上海研生实业有限公司
初级会员 | 第10年

15201736385

细胞系存活率低该如何解决

时间:2017/9/21阅读:436
分享:

在解冻细胞系时,发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题, 是什么原因导致,该怎么进行解决?现在我们大家一起往下看吧。或许能给您的实验问题的解决找到答案!
低存活率
出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下:
1.解冻过程中细胞裂解
推荐的解决方案:可预期到一定量的细胞死亡,因此细胞的浓度应足够高,考虑到这一损失。起始浓度为106至107细胞/毫升。
2.解冻过程中的问题
推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养。
3.对冷冻液过敏
推荐的解决方案:A.*或部分更换培养基,减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。
B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物,取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的条件在对数期。
4.被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄
推荐的解决方案:解冻Z近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长,存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
大量细胞碎片
出现大量细胞碎片的可能原因及推荐解决方案如下:
1.冷冻时细胞密度过低
推荐的解决方案:缩短解冻过程中的时间。将细胞取出后,立即将冻存管浸入在37℃的水浴中,并震荡至全部融化,然后迅速地转移到预热的培养基中。
2.不适当的冷冻过程
推荐的解决方案:解冻不同冷冻室总的试管。确保在冻存过程中采用的适当的技术,并确保使用了适量和适合的冷冻液。
生长缓慢
出现生长缓慢的可能原因及推荐解决方案如下:
1.培养瓶的大小
推荐的解决方案:一些细胞系在培养基中倾向于维持一定的密度。将培养物转移到较小的培养瓶中,使细胞密度上升;如,根据培养基的体积,从75cm2的烧瓶转移到2或3个25cm2的烧瓶中。
2.细胞密度过低
推荐的解决方案:提高未来冷冻物种细胞的冻存密度,或使用较小的培养容器,或解冻多个试管来进行培养。
规格:    Multi-class antibodies    Anti-Beta-Actin  β-肌动蛋白抗体(内参抗体)     0.1ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉样肽 1-40 (C端)抗体     0.1ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid 1-40(CT)  β淀粉样肽1-40(C端)抗体     0.1ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid 1-42(CT)  β淀粉样肽1-42 (C端)抗体     0.1ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid(1-16)   β淀粉样肽(1-16)抗体(小鼠、大鼠)     0.1ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid(1-16) (human)  β淀粉样肽(1-16)抗体(人)     0.1ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid(1-28)  β淀粉样肽(1-28)抗体     0.1ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid(1-28)  β淀粉样肽(1-28)抗体     0.1ml
规格:    Multi-class antibodies    Anti-beta-Amyloid(1-40)  β淀粉样肽(1-40)抗体     0.1ml
细胞系

 

会员登录

×

请输入账号

请输入密码

=

请输验证码

收藏该商铺

X
该信息已收藏!
标签:
保存成功

(空格分隔,最多3个,单个标签最多10个字符)

常用:

提示

X
您的留言已提交成功!我们将在第一时间回复您~
在线留言