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组织来源 | 小肠组织 | 货号 | GOY-01X1503 |
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产品规格 | 5×105Cells/T25培养瓶 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁 | 用途 | 仅供科研研究实验 |
原代兔小肠平滑肌细胞
英文名称 | Rabbit Small Intestine Smooth Muscle Cells | 组织来源 | 小肠组织 |
产品规格 | 5×10⁵Cells/T25培养瓶 | 细胞形态 | 成纤维细胞样 |
生长特性 | 贴壁 | 货号 | GOY-01X1503 |
培养信息:包被条件
培养基含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
换液频率:每2-3天换液一次
生长特性:贴壁
细胞形态:成纤维细胞样
传代特性:可传5代左右;3代以内状态最佳
消化液:0.25%YI蛋白酶兔小肠平滑肌细胞体外培养周期有限;建议使用配套的专用生长培养基及正确的操作方法来培养,以此保证该细胞的最佳培养状态。
兔小肠平滑肌细胞分离自小肠组织;小肠位于腹中,上端接幽门与胃相通,下端通过阑门与大肠相连,是食物消化吸收的主要场所。小肠盘曲于腹腔内,上连胃幽门,下接盲肠,分为十二指肠、空肠和回肠三部分。小肠内消化是至关重要的,因为食物经过小肠内胰液、胆汁和小肠液的化学性消化及小肠运动的机械性消化后,基本上完成了消化过程,同时营养物质被小肠粘膜吸收了。小肠管壁由粘膜、粘膜下层、肌层和浆膜构成。其结构特点是管壁有环形皱襞,粘膜有许多绒毛,绒毛根部的上皮下陷至固有层,形成管状的肠腺,其开口位于绒毛根部之间。绒毛和肠腺与小肠的消化和吸收功能关系密切;构成肠腺的细胞有柱状细胞、杯状细胞、潘氏细胞和未分化细胞。柱状细胞和内分泌细胞与绒毛上皮相似,接近绒毛的柱状细胞与吸收细胞相似,绒毛深部的柱状细胞微绒毛少而短,不形成纹状缘。小肠有三种功能即消化、吸收和分泌及运动功能,其中以吸收和分泌功能为主。平滑肌细胞的收缩是负责肠蠕动的动力,促使食物向下运动。小肠平滑肌细胞原代分离培养3天后,可见细胞贴壁伸展,细胞形态:大小不一,呈梭形、不规则形、三角形或扇形,核卵圆形、居中;2周后细胞汇合,多数细胞伸展呈长梭形,胞浆丰富,有分枝状突起,细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长,高低起伏;细胞密度低时,常交织成网状;密度高时,则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快,4-6天即可汇合,并保持上述形态学特征和生长特点。小肠平滑肌肉瘤是起源于小肠壁肌层、黏膜下肌层和肠壁血管平滑肌的恶性肿瘤,是小肠结缔组织恶性肿瘤中最常见的一种。因此,体外小肠平滑肌细胞的培养对研究小肠平滑肌肉瘤提供了基础和前提。此外,体外培养细胞,由于影响因素较为单一,是研究细胞功能以及相应的细胞信号转导机制的基础。 |
方法简介:
实验室分离的兔小肠平滑肌细胞采用YI蛋白酶-胶原酶联合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10⁵cells/瓶。
质量检测:
实验室分离的兔小肠平滑肌细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
1. 组织块培养法
组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中,瓶壁可预先涂以胶原薄层,以利于组织块粘着于瓶壁,使周边细胞能沿瓶壁向外生长。
2. 消化培养法
组织消化法是把组织剪切成较小团块(或糊状),应用酶的生化作用和 非酶的化学作用进一步使细胞间的桥连结构松动,使团块膨松,由块状 变成 絮状,此时再采用机械法,用吸管吹打分散或电磁搅拌或在摇珠 瓶中振荡,使细胞团块得以较充分的分散,制成少量细胞群团和大量单个细胞的细胞悬液,接种培养后,细胞容易贴壁生长。
3. 悬浮细胞培养法
对于悬浮生长的细胞,如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化,可采用低速离心分离,直接培养,或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。
4. 器官培养
器官培养是指从供体取得器官或组织块后,不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养,器官培养可保持器官组织的相对完整性,可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响,以及局部环境的生物调节作用。
1. 取材的组织要尽快培养。如若不能及时培养,可将组织浸泡于培养液内,放置于冰浴或4℃冰箱中,如果组织块很大,应切成1cm3以下的小块再低温保存,但时间不能超过24h。
2. 从消化道、周围有坏死组织等污染因素存在的区域取材,可用含500~1000u/ml的青BSS液漂洗5~10min,或用10%注射液冲洗浸泡10min再作培养。
3. 组织块不易贴壁,可预先在瓶壁涂薄层血清、胎汁或鼠尾胶原等。
4. 原代培养的1~2d内要特别注意观察是否有细菌、真菌、霉菌的污染,一旦发现,要及时清除。
人外根鞘细胞 | 人毛囊角质细胞 |
人骨骼肌细胞 | 猫疱疹病毒(FHV)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人韧带成纤维细胞 | 犬巴贝斯虫(Bab)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人类风湿关节炎滑膜成纤维细胞 | 鹦鹉热衣原体(CP)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人脊柱炎髋关节滑膜成纤维细胞 | 犬衣原体(CP)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人关节滑膜成纤维细胞 | 牛结节性皮肤病(LSDV)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人骨髓间充质干细胞 | 羊传染性胸膜肺炎(MPSG)检测试剂盒(荧光PCR法) |
幼兔肺成纤维样细胞 | 马链球(S. equi)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人黑色瘤细胞 | 猫衣原体(CP)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人尾椎肿瘤细胞 | 猫支原体(MF)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人毛囊成纤维细胞 | 羊肺炎支原体(MO)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人黑色细胞 | 牛腺病毒3型(BAV-3)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人脂肪干细胞 | 原代兔小肠平滑肌细胞牛细小病毒(BPV)检测试剂盒(荧光PCR法) |
人软骨细胞 | 牛支原体(MYPB)检测试剂盒(荧光PCR法) |
脑膜炎球属C型核(NM-C)检测试剂盒(荧光PCR法) | 羊衣原体(OC)检测试剂盒(荧光PCR法) |
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