介绍细胞系的冻存步骤

细胞系低温冻存是培养室常规工作和通用技术。下面我们就来介绍一下细胞冻存的步骤：1.选对数增生期细胞,在冻存前1d换液。 
2.按常规方法把培养细胞制备成悬液，计数，使细胞密度达5×10 7 ／ml左右密度，离心，去上清。 
3.加入配制好的冻存液，按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中，然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10％二甲基亚砜或甘油，可使冰点降低，使细胞内水分在冻结前透出细胞外。 
4.分装于无菌冻存管中，每管加1.5m悬液。 
5.旋好冻存管并仔细检查，一定要盖紧，做好标记。 
6.冻存：在特殊的 仪器 或简易的液氮容器中，按-1℃／min的速度，在30～40min时间内，下降到液氮表面，再停30min后，直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度，过快能影响细胞系内水分透出，太慢则促进冰晶形成。 
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