶激酶β抗体对氨基苯甲酸(PABA)ELISA试剂盒

TERF2 ELISA Kit中心体肌动蛋白γ1/增强型PI3K蛋白抗体端粒重复序列结合因子2(TERF2)ELISA试剂盒

TERF1 ELISA Kit细胞分裂周期相关蛋白JPO2抗体端粒重复序列结合因子1(TERF1)ELISA试剂盒

TERT ELISA Kit半胱胺酸蛋白酶-2抗体端粒酶逆转录酶(TERT)ELISA试剂盒

TE ELISA Kit7号染色体开放阅读框63抗体端粒酶(TE)ELISA试剂盒

POT1 ELISA KitCD2结合蛋白3抗体端粒保护蛋白1(POT1)ELISA试剂盒

M-AChR M3 ELISA Kit胶原三股螺旋重复蛋白1抗体毒蕈碱型乙酰胆碱受体亚型M3(M-AChR M3)ELISA试剂盒

M-AChR ELISA Kit20号染色体开放阅读框72抗体毒蕈碱型乙酰胆碱受体(M-AChR)ELISA试剂盒

TSST-1 ELISA Kit2号染色体开放阅读框6抗体毒性休克综合征毒素1(TSST-1)ELISA试剂盒

AZT ELISA KitCD318抗体叠氮胸苷(AZT)ELISA试剂盒

AIF ELISA Kit着丝粒蛋白B抗体凋亡诱导因子(AIF)ELISA试剂盒

BIRC4/API3 ELISA Kit1号染色体开放阅读框111抗体凋亡抑制因子3(BIRC4/API3)ELISA试剂盒

ASK-1 ELISA Kit19号染色体开放阅读框80抗体凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒

FASL ELISA Kit半胱氨酸双加氧酶1抗体凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒

FAS/CD95 ELISA Kit胶原蛋白11A2抗体凋亡相关因子(FAS/CD95)ELISA试剂盒

Fas ELISA KitCUL4B蛋白抗体凋亡相关因子(Fas)ELISA试剂盒

DAPK ELISA Kit1号染色体开放阅读框103抗体凋亡相关蛋白激酶(DAPK)ELISA试剂盒

Casp4 ELISA Kit凋亡抑制因子2抗体凋亡相关半胱氨酸肽酶4(Casp4)ELISA试剂盒

Apaf-1 ELISA Kit促肾上腺皮质激素释放激素结合蛋白抗体凋亡蛋白酶激活因子1(Apaf-1)ELISA试剂盒

反应五要素:

参加PCR反应的物质主要有五种即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物：引物是PCR特异性反应的关键，PCR 产物的特异性取决于引物与模板DNA互补的程度。理论上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其设计互补的寡核苷酸链做引物，利用PCR就可将模板DNA在体外大量扩增。设计引物应遵循以下原则：
①引物长度： 15-30bp，常用为20bp左右。
②引物扩增跨度： 以200-500bp为宜，特定条件下可扩增长至10kb的片段。
③引物碱基：G+C含量以40-60%为宜，G+C太少扩增效果不佳，G+C过多易出现非特异条带。ATGC随机分布，避免5个以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物内部出现二级结构，避免两条引物间互补，特别是3'端的互补，否则会形成引物二聚体，产生非特异的扩增条带。
⑤引物3'端的碱基，特别是末及倒数第二个碱基，应严格要求配对，以避免因末端碱基不配对而导致PCR失败。
⑥引物中有或能加上合适的酶切位点， 被扩增的靶序列有适宜的酶切位点， 这对酶切分析或分子克隆很有好处。
⑦引物的特异性：引物应与核酸序列数据库的其它序列无明显同源性。
引物量：每条引物的浓度0.1～1umol或10～100pmol，以低引物量产生所需要的结果为好，引物浓度偏高会引起错配和非特异性扩增，且可增加引物之间形成二聚体的机会。