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组织来源 | 外周血 | 货号 | GOY-01X1244 |
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产品规格 | 5×105Cells/T25培养瓶 | 细胞形态 | 圆形 |
生长特性 | 悬浮 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
细胞简介:
大鼠外周血中性粒分离自外周血;外周血是除骨髓之外的血液,临床上常用一些方法把骨髓中的造血干细胞释放到血液中,再在从血液中提取分离得到造血干细胞,我们把这样得到的干细胞称为外周血干细胞,在二十一世纪初人类开始的生命方舟计划中提出外周血这一新概念。白细胞是一类无色、球形、有核的血细胞。白细胞不是一个均一的细胞群,根据其形态、功能和来源部位可以分为三大类:粒细胞、单核细胞和淋巴细胞,其中粒细胞又可根据胞质中颗粒的染色性质不同,分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞和嗜碱粒细胞三种。中性粒细胞是在瑞氏(Wright)染色血涂片中,胞质呈无色或极浅的淡红色,有许多弥散分布的细小的(0.2~0.4微米)浅红或浅紫色的颗粒。细胞核呈杆状或2~5分叶状,叶与叶间有细丝相连。中性粒细胞具趋化作用、吞噬作用和杀菌作用。中性粒细胞来源于骨髓,具有分叶形或杆状的核,胞浆内含有大量既不嗜碱也不嗜酸的中性细颗粒。这些颗粒多是溶酶体,内含髓过氧化酶、、碱性磷酸酶和酸性水解酶等丰富的酶类,与细胞的吞噬和消化功能有关。中性粒细胞在血液的非特异性免疫中起着十分重要的作用,它处于机体抵御微生物病原体,特别是在化脓性细菌入侵的线,具有很强的吞噬活性,可吞噬细菌、衰老的红细胞、抗原一抗体复合物和坏死的细胞等。中性粒细胞内含有大量溶酶体酶,因此能将吞噬入细胞内的细菌和组织碎片分解。当中性粒细胞吞噬数十个细菌后,自身发生解体,所释出的各种溶酶体酶类能溶解周围组织而形成脓液。中性粒细胞是人体内寿命最短的细胞,一般体外培养12-24h内活性稳定,48h活性下降,96h基本死亡。
方法简介:
公司实验室分离的大鼠外周血中性粒采用取外周血、通过密度梯度离心法制备而来,细胞总量约为5×10?cells/瓶。
质量检测:
公司实验室分离的大鼠外周血中性粒经瑞氏染色法,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
产品名称 | 原代大鼠外周血中性粒细胞 | 英文名称 | Rat Peripheral Blood Neutrophil Cells |
规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 货号 | GOY-01X1244 |
组织来源 | 外周血 | 细胞形态 | 圆形 |
培养信息:
培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率 每2-3天换液一次
生长特性 悬浮
细胞形态 圆形
传代特性 不增殖;不传代
消化液 0.25%yi蛋白酶
培养条件 气相:空气,95%;CO2,5%
1) 将5-10d的乳鼠浸泡入75%乙醇中,移入生物安全柜,
2) 从胸部解剖乳鼠,取出双肺置于预冷的PBS中,尽可能的除去结缔组织等,
3) 取肺边缘部分,剪碎,将组织块移入T25培养瓶中,倒置于细胞培养箱中,
4) 2h后,培养瓶中注入2 mL内皮培养基,小心将培养瓶正置于培养箱,确保组织块不会飘起来,
5) 每3d换液2mL,待细胞从组织块中爬出来后,隔2d换液,待细胞融合达到60-70%左右时,去除组织块,将肺微血管内皮细胞重新铺瓶。
1、您收到细胞后,请按照以下方法进行操作:
取出T-25cm2培养瓶,75%酒精擦拭培养瓶,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置4-6小时或过夜,以稳定细胞状态,然后换用新鲜培养液继续培养或进行传代。
2、细胞传代:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.125%消化液约2ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后加入培养液终止消化,再轻轻吹打细胞使之脱落,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm/min,离心5min;
3)弃上清,沉淀细胞用12ml培养基重悬,然后按1:2比例进行分瓶传代,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞贴壁后,观察培养结果,之后进行换液培养或传代。
3、细胞冻存:
1)细胞生长至覆盖培养瓶的80%面积时,弃25cm2培养瓶中的培养液,用PBS清洗细胞一次;
2)添加0.125%消化液约2ml至培养瓶中,倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后轻轻吹打细胞使之脱落,再加入培养液终止消化,然后将悬液转移至15ml离心管中,1500rpm/min,离心5min;
3)用适当量的冻存液(基础培养基:FBS:DMSO=7:2:1)重悬细胞,并放置于冻存管中;
4)先将细胞冻存管放置于-20℃ 1.5h,然后将其移入-80℃过夜,24h后转入液氮中进行长期保存。
4、细胞复苏:
1)从液氮中取出细胞冻存管(注意:佩戴防爆管面具), 快速将其置入37℃水浴中解冻,直至冻存管中无结晶,然后用75%的酒精擦拭冻存管外壁;
2)将冻存管中的细胞移至15ml无菌离心管中,滴加入培养液5ml混匀细胞,然后将细胞悬液转移至适当面积大小的培养皿中;
3)放置于37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)第二天,换用新鲜培养基继续培养。
人脑星形胶质母细胞瘤(红色标记 ) | 人神经母细胞瘤细胞Luciferase荧光稳转株 |
人胆囊癌细胞Luciferase荧光稳转株 | 鼻血吸虫PCR检测试剂盒 |
人肺腺癌细胞Luciferase荧光稳转株 | 梭形血吸虫PCR检测试剂盒 |
小鼠黑色瘤细胞Luciferase荧光稳转株 | 施马伦贝格病毒PCR检测试剂盒 |
人肝癌细胞Luciferase荧光稳转株 | 血吸虫通用PCR检测试剂盒 |
人结直肠癌细胞Luciferase荧光稳转株 | 塞姆利基森林病毒PCR检测试剂盒 |
人结直肠腺癌细胞Luciferase荧光稳转株 | 仙台病毒PCR检测试剂盒 |
AsPC-1 人转移胰腺腺癌细胞 | 塞内加谷病毒PCR检测试剂盒 |
人结肠癌细胞Luciferase荧光稳转株 | 羊血吸虫PCR检测试剂盒 |
人喉表皮癌细胞Luciferase荧光稳转株 | 印度血吸虫PCR检测试剂盒 |
鼻咽癌细胞Luciferase荧光稳转株 | 不明血吸虫PCR检测试剂盒 |
人高转移卵巢癌细胞Luciferase荧光稳转株 | 柯拉松血吸虫PCR检测试剂盒 |
人胃癌细胞Luciferase荧光稳转株 | 原代大鼠外周血中性粒细胞牛血吸虫PCR检测试剂盒 |
人胚肾上皮细胞 | 疥螨通用PCR检测试剂盒 |
水稻內源基因检测试剂盒(恒温荧光法) | 马疥螨PCR检测试剂盒 |
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